·基础研究·人结节型皮肤基底细胞癌病变组织和细胞株中视蛋白３的表达及功能∗∗许佳１，２∗∗，韩宁１，２，章俊１，２，兰应华１，２，辜阳广１，２，罗欢欢１，２，杨玉麟１，２，汪宇２，陆洪光２∗∗∗（１．贵州医科大学临床医学院皮肤病与性病学教研室，贵州贵阳５５００２５；２．贵州医科大学附属医院皮肤科，贵州贵阳５５０００４）［摘要］目的探讨人结节型皮肤基底细胞癌（ＢＣＣ）病变组织及细胞株中视蛋白３（ＯＰＮ３）的表达及功能。方法选取３１例结节型ＢＣＣ患者病灶组织及相邻癌旁正常组织（ＰＡＮＳＴ）分别作为病灶组及ＰＡＮＳＴ组，采用免疫荧光染色法检测ＯＰＮ３的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及实时荧光定量ＰＣＲ（ＲＴ⁃ｑＰＣＲ）分别检测２组标本组织中ＯＰＮ３蛋白及ｍＲＮＡ的表达；取对数生长期的人ＢＣＣ细胞株ＴＥ３５４Ｔ，分为对照（Ｃｏｎｔｒｏｌ）组、空白（ＲＮＡｉ⁃ＮＣ）组及实验（ＲＮＡｉ⁃ＯＰＮ３）组，并设计针对人ＯＰＮ３的小干扰ＲＮＡ转染ＴＥ３５４Ｔ细胞，采用ＣｅｌｌＣｏｕｎｔｉｎｇＫｉｔ⁃８（ＣＣＫ⁃８）检测ＯＰＮ３下调后０、２４、４８及７２ｈＲＮＡｉ⁃ＮＣ组及ＲＮＡｉ⁃ＯＰＮ３组的细胞增殖活性，采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ迁移和细胞划痕实验检测ＯＰＮ３下调４８ｈ后２组细胞的迁移能力，采用流式细胞术和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分别检测ＯＰＮ３下调４８ｈ后２组细胞凋亡数量及钙通道相关蛋白环磷腺苷效应元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）、磷酸化ＣＲＥＢ（ｐ⁃ＣＲＥＢ）、钙调蛋白依赖激酶Ⅱ（ＣＡＭＫⅡ）、磷酸化ＣＡＭＫⅡ（ｐ⁃ＣＡＭＫⅡ）的表达。结果与ＰＡＮＳＴ组比较，病灶组ＢＣＣ组织中ＯＰＮ３表达增高（Ｐ＜０.０５）；下调ＯＰＮ３后７２ｈ，ＲＮＡｉ⁃ＯＰＮ３组ＴＥ３５４Ｔ细胞增殖活性较ＲＮＡｉ⁃ＮＣ组下降（Ｐ＜０.０５）；下调ＯＰＮ３后４８ｈ，与ＲＮＡｉ⁃ＮＣ组相比，ＲＮＡｉ⁃ＯＰＮ３组ＴＥ３５４Ｔ细胞迁移能力降低（Ｐ＜０.０５），ＴＥ３５４Ｔ细胞凋亡细胞数量增加（Ｐ＜０.０５），ＴＥ３５４Ｔ细胞钙通道相关蛋白ｐ⁃ＣＲＥＢ和ｐ⁃ＣＡＭＫⅡ表达下降（Ｐ＜０.０５）。结论ＯＰＮ３在人结节型ＢＣＣ组织中高表达，可调控人ＢＣＣ系ＴＥ３５４Ｔ细胞的增殖、迁移及凋亡，其机制可能与钙依赖Ｇ蛋白偶联受体（ＧＰＣＲ）信号通路有关。［关键词］细胞增殖；细胞凋亡；视蛋白３；Ｇ蛋白偶联受体；人结节型基底细胞癌；迁移［中图分类号］...
