西北植物学报,2023,43(2):0190-0201ActaBot.Boreal.-Occident.Sin.doi:10.7606/j.issn.1000-4025.2023.02.0190http://xbzwxb.alljournal.net收稿日期:2022-09-01;修改稿收到日期:2022-12-18基金项目:国家自然科学基金(31672191);中央高校基本科研业务费专项(YX2015-16)作者简介:赵一燃(1999-),女,在读硕士研究生,主要研究方向为花卉种质资源创新与育种。E-mail:1449961283@qq.com*通信作者:何恒斌,副教授,主要从事花卉种质资源创新与育种研究。E-mail:hengbinhe_1220@bjfu.cn东方百合LoABI1基因的克隆及表达分析赵一燃,胡钧舒,朱云涛,孙婷婷,何恒斌*(花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室,国家花卉工程技术研究中心,城乡生态环境北京实验室,教育部林木花卉育种实验室,北京林业大学园林学院,北京100083)摘要:该研究以东方百合‘索邦’为材料,采用RT-PCR扩增方法克隆ABI1基因,对其进行了生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR检测其组织表达特性和低温处理过程及定植后的表达特征,以明确ABI1基因的功能特性,为解析百合ABA信号转导途径及其调控低温解除休眠过程的机理奠定基础。结果表明:(1)成功克隆得到东方百合LoABI1基因,其编码序列长度为1341bp,共编码446个氨基酸;LoABI1氨基酸序列中含有1个蛋白磷酸酶2C(PP2C)保守结构域。(2)系统进化分析显示,LoABI1蛋白与水稻PP2C家族成员OsPP2C06的同源进化关系最近,且与拟南芥AtABI1聚为一支,同属于PP2C基因家族中的A亚群。(3)亚细胞定位发现,LoABI1蛋白定位于烟草表皮细胞的细胞核和细胞质。(4)qRT-PCR荧光定量分析显示,LoABI1基因在百合茎生根、嫩茎、叶片及各花部组织中均有表达,且在幼嫩组织中表达量较高;LoAB1I基因在冷藏期间的表达量呈先升高后降低的趋势,并于冷藏期第5周达到峰值,但在定植期间持续下降且保持较低水平。(5)经4℃低温处理60d的百合鳞茎在定植后14~28d能发芽、28~48d可见花蕾,而不进行低温处理的鳞茎既不萌芽也不开花。研究推测,百合LoA-BI1基因可能在低温解除种球休眠过程中具有重要作用,LoABI1蛋白可能在百合ABA信号转导过程中发挥作用。关键词:东方百合‘索邦’;ABI1基因;克隆;基因表达中图分类号:Q785;Q786文献标志码:ACloningandExpressionAnalysisofLoABI1inLiliumOrientalHybridZHAOYiran,HUJunshu,ZHUYuntao,SUNTingting,HEHengbin*(BeijingKeyLaboratoryofOrnamentalPlantsGermplasmInnovationandMolecularBreeding,NationalEngineeringResearchCenterforFloricultureandBei...
