不同类型自身免疫性肝病流行...样性水平及相关危险因素分析_刘琳.pdf

四川医学 年 月第 卷（第 期），四川大学华西护理学科发展专项基金项目（编号：）通信作者：论著不同类型自身免疫性肝病流行病学、肝脏菌群多样性水平及相关危险因素分析刘 琳，李罗红（四川大学华西护理学院 四川大学华西医院消化内科，四川 成都）【摘要】目的 探讨不同类型自身免疫性肝病（）流行病学、肝脏菌群多样性水平及相关危险因素。方法选取 年 月至 年 月在我院治疗的 患者 例作为观察组，其中原发性胆汁性胆管炎（）患者 例，自身免疫性肝炎（）患者 例，同时选取同期在我院治疗的肝囊肿患者 例作为对照组，检测肝组织菌群丰度及多样性，同时分析 和 患者临床资料差异，采用 回归方程分析 发生的影响因素。结果 观察组肝脏组织嗜热厌氧孢杆菌丰度、莱比托游动球菌丰度、乳酸杆菌丰度、多样性指数和 多样性指数分别为（）、（）、（）、（）和（），明显高于对照组（）。组嗜热厌氧孢杆菌丰度为（），明显高于 组（），莱比托游动球菌丰度为（），明显低于 组（）。患者丙氨酸氨基转移酶（）和胆碱酯酶（）分别为（）和（），明显高于 患者（），而碱性磷酸酶（）为（），明显低于 患者（）。观察组饮酒、肝周淋巴结肿大、肝外自身免疫病和自身免疫病家族史比例分别为 、和 ，明显高于对照组（）。回归分析显示：肝外自身免疫病和自身免疫病家族史是 发生的影响因素（）。结论患者肝脏菌群多样性有所增加，其中 和 患者肝脏菌群分布有一定差异，同时肝功能指标存在差异；发生的危险因素包括肝外自身免疫病和自身免疫病家族史。【关键词】自身免疫性肝病；原发性胆汁性胆管炎；自身免疫性肝炎；流行病学；肝脏菌群多样性；危险因素【中图分类号】【文献标志码】【文章编号】（），【】，（），（）（），（），（），（），（）（），（），（），（），（），（）（）（）（）（），（），（）（），四川医学 年 月第 卷（第 期），（），（）（），【】；自身免疫性肝病（，）是一组免疫介导的肝脏疾病，具有三种不同的形式，包括自身免疫性肝炎（，）、原发性胆汁性胆管炎（，）和原发性硬化性胆管炎（，）。是一种罕见的慢性进展性疾病，根据地理位置的不同，患病率约为（），。其主要发生于中年女性，但可累及所有年龄组的男女。确切的病因尚不清楚，但肝抗原耐受性丧失被认为是遗传易感个体中未知触发因素导致的主要病理生理机制。的全球患病率为每百万人 例，亚太地区的患病率为每百万人 例，其中，中国和日本的患病率最高。该疾病的发作被认为是由于环境触发因素和遗传易感性的相互作用。是由肝内和肝外胆管纤维狭窄引起的进行性慢性胆汁淤积，通常对类固醇无反应。它通常影响 岁的男性患者，并且容易与炎症性肠病（）共存。的患病率约为（），。虽然 在世界各地广泛分布，但主要在欧洲和北美国家，亚洲国家的患病率较低。肝脏以营养物质、抗原、激素和其他分子的形式从肠道接收丰富的信号，门静脉循环促进了这种联系，因此被定义为“肠肝轴”循环。研究发现，自身免疫性肝病与共生微生物组结构的改变以及微生物信号（主要通过肠肝轴）激活的异常免疫系统存在密切联系。因此，微生物组成是加深对 致病学的理解、发现生物标志物和激发创新治疗的新前沿。根据本院 患者的情况，旨在研究 和 患者的流行病学、肝脏菌群多样性水平及相关危险因素，以期为临床诊疗提供参考依据。资料与方法 一般资料：选取 年 月至 年 月在我院治疗的 患者 例为观察组，其中 患者 例，患者 例。纳入标准：诊断符合自身免疫性肝炎诊断和治疗共识中的标准；初治患者；患者及家属知情同意。排除标准：合并有心、肺、肾等其他重要脏器疾病、恶性肿瘤、感染性疾病、血液系统疾病等；入院前 个月内有抗菌药物使用史；有代谢性肝病、综合征等其他肝部疾病。选取同期在我院治疗的肝囊肿患者 例为对照组，两组患者一般资料见表，具有可比性。本次研究获得医院伦理会批准。表 观察组和对照组临床一般资料比较组别性别（）男女年龄（岁）体质指数（）观察组（）（）对照组（）（）检查方法：患者入院后第 天清晨取空腹血，离心 （中国通用实验科技有限公司，），取上清液，置于 冰箱保存。采用全自动生化分析仪（北京华兴瑞达生物科技发展有限公司，）检测丙氨酸氨基转移酶（）、天冬氨酸氨基转氨酶（）、总胆红素（）、直接胆红素（）、乳酸脱氢酶（）、血清白蛋白（）、胆碱酯酶（）和碱性磷酸酶（）水平。所有患者均进行肝脏组织穿刺活检，穿刺过程中严格按照无菌操作要求进行，避免外源性细菌污染。收集各组肝脏活检四川医学 年 月第 卷（第 期），组织 ，采用 提取试剂盒（青岛捷世康生物科技有限公司）提取肝脏组织中的，对细菌 基因的目标片段进行 扩增（引物序列：，上游：，下 游：），采用凝胶回收试剂盒回收 产物，应用蓝色荧光定量系统（美国 公司，）对 扩增回收产物定量，应用 平台（武汉华大基因公司）进行高通量测序，应用 软件（北京奥维森基因科技有限公司）统计样品序列数目，应用 序列分析软件（北京环中睿驰科技有限公司）将序列聚类为，结合物种组成信息结果，分析各组患者肝脏菌群多样性及丰度，参数为 多样性指数、多样性指数及琼氏不动杆菌、橙色短波单胞菌、土壤短芽孢杆菌、嗜热厌氧芽孢杆菌、莱比托游动球菌丰度。资料收集：本研究收集了 例 患者首诊时的饮酒史肝外自身免疫疾病史（，）和自身免疫性疾病家族史（，）。其 中 部 分 患 者 的 和 两个指标是通 过 电 话 回 访 收 集 的。主要包括既往已确诊的任意一种自身免疫病，如自身免疫性甲状腺疾病，类风湿性关节炎、干燥综合征等；是指患者的一级亲属中至少有一人患某种自身免疫性疾病。是否有肝周淋巴结肿大则由 超检查报告为准。所有的信息均在统一标准化的情况下收集，并保存在匿名数据库中。统计学方法：数据分析采用 软件，计量资料包括：年龄、体质指数等，数据采用（）表示，检验分析组间指标差异；计数资料包括性别、临床症状等，数据采用（）表示，检验分析组间指标差异；多因素分析采用 回归分析。组间指标差异比较以 为差异有统计学意义。结 果 两组肝脏组织菌群丰度、多样性比较：观察组和对照组肝脏组织琼氏不动杆菌丰度、橙色短波单胞菌丰度和土壤短芽孢杆菌丰度比较，差异无统计学意义（）；观察组肝脏组织嗜热厌氧孢杆菌丰度、莱比托游动球菌丰度、乳酸杆菌丰度、多样性指数和 多样性指数明显高于对照组，差异有统计学意义（）。见表。表 观察组和对照组肝脏组织菌群丰度、多样性比较指标观察组（）对照组（）琼氏不动杆菌丰度（）橙色短波单胞菌丰度（）土壤短芽孢杆菌丰度（）嗜热厌氧孢杆菌丰度（）莱比托游动球菌丰度（）乳酸杆菌丰度（）多样性指数 多样性指数 观察组 和 患者肝脏组织菌群丰度、多样性比较：组嗜热厌氧孢杆菌丰度明显高于 组（），莱比托游动球菌丰度明显低于 组（）；组和 组琼氏不动杆菌丰度、橙色短波单胞菌丰度、土壤短芽孢杆菌丰度、乳酸杆菌丰度、多样性指数和 多样性指数比较，差异无统计学意义（）。见表。表 观察组 和 患者肝脏组织菌群丰度、多样性比较指标 组（）组（）琼氏不动杆菌丰度（）橙色短波单胞菌丰度（）土壤短芽孢杆菌丰度（）四川医学 年 月第 卷（第 期），指标 组（）组（）嗜热厌氧孢杆菌丰度（）莱比托游动球菌丰度（）乳酸杆菌丰度（）多样性指数 多样性指数 观察组 和 患者临床资料比较：和 患者性别、年龄、体质指数、临床症状、比较，差异无统计学意义（）；患者 和 明显高于 患者差异有统计学意义（），而 明显低于 患者差异有统计学意义（）。见表。表 观察组 和 患者临床资料比较临床资料 组（）组（）性别（）男（）（）女（）（）年龄（岁）体质指数（）临床症状（）黄疸（）（）腹胀（）（）纳差（）（）乏力（）（）发热（）（）脾肿大（）（）实验室指标（）（）（）（）（）（）（）（）观察组和对照组临床资料单因素分析：观察组饮酒、肝周淋巴结肿大、肝外自身免疫病和自身免疫病家族史比例明显高于对照组，差异有统计学意义（）；观察组和对照组吸烟、高血压、糖尿病比例比较，差异无统计学意义（）。见表。表 观察组和对照组临床资料单因素分析（）临床资料观察组（）对照组（）吸烟（）（）饮酒（）（）高血压（）（）糖尿病（）（）肝周淋巴结肿大（）（）肝外自身免疫病（）（）自身免疫病家族史（）（）四川医学 年 月第 卷（第 期），影响 发生的多因素分析：将饮酒、肝周淋巴结肿大、和 作为自变量，是否发生 作为因变量进行 回归分析，结果显示：和 是 发生的影响因素（）。见表。表 影响 发生的多因素分析结果因素（）饮酒 （）肝周淋巴结肿大 （）（）（）讨 论人类肠道微生物群是指居住在宿主肠道中的微生物集合，长期以来一直被认为与健康维持和疾病发展密切相关，调节生理过程的几乎每个方面，包括免疫、新陈代谢、内分泌和神经活动。一方面，肠道免疫系统作为抵御病原微生物的第一道防线，可以维持对无害和共生菌群的耐受性，并影响肠道微生物群的组成和功能。另一方面，肠道定植微生物促进成熟宿主免疫环境的建立，导致某些条件下的免疫反应偏斜。通过门静脉，肝脏是第一个遇到肠道衍生产物（如微生物成分、代谢物、毒素和膳食营养素）的器官，这使其容易受到肠道微生物变化的影响。在解剖学和生理学上，肝脏通过胆汁的肝肠循环与肠道沟通，胆汁主要由胆汁酸和免疫球蛋白组成，可与肠道微生物群落相互作用，导致肝脏的免疫平衡被打破，进而来自肠道的微生物会导致剧烈的免疫反应，造成肝脏的免疫损伤。这种复杂且高度调节的肠肝轴的紊乱有助于多种肝脏疾病的发病机制，包括非酒精性脂肪性肝病、肝细胞癌、慢性病毒性肝炎和。本研究发现，观察组肝脏组织嗜热厌氧孢杆菌丰度、莱比托游动球菌丰度、乳酸杆菌丰度、多样性指数和 多样性指数均明显高于对照组。其中，组嗜热厌氧孢杆菌丰度明显高于 组，莱比托游动球菌丰度明显低于 组。表明 患者肝脏组织中可能存在与疾病相关的特异性细菌，嗜热厌氧芽孢杆菌可能是 患者的肝脏特异性细菌，莱比托游动球菌可能是 患者的肝脏特异性细菌，提示肝脏特异性细菌可能参与了不同类型 发病过程。微生物组组成的变化可能导致肠道通透性增加，从而促进细菌向门静脉循环的转变，使得肝脏菌群发生变化，过度暴露于肠道微生物，引起或促进肝脏炎症。同时，微生物组相关代谢物或微生物成分水平的改变会严重影响宿主免疫系统，从而建立促炎免疫环境，进一步加速了肝脏炎症的发生。此外，还有研究显示，特异性细菌与临床肝功能指标存在相关性。本研究发现，患者 和 均明显高于 患者（），而 明显低于 患者（）。表明不同类型 之间的肝功能指标存在差异，提示嗜热厌氧孢杆菌相对丰度可能与 呈正相关，与 和 呈负相关。莱比托游动球菌相对丰度可能与 呈负相关，与 和 呈正相关。但仍需要进一步研究验证。由于肝脏微生物变化导致的免疫平衡打破，剧烈的免疫反应造成肝脏的免疫损伤。研究发现，许多 患者在诊断前已经具有一些特征，如饮酒、肝周淋巴结肿大以及具有 等。此外，许多研究还发现约 的 患者在诊断前已患有其他自身免疫性疾病，且肝外自身免疫性疾病增加了其死亡率。另有 患者的一级亲属患有不同的自身免疫病。本研究发现，观察组患者中饮酒、肝周淋巴结肿大、和 比例 明 显 高 于 对 照 组，其 中 饮 酒 患 者 比 例 最 高（）。进一步研究发现，和 是 发生的影响因素。提示有 和 的患者更容易发生。和 患者的自身免疫系统更为敏感，在受到相关因素的刺激后，更容易且更快速的引起免疫炎症反应，促使免疫性肝损害发展更为迅速。综上所述，患者肝脏菌群多样性有所增加，四川医学 年 月第 卷（第 期），其中 和 患者肝脏菌群分布有一定差异，同时肝功能指标存在差异；发生的危险因素包括 和。参考文献：，：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，：，：，（）：，（）：，（）：中华医学会肝病学分会 自身免疫性肝炎诊断和治疗指南（）中华肝脏病杂志，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：周思敏，刘曼，周璐，等自身免疫性肝病患者肝组织中菌群丰度和多样性的初步研究中华消化杂志，（）：王一基于健康体检自身免疫性肝病高危人群早期筛查方案的建立和验证及家族遗传易感性研究天津