激活转录因子2、胱天蛋白酶9在结直肠腺瘤、结直肠癌中的表达及意义.pdf

癌症进展2023 年 4 月第 21 卷第 8 期ONCOLOGY PROGRESS,Apr 2023 V ol.21,No.8*论著*激活转录因子激活转录因子2 2、胱天蛋白酶胱天蛋白酶9 9在结直肠腺瘤在结直肠腺瘤、结直肠癌中的表达结直肠癌中的表达及意义及意义田二青1，任丽梅2#，武金宝2，王驰2，苏琪皓2，刘中华11内蒙古科技大学包头医学院，内蒙古 包头 0140402包头医学院第二附属医院消化科，内蒙古 包头 0140310摘要摘要：目的目的探讨激活转录因子2（ATF2）、胱天蛋白酶9（caspase 9）在结直肠癌（CRC）、结直肠腺瘤（CRA）中的表达及意义。方法方法收集50例CRC患者的CRC组织及对应癌旁组织（距离病灶边缘10 cm以上）、30例CRA患者的CRA组织。采用免疫组化法检测不同组织中ATF2、caspase 9的表达情况，并分析其与临床特征的关系及二者的相关性。结果结果CRC组织中ATF2、caspase 9阳性表达率均低于CRA组织和癌旁组织，CRA组织中caspase 9阳性表达率低于癌旁组织，差异均有统计学意义（P0.05）。浸润深度为肌层以内、TNM分期为+期、无淋巴结转移CRC患者CRC组织中ATF2阳性表达率分别高于浸润深度为浆膜及浆膜外、TNM分期为+期、有淋巴结转移患者，差异均有统计学意义（P0.05）；分化程度为高分化、TNM分期为+期、无淋巴结转移CRC患者CRC组织中caspase 9阳性表达率分别高于分化程度为中+低分化、TNM分期为+期、有淋巴结转移患者，差异均有统计学意义（P0.05）。Spearman相关分析显示，CRC组织中ATF2与caspase 9的表达呈正相关（r=0.418，P=0.003）。结论结论ATF2和caspase 9与CRA、CRC的发生和发展有关。关键词关键词：激活转录因子2；胱天蛋白酶9；结直肠癌；结直肠腺瘤；免疫组化中图分类号中图分类号：R R735735.3 3文献标志码文献标志码：AdoiAdoi：10.11877/j.issn.1672-1535.2023.21.08.10Expression and significance of activating transcription factorExpression and significance of activating transcription factor 2 2 and caspaseand caspase 9 9 in incolorectal adenomas and colorectal cancercolorectal adenomas and colorectal cancerTIAN Erqing1,REN Limei2#,WU Jinbao2,WANG Chi2,SU Qihao2,LIU Zhonghua11Baotou Medical College,Inner Mongolia University of Science and Technology,Baotou 014040,Inner Mongolia,China2Department of Gastroenterology,the Second Affiliated Hospital of Baotou Medical College,Baotou 014031,Inner Mongolia,ChinaAbstract:ObjectiveAbstract:ObjectiveTo explore the expression and significance of activating transcription factor 2(ATF2)and cas-pase 9 in colorectal cancer(CRC)and colorectal adenoma(CRA).MethodMethodA total of 50 cases of CRC and correspond-ing paracancerous tissues(10 cm from the tumor margin)and 30 cases of CRA tissues were collected.The expressionsof ATF2 and caspase 9 in different tissues were detected by immunohistochemistry,their relationship with the clinical fea-tures and the correlation of ATF2 with caspase 9 were analyzed.ResultResultThe positive expression rates of ATF2 and cas-pase 9 in CRC tissues were lower than those in CRA and paracancerous tissues,and the positive expression rate of cas-pase 9 in CRA tissues was lower than that in paracancerous tissues(P0.05).The positive expression rates of ATF2 inCRC tissues of CRC patients with tumor invasion within the muscularis propria,TNM I+II stages and without lymphnode metastasis were higher than those in patients with plasma membrane and extraplasma membrane invasion,TNM III+IV stages and with lymph node metastasis(P0.05).The positive expression rates of caspase 9 in CRC tissues of CRC pa-tients with high differentiation,TNM I+II stages and without lymph node metastasis were higher than those in patientswith moderate+low differentiation,TNM III+IV stages and with lymph node metastasis(P0.05).Spearman analysisshowed that the expression of ATF2 and caspase 9 in CRC tissues was positively correlated(r=0.418,P=0.003).ConcluConclu-sionsionATF2 and caspase 9 are associated with the occurrence and development of CRAand CRC.Key words:Key words:activating transcription factor 2;caspase 9;colorectal cancer;colorectal adenoma;immunohistochemis-tryOncol Prog,2023,21(8)结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是常见的消化道恶性肿瘤1，近年来，其发病率和病死率分别居所有肿瘤的第二位和第五位2，并且逐渐呈年轻化趋势3。有40%的CRC患者行结直肠癌切除术后因病情恶化、复发导致死亡4。CRC的发生涉及多种致病机制，包括基因融合、遗传不稳定性、体细胞突变等5-6，目前尚未完全明确。结直肠腺瘤（colorectal adenomas，CRA）被认为是一种重要的基金项目：内蒙古自治区自然科学基金（2020LH08005）#通信作者（corresponding author），邮箱：851癌症进展2023年4月第21卷第8期癌前病变，90%以上的CRC由CRA发展而来，且从癌前病变发展到肿瘤通常需要510年4。激活转录因子 2（activating transcription factor 2，ATF2）是一种应激诱导型转录因子，不仅在细胞核中起到致癌作用，还在细胞质中起到抑癌作用，作用机制为通过线粒体凋亡通路激活胱天蛋白酶9（caspase9）的活性，从而促进细胞凋亡。目前，关于 ATF2和 caspase 9 在 CRA 和 CRC 中表达的报道很少。本研究检测ATF2和caspase 9在CRC组织、CRA组织和癌旁组织中的表达水平，并分析其与CRC患者临床特征的关系，进而探讨ATF2和caspase 9在CRC中的致病机制，现报道如下。1 1资料与方法资料与方法1 1.1 1 一般资料一般资料收集2019年1月至2022年1月包头医学院第二附属医院收治的 CRC、CRA 患者的病历资料。纳入标准：经病理学检查确诊；术前无任何放化疗等抗肿瘤治疗；临床资料完整。排除标准：合并其他肿瘤；合并心、肝、肾功能障碍或其他严重基础疾病。根据纳入、排除标准，共纳入 50 例 CRC 患者和30例CRA患者。CRC患者中，男性23例，女性27例；年龄3688岁，平均（51.467.38）岁；分化程度：高分化 19 例，中+低分化 31 例；TNM 分期：+期27例，+期23例；浸润深度：肌层以内22例，浆膜及浆膜外28例；淋巴结阳性19例，淋巴结阴性31例。CRA患者中，男性13例，女性17例；年龄 3284 岁，平均（49.327.19）岁；管状腺瘤 9例，绒毛状腺瘤13例，管状绒毛状腺瘤8例。CRC和CRA 患者年龄、性别比较，差异均无统计学意义（P0.05），具有可比性。取 50 例 CRC 患者的CRC组织及对应癌旁组织（距离病灶边缘10 cm以上）、30例CRA患者的CRA组织。本研究经医院伦理委员会批准通过，所有患者均知情同意。1 1.2 2 免疫组化检测方法免疫组化检测方法兔抗人ATF2、caspase 9多克隆抗体均以1 300比例稀释，将蜡块切成4 m厚的切片，然后依次行烤蜡、水化、抗原修复、PV二步法染色、二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB）显色、二甲苯透明和封片等操作。操作步骤按照试剂盒说明书。1 1.3 3 结果判断结果判断由两位病理科医师采用双盲法独立完成阅片及评分，每张切片随机选择5个高倍镜视野（400）观察，根据染色强度和阳性细胞百分比评分。染色强度评分：无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，黄褐色为3分；阳性细胞百分比评分：5%为 0 分，5%25%为 1 分，26%50%为 2 分，51%75%为3分，75%为4分。两项评分的乘积3分为阳性（+）。1 1.4 4 统计学统计学分析分析采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数标准差（x-s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用2检验；相关性分析采用 Spearman 相关分析；以P0.05为差异有统计学意义。2 2结果结果2 2.1 1 ATFATF2 2和和caspasecaspase 9 9表达情况的比较表达情况的比较ATF2主要表达于细胞质和/或细胞核，caspase 9主要表达于细胞质。CRC 组织中 ATF2、caspase 9阳性表达率均低于CRA组织和癌旁组织，CRA组织中 caspase 9 阳性表达率低于癌旁组织，差异均有统计学意义（P0.05）。（表1）2 2.2 2 不同临床特征不同临床特征 CRCCRC 患者患者 CRCCRC 组织中组织中 ATF