布鲁氏菌活疫苗（S2）口服...种不同感染羊群免疫效果观察_徐娇.pdf

2023 03XUMUSHOUYI畜牧兽医布鲁氏菌活疫苗（S2）口服接种不同感染羊群免疫效果观察*徐娇1，崔蕾2，张旭2，魏龙丽3，付竹艳3，连晓春2，马长宾3*（1.第一师畜牧兽医工作站，新疆阿拉尔843300；新疆兵团畜牧兽医工作总站；3.第六师五家渠市畜牧兽医工作站）摘要：为探讨不同程度布鲁氏菌病感染羊群口服布鲁氏菌活疫苗（S2）的血清抗体消长规律，试验设置8个采样点，每个采样点包含布鲁氏菌病阴性羊群、布鲁氏菌病低感染羊群（感染率低于2.4%）、布鲁氏菌病高感染羊群（感染率大于2.4%）各 20 只，每只羊口服布鲁氏菌活疫苗（S2）1 108CFU，分别于免疫后 0 d、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、180 d随机采集血清共计1 920份，使用虎红平板凝集试验初筛，竞争酶联免疫吸附试验（C-ELISA）检测抗体消长。结果显示，布鲁氏菌病阴性羊群、布鲁氏菌病低感染羊群、布鲁氏菌病高感染羊群在免疫后第 15 天抗体阳转率分别为49.37%、30.00%和32.50%；免疫后第120天抗体阳转率分别为6.67%、8.33%和8.33%；免疫后第180天抗体阳转率分别为0%、11.11%和15.56%。试验结果表明，布鲁氏菌活疫苗（S2）免疫15 d后抗体阳转率最高，180 d后血清抗体即已下降到不干扰检测的水平。关键词：布鲁氏菌病感染羊群；口服免疫；布鲁氏菌活疫苗（S2）；抗体消长布鲁氏菌病（brucellosis）简称布病，是由布鲁氏菌引起的一种慢性人兽共患传染病，给畜牧业发展造成严重危害，被世界卫生组织（WHO）和世界动物卫生组织（OIE）列为被忽视的人兽共患病1-2，呈世界性流行，已有170多个国家报告有人畜布病的流行3，每年约新增50万人布病病例4-5。布鲁氏菌活疫苗（S2）是弱毒活菌苗，毒力较低，具有免疫效果好和使用方便的特点。牛、山羊和绵羊等动物均可免疫使用，免疫途径为皮下注射、肌内注射、气雾和口服。因注射免疫可能导致怀孕畜流产6，同时口服免疫副作用小，所以对区域性的布病免疫建议采用口服免疫7。为探究不同程度布鲁氏菌病感染羊群口服布鲁氏菌活疫苗（S2）后血清抗体消长规律，开展了此次免疫试验，并使用虎红平板凝集试验和竞争ELISA试验方法进行跟踪监测，现报告如下。1材料与方法1.1材料布鲁氏菌病活疫苗（S2），由新疆天康畜牧生物技术股份有限责任公司生产（批号：2016008）；布鲁氏菌病虎红抗原，由青岛易邦生物工程有限公司生产（批号：20160604）；布鲁氏菌C-ELISA抗体检测试剂盒，由中国农业科学院兰州兽医研究所生产（批号：20160714130）。1.2方法1.2.1免疫分组免疫试验分为3个组：布鲁氏菌病感染阴性群、布鲁氏菌病感染低感染群（0.1%感染率 2.4%）、布鲁氏菌病感染高感染群（感染率 2.4%）。每个团场均包含3个免疫羊群，8个团场选择24个羊群；每群20只绵羊，每个团场60只绵羊，共计480只绵羊。1.2.2免疫方法采用全封闭投服器，按每只羊1 108CFU剂量口服免疫，免疫前后均对羊群、实施场地及环境进行消毒。1.2.3样品采集分别于免疫后0 d（即免疫当天）、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、180 d，用一次性普通真空采血器采集所有免疫实验绵羊全血，分离血清，于-20 冷冻备用。1.2.4抗体检测方法虎红平板凝集试验检测方法，按照GB/T 18646-2018进行；C-ELISA检测方法，按照试剂盒说明书进行。先用虎红平板试验筛选阳性血清，然后用C-ELISA检测方法对初筛阳性血清进行复检。2结果收稿日期：20230115*基金项目：新疆生产建设兵团财政科技计划项目“规模化奶 牛 场 重 大 疫 病 防 控 与 净 化 关 键 技 术 集 成 与 示 范”（2020AB015）。*通讯作者：马长宾（1982-），男，硕士，兽医师，主要从事动物疫病监测与防治方面的研究。E-mail：。412023 03畜牧兽医XUMUSHOUYI2.1口服布鲁氏菌活疫苗（S2）抗体阳转率参试羊群口服布鲁氏菌活疫苗（S2）后于0 d（免疫当天）、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、180d各采集240份样品，共计1 920份血清样本，采用虎红平板凝集试验方法进行检测，在免疫后0 d、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、180 d抗体阳转率分别为3.33%、40.42%、21.25%、11.25%、8.33%、7.92%、7.50%、5.83%，抗体阳转率逐渐下降，详细数据见表1。2.2口服布鲁氏菌活疫苗（S2）后抗体阳转率复检结果免疫后15 d，阴性群、低感染群、高感染群免疫后抗体阳转率分别为49.37%、30.00%、32.50%，免疫后120 d抗体转阳率分别为6.67%、8.33%、8.33%；免疫后180 d抗体阳转率分别为0%、11.11%、15.56%。每个试验群体均在免疫后15 d抗体平均阳转率达到最高值，以后逐渐下降。阴性群免疫抗体阳转率在免疫后30 d从49.37%降至17.53%，低感染群在免疫后45 d抗体阳转率从30.00%降至7.97%，高感染群在免疫后45 d抗体阳转率从32.50%降至7.86%，详细数据见表2。3讨论布鲁氏菌活疫苗（S2）是由我国自行研发的弱毒疫苗，在我国广泛使用，有皮下注射与口服免疫两种常用的免疫方法，具有较好的免疫保护效果。由于10月份怀孕羊较多，不适宜选用注射免疫，而口服免疫安全性相对较高，所以本次试验采用口服接种。C-ELISA检测布鲁氏菌活疫苗（S2）免疫抗体阳转率结果表明，免疫后第15天抗体阳转率达到最高值，与田素梅8研究结果一致，但低于已报道的相关研究9-10中注射免疫所产生的抗体水平，免疫抗体高峰值仅为49.37%。综上所述，试验羊群感染程度、免疫途径和检测方法对免疫抗体阳性率都有影响，各地应根据实际生产情况，制定合适的免疫覆盖率评估方案。目前，一般认为布鲁氏菌活疫苗（S2）免疫180 d后血清抗体即已下降到不干扰检测的水平，可以进行畜群的布鲁氏菌病检疫及淘汰病畜工作，并在第二年再进行新生羊的免疫。从本试验的结果来看，阴性群在免疫后180 d全部转阴，这与毛开荣11观点一致，而低感染群和高感染群都呈现一个小幅回升趋势，比免疫前布病阳性率高，说明检测出来的阳性中存在着一定数量的疫苗抗体，有可能会提高每年布鲁氏菌病的阳性率。本研究将对感染羊群继续进行跟踪监测，以探明感染羊群阳性率发展趋势，同时生产实践中迫切需要鉴别型诊断方法的出现。参考文献1FRANC K A，KRECEK R C，HSLER B N，et al.Brucellosis remains a neglected disease in the developing world：a callfor interdisciplinary actionJ.BMC public health，2018，18（1）：125.2BEHERA S K，DAS D，BALASUBRAMANI K，et al.Seroprevalence and risk factors of brucellosis in livestock in the wildlifeand livestock interface area of Similipal Biosphere Reserve，IndiaJ.Veterinary world，2020（13）：465-470.3任清明，汪春晖，杨义军，等.布鲁氏菌病的流行特点与防治对策J.中华卫生杀虫药械，2020，26（2）：97-102.4HULL N C，SCHUMAKER B A.Comparisons of brucellosisbetween human and veterinary medicineJ.Infection ecology&表1口服布鲁氏菌活疫苗（S2）后抗体阳转率采样时间阴性数（只）阳性数（只）阳转率（%）0 d23283.3315 d1439740.4230 d1895121.2545 d2132711.2560 d220208.3390 d221197.92120 d222187.50180 d226145.83表2口服布鲁氏菌活疫苗（S2）后抗体阳转率复检结果%监测时间阴性群低感染群高感染群0 d0.001.804.3015 d49.3730.0032.5030 d17.5324.2925.5545 d15.007.977.8660 d10.776.436.4390 d4.008.6312.86120 d6.678.338.33180 d0.0011.1115.56422023 03XUMUSHOUYI畜牧兽医epidemiology，2018，8（1）：1500846.5PAPPAS G，PAPADIMITRIOU P，AKRITIDIS N，et al.Thenew global map of human brucellosisJ.Lancet infectious diseases，2006，6（2）：91-99.6李长友.动物布鲁氏菌病防治指导手册M.北京：中国农业出版社，2012：122.7樊生平，齐守军，李连平,等.布鲁氏菌病疫苗S2株免疫成年绵羊的抗体消长规律试验J.中国动物检疫，2017，34（2）：88-90.8张岩，史秀丽，张磊.布氏杆菌活疫苗（S2）不同接种方法免疫效果观察J.畜牧与兽医，2013，45（9）：1259白丽艳，刘宁，红梅，等.布氏杆菌S2疫苗免疫绵羊血清抗体消长规律研究J.畜牧与兽医，2017，49（3）：104-10710田素梅，周红菊，温都苏，等.绵羊抗布鲁氏菌特异性IgG，Ig A和Ig M抗体的观察 J.中国人兽共患病杂志，1993，9（3）：53.11毛开荣.动物布氏菌病的诊断J.兽医导刊，2011（9）：50-52.摘要：本文通过分析新疆兵团陆生野生动物疫源疫病监测工作开展情况、存在的问题，提出提高监测水平的工作建议，以利于推进兵团陆生野生动物疫源疫病监测防控信息化进程，加强陆生野生动物疫源疫病监测防控工作，全面提升突发疫情监测防控水平及应急响应快速反应能力。关键词：陆生野生动物；疫源；疫病；监测；工作思考野生动物是自然生态系统重要的组成部分，更是自然系统中病原体的天然存在客体，是很多人兽共患病的病原宿主。对于生态系统的平衡来说，野生动物的存在有十分重要的作用。加强野生动物保护的同时，也要做好野生动物疫源疫病监测防控工作，从保护野生动物本身及避免野生动物将疾病传染给人类，从而真正实现人与自然和谐共生目标1。陆生野生动物疫源疫病监测体系的建立就是在根本上杜绝野生动物疫源疫病的发生。通过对野生动物长期的定点监测，及时发现异常情况，按照预警程序果断采取防治措施，阻断疫源疫病向人类及其他动物传播扩散的途径，将疫源疫病控制在最小范围并彻底消灭。为了加强陆生野生动物疫源疫病监测防控管理，防范陆生野生动物疫病传播和扩散，维护公共卫生安全和生态安全，保护野生动物资源，国家出台了 中华人民共和国野生动物保护法 重大动物疫情应急条例 陆生野生动物疫源疫病监测防控管理办法 等法律法规。陆生野生动物疫源疫病监测体系的建立和完善是我国疫源疫病监测工作的前提和保障，是预防高致病性禽流感等野生动物疫源疫病重大疫情发生的重要手段。是有效维护我国生态安全和公共卫生安全的必要措施，对保障国民安居乐业、经济稳定发展具有重要的历史意义。新疆生产建设兵团在国家、自治区相关工作安排和业务指导下，高度重视陆生野生动物疫源疫病监测防控工作，成立机构、组织人员、拨付经费及开展培训等，随之开展了相关工作的部署和落实。1兵团陆生野生动物疫源疫病监测防控工作现状1.1兵团监测站情况兵团地处我国最西北，是新疆的重要组成部分，也是国家重大战略丝绸之路经济带和生态文明廊道的重要组成部分。兵团下设14个师（市）、149个农牧