分类号：密级：UDC：学号：401442720032南昌大学硕士研究生学位论文TRIM33通过SIRT1依赖的去乙酰化修饰调控MCM7在肺癌中的功能及其机制研究RoleandmechanismofTRIM33inregulatingMCM7functionthroughSIRT1-dependentdeacetylationinlungcancer张贝培养单位（院、系）：南昌大学基础医学院指导教师姓名、职称：谢彩凤副教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称：基础医学论文答辩日期：2023年6月3日答辩委员会主席：郑里翔评阅人：盲审盲审2023年6月摘要II摘要研究背景：肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，也是全球死亡率最高的癌症，而其中非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌的主要类型。虽然在过去的几十年肺癌的临床治疗取得了很大的进展，但目前肺癌的5年总生存率（OS）仅18%~19%，而NSCLC的OS约为15%。肺癌患者的OS相对较低可能归因于缺乏高度敏感的早期筛查诊断和精确的靶向治疗。因此，寻找新的分子靶点，对于提高肺癌患者生存率、改善预后具有重要的意义。TRIM33（TripartiteMotifContaining33）是三结构域蛋白（TRIM）家族中的一员，由于该家族成员普遍具有RING结构域，被视为一类典型的E3泛素连接酶，广泛参与了免疫、炎症、肿瘤等生理病理过程。其中，TRIM33在肿瘤中的功能较为复杂，其在不同肿瘤中可能发挥的作用不同。目前对于TRIM33在肺癌中的功能及其机制并不明确，特别是TRIM33是否通过其E3泛素连接酶的功能影响NSCLC的发生发展亦不可知。目的：通过细胞表型实验分析TRIM33在非小细胞肺癌中的功能，后发现TRIM33可抑制NSCLC细胞增殖，但其具体作用机制不明确。本文将探讨TRIM33通过微小染色体维持蛋白7（Minichromosomemaintenanceprotein7，MCM7）调控细胞增殖的潜在机制，并将进一步分析该调控机制与TRIM33的乙酰化修饰之间的可能联系。方法：（1）通过蛋白免疫印迹实验(WesternBlot)检测TRIM33在正常肺上皮细胞和NSCLC细胞株中的表达情况。利用TCGA和GTEx数据库分析TRIM33在正常肺组织和NSCLC组织中的差异表达情况，以及TRIM33与疾病分期和患者生存期的关联。（2）构建TRIM33过表达和敲除质粒，用细胞生长实验和transwell实验评估NSCLC细胞株NCI-H1299在TRIM33过表达或敲除条件下的细胞增殖和迁移情摘要III况。用WesternBlot检测N-cadherin、β-catenin、Vimentin和Snail的蛋白水平考察细胞的EMT情况。（3）利用质谱分析法(MS)、免疫共沉淀(Co-IP)和免疫荧光技术(IF)确定TRIM33和MCM7的相互作用，用WesternBlot检测过表达或者沉默TRIM33对...
