槐糖脂对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响_刘朔.pdf

第4 4卷 第7期家畜生态学报V o l.4 4N o.72 0 2 3年7月A c t aE c o l o g i a eA n i m a l i sD o m a s t i c iJ u l.2 0 2 3槐糖脂对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响 收稿日期 2 0 2 1-1 0-0 9修改日期:2 0 2 2-0 4-1 9 基金项目 国家现代农业产业技术体系建设专项资金(C A R S-4 1)作者简介 刘 朔(1 9 9 7-),男,山东潍坊人,硕士研究生,研究方向为环境管理与生态安全。E-m a i l:l s j i a y o u y a 1 2 6.c o m*通讯作者 廖新俤(1 9 6 8-),男,福建连江人,博士,教授,主要从事畜牧生态与环境的教学与研究工作。E-m a i l:x d l i a o s c a u.e d u.c n刘 朔,莫纯豪,邢斯程,廖新俤*(华南农业大学 动物科学学院,广东 广州5 1 0 6 4 2)摘 要 该试验旨在探究饲料中添加槐糖脂对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清免疫学指标及盲肠微生物的影响。选取健康且体重和产蛋性能相近的罗曼粉蛋鸡6 0只,随机分成3个组,每组4个重复,每个重复5只鸡。采用单因子试验设计,设定日粮中槐糖脂的添加量分别为0(基础日粮组)、2g/k g(低槐糖脂组)及2 0g/k g(高槐糖脂组)。预饲1周,正式试验期5周。试验期间测定蛋鸡的生产性能和蛋品质。试验最后1天每组选取8只鸡(每个重复选取2只鸡),取翅根静脉血和盲肠内容物以测定血清免疫学指标、盲肠内容物菌群的丰度及盲肠p H等指标。结果显示:添加槐糖脂显著提高了蛋鸡的产蛋率(P0.0 1),低浓度槐糖脂添加对产蛋率的提高效果优于高浓度组,同时槐糖脂的添加也极显著地降低了料蛋比(P0.0 1);低浓度槐糖脂的添加显著提高了鸡蛋的浓蛋白高度和哈氏单位(P0.0 5);添加槐糖脂显著提高了血清中I g A和I g G的水平(P0.0 5),极显著提高了血清中I g M的水平(P0.0 1),低槐糖脂组的效果好于高槐糖脂组;添加槐糖脂显著降低了盲肠中沙门菌的丰度(P0.0 5),高浓度组的大肠杆菌丰度较对照组和低浓度组有显著的降低(P0.0 5),但高浓度槐糖脂的添加也显著降低了乳酸杆菌的丰度(P 0.0 5)。研究表明:饲料中添加槐糖脂可以有效提高蛋鸡产蛋率,降低料蛋比,提高鸡蛋的浓蛋白高度及哈氏单位,提高血清中I g A、I g G、I g M的水平,低浓度槐糖脂的添加对优化肠道菌群更加理想。关键词 槐糖脂;蛋鸡;生产性能;蛋品质;免疫指标 中图分类号 S 8 3 1.5 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 5-5 2 2 8(2 0 2 3)0 7-0 0 1 6-0 6d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 3-1 1 8 2.2 0 2 3.0 7.0 0 3 槐糖脂(s o p h o r o l i p i d)是由非致病性酵母菌发酵产生的一种生物表面活性剂1。它具有生物降解性、低毒性、良好的乳化能力以及对温度和酸碱度变化的耐受力2。目前,槐糖脂可广泛用作食品、化妆品、清洁和环境工业中的乳化剂3。据报道,除了具有表面活性外,槐糖脂还具有良好的生物活性,例如抗微生物和抗癌活性4,以及作为高价值药物应用在制药工业中5。动物试验表明,按照1k g体重口服5g槐糖脂的摄入量,槐糖脂没有毒性,且对皮肤无刺激性6。这些结果表明,槐糖脂在医疗保健产品中具有较高的利用价值。同时,槐糖脂作为抗炎剂或免疫调节剂时,不会影响宿主的正常菌群,不会促使耐药菌株生成7。集约化蛋鸡养殖系统需应对机体健康胁迫和疾病传播风险的挑战,加上中国饲料全面禁抗,必须寻求一种新的营养添加剂来解决集约化养殖所带来的问题8-9。对于槐糖脂应用于蛋鸡饲料还没有相关的报道,本试验旨在研究饲料中添加槐糖脂对蛋鸡生产性能、蛋品质以及免疫功能的影响,为槐糖脂应用于蛋鸡生产提供参考。1 材料与方法1.1 试验材料商品代罗曼粉蛋鸡购自广东省惠州市某蛋鸡场;本试验所用槐糖脂产品含有9 9%槐糖脂(C3 4H5 6O1 4),其余1%组分为水,由航远生物科技有限公司提供;D NA提取试剂盒F a s tD NAS p i nK i t f o rS o i l,MP,美国;鸡免疫球蛋白A(I g A酶联免疫分析试剂盒)、鸡免疫球蛋白G(I g G酶联免疫分析试剂盒)、鸡免疫球蛋白M(I g M酶联免疫分析试剂盒),上海酶联生物科技有限公司;D NA扩增引物均由上海生工生物有限公司合成。1.2 试验设计选取健康,体重、产蛋性能相近的6 0只3 1 4日龄的罗曼粉蛋鸡,随机分为3组,每组4个重复,每个重复5只鸡。对照组不添加槐糖脂,试验组分别在基础日粮的基础上添加2g/k g(低槐糖脂组)、2 0g/k g(高槐糖脂组)的槐糖脂,混合均匀后饲喂,预饲期为1周,正饲期为5周。1.3 试验日粮与饲养管理饲喂 试 验 参 考 NY/T3 3-2 0 0 4鸡 饲 养 标准1 0和罗曼蛋鸡饲养手册确定日粮营养水平,基础日粮成分及营养水平见表1。饲喂试验在广东省广州市增城区试验基地进行,3层阶梯式笼养,每笼5只鸡,试验期间自动控温、通风,舍温控制在2 32 6,全程自由采食,乳头式饮水器自由饮水,每天光照1 6h,早上7:0 0和下午1 6:0 0各喂料1次,并在早上8:0 0收集鸡蛋并记录。每天定时清理鸡舍内的粪便且对鸡舍进行消毒。表1 基础日粮成分及营养水平(风干基础)T a b l e1 B a s i cd i e t c o m p o s i t i o na n dn u t r i t i o n l e v e l(a i r-d r yb a s i s)原料I n g r e d i e n t/%含量C o n t e n t营养水平N u t r i e n t l e v e l含量C o n t e n t玉米C o r n2 6.0 0代谢能ME/(M J/k g)1 1.1 3豆粕S o y b e a nm e a l2 6.0 0粗蛋白质C P/%1 6.2 0石粉L i m e s t o n e8.0 0总磷T P/%0.4 5大豆油S o y b e a no i l1.0 0钙C a/%3.8 0磷酸氢钙C a H P O41.5 4有效磷A P/%0.3 2D L-蛋氨酸D L-M e t0.1 6蛋氨酸M e t/%0.3 8食盐N a C l0.3 0赖氨酸L y s/%0.8 0预混料P r e m i x1.0 0合计T o t a l1 0 0.0 0 注:预混料向每千克日粮提供:VA1 25 0 0I U,V D341 2 5I U,V E1 5I U,VK2m g,V B11m g,V B28.5m g,V B55 0m g,V B68m g,V B72m g,V B95m g,V B1 25m g;胆碱5 0 0m g,C u8m g,F e6 0m g,Z n4 0m g,M n6 5m g,I 1m g,S e0.3m g。营养成分均为计算值。N o t e:T h ep r e m i xp r o v i d e s t h e f o l l o w i n gp e rk go fd i e t s:VA1 25 0 0I U,V D341 2 5I U,V E1 5I U,VK2m g,V B11m g,V B28.5m g,V B55 0m g,V B68m g,V B72m g,V B95m g,V B1 25m g,C h o l i n e5 0 0m g,C u8m g,F e6 0m g,Z n4 0m g,M n6 5m g,I 1m g,S e0.3m g.N u t r i t i o n a l c o m p o n e n t sa r ec a l c u l a t e d.1.4 样品采集1.4.1 生产性能测定 以重复为单位,记录每日每重复蛋鸡产蛋数及蛋重,每周统计1次采食量,并计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量及料蛋比。产蛋率=总产蛋个数/总蛋鸡数1 0 0%平均蛋重=每组总蛋重/每组鸡蛋数平均日采食量=(每日喂料量每日剩余量)/试验组鸡数料蛋比=日耗料量/日产蛋总重1 0 0%1.4.2 蛋品质测定 每隔1周收集1次鸡蛋,每组随机选取1 2个新鲜鸡蛋(每个重复3个),在2 4h内测定蛋形指数、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄颜色、浓蛋白高度及哈氏单位。采用陈靖源等1 1的测定方法对蛋形指数和蛋壳厚度进行测定。蛋壳强度用蛋壳强度测定仪(E S G-1,以色列O r k a公司)测定,单位为k g/c m2。用罗氏比色扇(2 0 0 4型,日本R o b o t-m a t i o n公司)对蛋黄颜色进行检测,用多功能蛋品分析仪(3 8 1型,美国O r g a n o m a t i o n公司)测定哈氏单位及浓蛋白高度。1.4.3 血清免疫指标测定 试验结束后,对照组及2个试验组每组选取8只鸡(每个重复选取2只鸡),翅下静脉采血5m L/只,静置分层,待血清大量析出后,吸取血清于离心管中,30 0 0r/m i n离心1 0m i n,上清液分装到多个0.5m L离心管中,-2 0 保存 待 用。采 用 上 海 酶 联 生 物 科 技 有 限 公 司 的E L I S A试剂盒测定血清中I g A、I g G、I g M等指标。1.4.4 盲肠内容物菌群及p H的测定 试验结束后,对照组及2个试验组每组选取8只鸡(每个重复选取2只鸡),屠宰采血后分离盲肠,并将盲肠内容物挤入冻存管中液氮冷冻后于-8 0 冰箱保存备用。采用MP公司F a s tD NAS p i nK i t f o rS o i l试剂盒提取盲肠内容物样品微生物总D NA,将含有大肠杆菌、沙门菌和乳酸杆菌目的片段的质粒作为标准质粒分别建立各菌群的标准曲线,采用实时荧光71第7期 刘 朔,等:槐糖脂对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响定量方法对所有样本拷贝数进行测定,通过标准曲线计算不同微生物的数量。各细菌引物参照谢童等1 2的研究,由生工生物工程(上海)有限公司合成,各引物序列见表2。用p H计(8 4 8型,中国西玛仪表公司)测定盲肠内容物的p H值。表2 P C R引物序列T a b l e2 P C Rp r i m e rs e q u e n c e项目I t e m引物序列P r i m e r s e q u e n c e产物长度/b pP r o d u c t l e n g t h大肠杆菌F:C A T G C C G C G T G T A T G A A G A AE s c h e r i c h i ac o l iR:C G G G T A A C G T C A A T G A G C A A A9 6沙门菌F:A G G C C T T C G G G T T G T A A A G TS a l m o n e l l aR:G T T A G C C G G T G C T T C T T C T G9 7乳酸杆菌F:G A G G C A G C A G T A G G G A A T C T T CL a c t o b a c i l l u sR:G G C C A G T T A C T A C C T C T A T C C T T C T T C1 2 61.5 统计与分析试验数据用E x c e l进行初步整理,再使用S P S S2 1.0统 计 分 析 软 件 进 行 单 因 素 方 差(o n e w a yANOVA)以及线性分析,以D u n c a n s方法进行多重比较。结果以“平均值标准误”(xsx)表示,P0.0 5表示差异显著,P0.0 1表示差异极显著。2 结果与