人类免疫缺陷病毒抗体阳性样...的蛋白免疫印迹试验带型分析_屈娅荣.pdf

山西医药杂志 2023 年 4 月第 52 卷第 8 期Shanxi Med J，April 2023，Vol.52.No.8人类免疫缺陷病毒抗体阳性样本 661 例的蛋白免疫印迹试验带型分析屈娅荣杜冬冬刘斌刘万静李海燕杨力焦欢【摘要】目的回顾性分析 20152021 年安康市艾滋病确证实验室 661 例蛋白免疫印迹试验 HIV抗体阳性样本的带型，探讨蛋白免疫印迹试验(WB)带型与 HIV 感染与流行之间的关系。方法对 20152021 年 661 例蛋白免疫印迹试验 HIV 抗体阳性样品的带型进行整理，并使用 SPSS 22.0 软件进行统计分析。结果661 例免疫印迹试验 HIV 抗体阳性的样品中，以全带和次全带为主，其中抗 env 基因编码的包膜蛋白抗体反应性最高率；gp160 和 gp120 蛋白中的 p55 反应性率较低，为 49.8%；抗 gag 基因编码的核心蛋白中，p39 的反应性率较低，为 53.6%。HIV 抗体 WB 试验阳性结果者多为中青年，且多为男性，男女比例为2.73:1，带型 p24 在不同性别间的反应性率差异有统计学意义(2=13.78，P0.05)。带型 p55,p39,p24,p17 反应性率在不同年龄组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论WB 条带的分布差异分析有助于总结本地区HIV 流行规律与特征，为 HIV 防控策略的制定提供理论基础。【关键词】HIV 抗体；印迹法，蛋白质；分析Analysis of banding patterns in 661 HIV antibody positive samples by Western blot Qu Yarong,Du Dongdong,Liu Bin,Liu Wanjing,Li Haiyan,Yang Li,Jiao Huan.Department of Biological Laboratory,Ankang Center forDisease Control and Prevention,Shaanxi 725000，China【Abstract】ObjectiveA retrospective analysis was performed on the banding of 661 HIV antibody Westernblotting(WB)test positive samples from Ankang AIDS Confirmatory Laboratory from 2015 to 2021,and therelationship between WB banding and HIV infection and prevalence were explored.MethodsA total of 661 HIVantibody WB test-positive bands were statistically analyzed from 2015 to 2021 and the SPSS 22.0 software was usedfor statistical analysis.ResultsAmong the 661 HIV WB positive samples,the full band and sub-full band weredominant,the antibody reactivity rate of the envelope protein encoded by the anti-env gene was the highest,thereactivity rate of gp160 and gp120 reached 100%,the p55 reactivity rate in the reverse transcription proteinencoded by the anti-pol gene was low(49.8%),and the reactivity rate of p39 was low(53.6%).Most of the positiveresults of HIV antibody with WB test were young and middle-aged people,and most of them were male,with amale-to-female ratio of 2.73:1,and the reactivity rate of band p24 among different sexes was statistically significant(2=13.78,P0.05).The reactivity rates of bands p55,p39,p24 and p17 were statistically different between differentage groups(P0.05).ConclusionThe analysis of the distribution difference of WB bands can help summarizingthe pattern and characteristics of HIV epidemic in this region,and providing a theoretical basis for the formulationof HIV prevention and control strategies.【Key words】HIV antibodies;Blotting,Western;AnalyzeDOI：10.3969/j.issn.0253-9926.2023.08.006作者单位：725000 陕西省安康市疾病预防控制中心生物检验科通信作者：焦欢，Email：JHH艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引发的一种严重危害人类生命健康传染病，目前我国诊断艾滋病的主要方式仍然是通过病原学检测为主，艾滋病病毒检测工作是艾滋病防治工作的基础，根据现行 全国艾滋病检测技术规范 和 艾滋病和艾滋病感染诊断1，2实施方案中的要求，对于HIV 抗体筛查阳性的标本应进行补充试验，目前蛋白质免疫印迹(Western bloting，WB)仍然是常用的检测方法。WB 技术是基于 HIV 不同抗原组分的分离及浓缩和纯化，可检测出血清或血浆中微量的不同抗原成分的 HIV 特异性抗体。由于 HIV 抗原的免疫原性和个体的免疫应答反应强弱不同，HIV进入个体后产生抗体的时间、浓度和滴度有个体差异3。这些差异可在 WB 试验条带上直观的显现。本文通过 661 例免疫印迹试验 HIV 抗体阳性标本带型进行回顾性分析，了解 HIV 感染状态和疾病进程，探索其中的规律，为艾滋病诊断及防治提供思路。589山西医药杂志 2023 年 4 月第 52 卷第 8 期Shanxi Med J，April 2023，Vol.52.No.8envgp160阳性484%100阳性177gp120484100177gp4147898.8177%100100100-0.137-2.21polp6647698.417598.90.6260.24p5146095.017196.60.740.391p3145591.017297.22.660.103gagp5524550.68447.50.520.472p2448410017297.213.780.001p1741485.514682.50.930.334带型男性女性P值2值表 2不同性别 HIV 抗体阳性样本 WB 带型分布表p3925552.79955.90.550.459注：HIV：人类免疫缺陷病毒；WB：蛋白免疫印迹试验1资料与方法11样本来源20152021 年，由辖区内各艾滋病筛查实验室送检的初筛阳性样品及到我中心进行自愿咨询检测的初筛阳性的样品，经安康市艾滋病确证实验室WB 试验确证为 HIV 抗体阳性的样品，共计 661 例。12方法采用 WB 进行确证实验，试剂为新加坡 MP 生物医学亚太私人有限公司生产，试剂盒在有效期内使用并严格按照说明书操作，结果判读按照 全国艾滋病检测技术规范 和试剂说明书进行。13统计方法收集数据采用 SPSS 200 软件进行统计学分析，带型阳性检出率比较用 2检验，P005 为差异有统计学意义。2结果21WB 带型总体分布661 份蛋白免疫印迹 HIV 抗体阳性样品的带型，以全带和次全带为主，其中，抗 env 基因编码的包膜蛋白抗体反应性最高率，gp160 和 gp120 条带反应性率均为 100%，gp41 的反应性率为 991%，抗pol 基因编码的反转录蛋白中的 p51 和 p31 反应性率为 955%和 949%，抗 gag 基因编码的核心蛋白中，p55 反应性率较低为 498%，p39 的反应性率较低，为 536%，p24 和 p17 分别为 992%和 847%。661 例确证阳性标本 WB 带型分布情况见表 1。22不同性别确证阳性带型分布情况661 例阳性样品中，男性占 732%(484 例)，女性占 268%(177 例)，男女比例为 2731；带型 p24的反应性率在不同性别间比较差异有统计学意义(P005)。见表 2。23不同年龄组确证阳性条带分布情况661 例阳性样品中，年龄 279 岁，18 岁的占 23%(15 例)，1939 岁的占 517%(342 例)，4059岁的占 354%(234 例)，60 岁的占 106%(70例)，带型p55，p39，p24，p17 反应性率在不同年龄组间比较差异有统计学意义(P005)。见表 3。3讨论661 份 HIV-1 抗体阳性样本中，WB 带型以全带和次全带为主。提示本地区大部分感染者处于HIV 活跃期4，病毒在体内繁殖活跃，具有极强的传染性，医务人员在进行医疗操作时候应加强防护。同时全带型出现的情况推测本地区的可能还要部分极早期感染者并未被发现，这与当地的检测策略有极大的关系，当地医疗系统对 HIV 感染者的诊断依赖疾控机构出具的 WB 确证报告，导致部分初筛实验有反应而 WB 结果为不确定的早期感染者无法尽快确诊。这种不确定结果不仅增加了病人的心理负担，也会增加医疗负担和疾病传播的风险，因此在临床应用中对初筛结果异常而 WB 结果不确定人群应尽早进行核酸检测，有利于控制 HIV 的传播。HIV 抗体 WB 实验中 p24 带型分布在不同性别间差异有统计学意义，女性的阳性概率(972%)显著低于男性的阳性概率(100%)，(2=1378，P005)。这与黎俊宏等5和叶灵等6的研究结果有所不同。分析其原因可能由于本地区确证阳性患者中男性患者比例较多，与传播途径、不同地域及遗传背景等因素有关7。p55，p39，p24，p17 条带在各年env包膜糖蛋白gp160gp120gp41pol反转录蛋白p66p51p31gag核心蛋白p55p24p17p39类型带型表 1661 例确证阳性标本 WB 带型分布表阳性661100661100655991651985631955627949329498656992560847354536例数%590山西医药杂志 2023 年 4 月第 52 卷第 8 期Shanxi Med J，April 2023，Vol.52.No.8envgp160gp120gp41-0321-345polp660960030p512850415p312000572gagp558040045p249190027p179220027表 3不同年龄 HIV-1 抗体阳性样本 WB 带型检出率比较18 岁（15 例）1939岁（342 例）4059 岁（234 例）60岁（70 例）151003421002341001510034210023410015100340994232992701007010068971151