[收稿日期]2021-03-30摇[修回日期]2022-07-27[基金项目]安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2019A0364,2022AH051480);中国卒中学会脑血管病全程管理启航基金(2021);蚌埠医学院自然科学研究重点项目(2021byzd128)[作者单位]蚌埠医学院第一附属医院神经内科,安徽蚌埠233004[作者简介]骆摇嵩(1986-),男,硕士,副主任医师,副教授.[文章编号]1000鄄2200(2023)05鄄0561鄄04·基础医学·miR鄄34c抑制NLRP3炎性小体诱导的小胶质细胞焦亡机制研究骆摇嵩,李摇理,刘东亮,屈洪党[摘要]目的:探索miR鄄34c在调控NLRP3炎性小体激活caspase鄄1信号通路诱导小胶质细胞焦亡中的作用。方法:观察脂多糖(LPS)联合ATP激活小胶质细胞后,通过乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒检测LDH的释放,以判断小胶质细胞细胞膜的完整性;再对miR鄄34c转染后的小胶质细胞在LPS和ATP激活下,观察小胶质细胞细胞膜变化。采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK鄄8)分别检测miR鄄34c转染后的小胶质细胞和未转染的小胶质细胞在LPS和ATP刺激下活力变化情况。采用蛋白免疫印迹分别检测LPS+ATP诱导的小胶质细胞(对照组)中和miR鄄34c转染后小胶质细胞(观察组)中的蛋白表达情况,如NLRP3炎性小体、caspase鄄1、GSDMD、IL鄄1茁、IL鄄18。结果:LPS+ATP联合诱导下的小胶质细胞较正常的小胶质细胞,miR鄄34c表达减少(P<0.01);观察组小胶质细胞LDH释放水平较对照组下降(P<0.01);CCK鄄8测试细胞活力中,2组小胶质细胞除第1天活力差异无统计学意义(P>0.05)外,其他时间观察组均明显高于对照组(P<0.01);观察组中小胶质细胞中NLRP3炎性小体、caspase鄄1、GSDMD、IL鄄1茁、IL鄄18生成较之对照组小胶质细胞中炎性小体相关因子减少(P<0.01)。结论:miR鄄34c可以抑制LPS+ATP诱导的小胶质细胞焦亡,可能通过降低NLRP3炎性小体活化及下游caspase鄄1依赖细胞焦亡信号通路关键蛋白表达有关。[关键词]细胞焦亡;miR鄄34c;NLRP3炎性小体;小胶质细胞[中图法分类号]R743.3摇摇摇[文献标志码]A摇摇摇DOI:10.13898/j.cnki.issn.1000鄄2200.2023.05.001StudyonthemechanismofmiR鄄34cinhibitingNLRP3inflammasome鄄inducedmicrogliapyrolysisLUOSong,LILi,LIUDong鄄liang,QUHong鄄dang(DepartmentofNeurology,TheFirstAffiliatedHospitalofBengbuMedicalCollege,BengbuAnhui233004,China)[Abstract]Objective:ToexploretheroleofmiR鄄34cinregulatingNLRP3inflammasometoactivatethecaspase鄄1signalingpathwaytoinducemicrogliapyrolysis.M...
