第44卷第7期家畜生态学报Vol.44No.72023年7月ActaEcologiaeAnimalisDomasticiJul.2023肝片吸虫CatB9蛋白的分子特征、遗传进化及表达定位研究[收稿日期]2021-07-07修改日期:2021-10-21[基金项目]国家重点研发计划项目(2017YFD0501200);兵团国际科技合作项目(2016AH006);新疆自治区研究生科研创新计划(XJ2020G085)[作者简介]张凯(1990-),男,河南驻马店人,博士研究生,主要从事动物寄生虫学研究。E-mail:290287473@qq.com*[通讯作者]孟庆玲(1969-),女,江苏徐州人,博士,教授,主要从事动物寄生虫学研究。E-mail:xjmqlqj@163.com张凯1,王熙凤1,孟庆玲1*,乔军1,张国武1,宁程程1,李娜1,才学鹏2(1.石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003;2.中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046)[摘要]为了解肝片吸虫(Fasciolahepatica,Fh)组织蛋白酶B9(CatB9)的生物学功能,该研究对FhCatB9基因进行克隆、表达,并对其免疫原性和在Fh体内的定位进行分析。结果显示:FhCatB9基因长度为1038bp,编码345个氨基酸;编码的蛋白无跨膜区,有信号肽于第19~20氨基酸间。生物信息学分析显示,FhCatB9蛋白含2个N-糖基化位点、7个磷酸化位点、15个线性B细胞抗原表位和CatB的保守结构域,高级结构显示与大鼠CatB酶原相似。系统进化结果显示,Fh和大片吸虫亲缘关系最近,与其他寄生虫亲缘关系较远。SDS-PAGE和Westernblot都在55.3ku处检出目的条带。免疫组化显示,CatB9在Fh的肠道上皮细胞和排泄管上皮细胞均有表达,重组蛋白的获得为Fh血清学检测试剂的研发提供了一个有潜在价值的候选抗原。[关键词]肝片吸虫;组织蛋白酶B9(CatB9);原核表达;免疫原性[中图分类号]S852.73+5[文献标识码]A[文章编号]1005-5228(2023)07-0072-07doi:10.3969/j.issn.1673-1182.2023.07.011肝片吸虫(Fasciolahepatica,Fh)是一种人畜共患寄生虫,是人和动物肝片吸虫病的病原体,除人类感染外,还感染牛、羊等草食动物肝脏和肝胆,给畜牧业造成重大的经济损失[1-2]。Fh遍布于世界各地,尤其是拉丁美洲、欧洲和非洲[3],而在中国Fh集中分布于黑龙江、吉林、辽宁、青海、甘肃、新疆及西藏等畜牧业比较发达的放牧区域,而在这些地区牛、羊的感染率最高为80%,严重妨碍这些地区畜牧业的发展[4-9]。所以,开展Fh感染、致病机制及疫苗研究对于有效防控Fh的流行具有重要意义。组织蛋白酶(Cathepsin,Cat)为半胱氨酸蛋白酶家族的重要成员,在Fh中大量表达,主要包括组织蛋白酶L(CatL)和组织蛋白酶B(CatB)[10]。CatB为Fh合成的主要蛋白酶...
