芪精颗粒主药定量近红外快检...及其治疗白细胞减少症的作用_孟旭鹏.pdf

基金项目:山西省中医药研究院院级课题(202212)作者简介:孟旭鹏，男，1983 10 生，硕士，副主任药师，E-mail:277583917 qq com收稿日期:2023 01 08芪精颗粒主药定量近红外快检模型的建立及其治疗白细胞减少症的作用孟旭鹏1，席啸虎2，王爽2(1中铁十七局集团有限公司中心医院药剂科，太原030032;2山西省中医药研究院药剂科)摘要:目的基于近红外光谱技术(NIS)快速检测芪精颗粒中主要药味黄芪和黄精的含量，并比较不同主药含量芪精颗粒治疗白细胞减少症的作用。方法制备不同黄芪和黄精用量的芪精颗粒样本，采用近红外光谱技术结合偏最小二乘法(PLS)建立芪精颗粒中黄芪和黄精用量的近红外快检模型。模型检测采用标准正交变量变换(SNV)预处理，检测波长范围在4 000 10 000 cm1。SD 大鼠根据白细胞数随机分为:空白对照组、模型组(皮下注射 CTX 100 mg/kg)、地榆升白片阳性药对照组、15 个不同黄芪和黄精用量给药组，连续给药 14 d。在给药后第 5，9，11，14 天测定血液常规指标、脾腺指数和胸腺指数。结果建立的模型校正均方差(MSEC)、预测均方差(MSEP)、交叉验证均方差(MSECV)、2值依次为 0 096 4，0 084 6，0 867 4，0 926 2。给药第 14 天，与模型组比较，黄芪和黄精用量各 6 15 g 的给药组血常规指标发生变化，其中黄芪和黄精用量各 10 15 g 给药组与正常组相比无显著性差异。与模型组比较，各给药组小鼠脾脏和胸腺指数显著性增加(P 0 05)，其中黄芪和黄精用量各 10 15 g 给药组与阳性药组无显著性差异。各指标的总评 OD 值随黄芪和黄精在处方中的百分含量增高而增高，在百分含量 19%处有一个高处的拐点，在百分含量 24%处达到最高。结论利用 NIS 技术结合多种化学计量学建立的定性定量模型对制剂中黄芪和黄精含量的预测准确度较高。通过近红外模型预测值能间接比较不同主药含量芪精颗粒改善白细胞减少症的作用。关键词:芪精颗粒;黄芪;黄精;近红外光谱技术;白细胞减少症中图分类号:965文献标志码:A文章编号:1007 6611(2023)04 0529 06DOI:1013753/j issn1007 6611202304017Establishment of quantitative near-infrared fast detection model of Qijing granules and its therapeutic effect on leukopeniaMENG Xupeng1，XI Xiaohu2，WANG Shuang2(1Department of Pharmacy，Central Hospital of China ailway 17th Bureau Group Co，Ltd，Taiyuan 030032，China;2Department of Pharmacy，Shanxi Academy of Traditional Chinese Medicine)Abstract:ObjectiveTo rapidly detect the contents of astragalus and polygonatum in Qijing granules based on near-infrared spectros-copy(NIS)，and compare the effect of different main drug contents of Qijing granules on leukopeniaMethodsThe samples ofQijing granules with different dosage of astragalus and polygonatum were prepared，and the near-infrared rapid detection model wasestablished to detect the contents of astragalus and polygonatum in Qijing granules using near-infrared spectroscopy and partial leastsquares(PLS)Model detection was pretreated by standard orthogonal variable transformation(SNV)，and the detection wavelengthrange was set at 4 000 10 000 cm1 SD rats were randomly divided into 18 groups according to the number of white blood cells:blankcontrol group，model group(subcutaneous injection of 100 mg/kg CTX)，positive drug control group(Diyushengbai tablet)，15 differentdosage groups(Qijing granules with 1 15 g each for astragalus and polygonatum for 14 d)Blood routine indexes，spleen gland indexand thymus index were measured at days 5，9，11 and 14 after drug administrationesultsThe corrected mean square error(MSEC)，predicted mean square error(MSEP)，cross validation mean square error(MSECV)and 2values of the establishedmodel were 0096 4，0084 6，0867 4 and 0926 2，respectively At day 14，the blood routine indexes in administration groups 6 15(6 15 g each for astragalus and xanthogen)changed compared with model group，and there was no signifcant difference betweenadministration groups(10 15 g each for astragalus and xanthogen)and normal group The indexes of spleen and thymus of mice wereincreased in different degrees in each Qijing granule group compared with model group(P0 05)，but there was no signifcant differ-ence between administration groups 10 15(10 15 g each for astragalus and xanthogen)and positive drug group The overall evalua-tion OD value of each index increased with the increase of the percentage content of astragalus and polygonatum in the prescription，witha high inflection point at 19%of the percentage content and the highest at 24%of the percentage contentConclusionThe qualitativeand quantitative model established by NIS technology combined with various chemometrics has high accuracy in predicting thecontents of astragalus and polygonatum in the preparation The predicted value of near-infrared model can be used to indirectly comparethe efficacy of Qijing granules with different main drug contents to improve the leukopeniaKey words:Qijing granules;astragalus;polygonatum;near infrared spectroscopy;leukopenia925山西医科大学学报，2023 年 4 月，第 54 卷 第 4 期医院制剂是指医院根据本院临床需要经批准而配制、自用的固定处方制剂1 3。芪精颗粒作为院内制剂，具有稳定的临床疗效，主要功能为益气养阴、补血生髓4，用于防治肿瘤放化疗所致的白细胞、血小板减少症。处方包括黄芪、黄精、太子参、仙鹤草、鸡血藤、墨旱莲、补骨脂、淫羊藿、鹿角、当归、大枣、枸杞子、连翘、甘草等。其中黄芪、黄精等主要药味在处方中发挥重要作用，但这两味药经水提取后，指标成分转移率极低，基本无法在制剂中检出，在制剂的质量控制中受到限制。近红外光谱是一种间接分析技术，具有分析速度快、多成分分析和分析成本低等优点，可用于中药定性鉴别、有效成分定量分析方面的研究5 7。本项目通过制备不同黄芪和黄精用量的芪精颗粒，拟采用近红外光谱技术建立快速检测模型，对方中黄芪和黄精用量进行检测，同时，探索不同主药用量芪精颗粒的近红外快检模型测定值与其改善环磷酰胺致大鼠白细胞减少症8，9 活性的相关性，为建立采用近红外技术表征制剂活性的模型提供一种思路。1实验材料1 1实验动物SD 大鼠，清洁级，雄性，体质量(200 20)g。购于北京华阜康生物科技股份有限公司(合格证号11401300003640)。分笼饲养，自然光照，自由进水，室内温度 20 26，湿度 36%60%。高脂饲料购于北京华阜康生物科技股份有限公司。1 2实验药物与试剂黄芪、黄精、太子参、仙鹤草、鸡血藤、墨旱莲、补骨脂、淫羊藿、鹿角、当归、大枣、枸杞子、连翘、甘草等均购自安徽亳州中药材市场，经山西省食品药品检验所专家鉴定，所有药物均符合药典标准(2020 年版)。注射用环磷酰胺(批号 19061323，江苏盛迪医药有限公司)，地榆升白片(批号 190302，成都地奥集团天府药业股份有限公司)，其余试剂为分析纯或色谱纯。1 3实验仪器全自动生化分析仪(Eosbrave Fort);Antaris 型傅立叶变换近红外光谱仪，配有积分球漫反射采样系统和样品旋转台，附带 TQ Analyst 分析软件(美国 Thermo 公司);Agilent 1200 高效液相色谱仪(Agilent公司);XSE105DU 电子天平(德国 Sartorius公司);S100H 型超声提取仪(德国 Elma 公司)。2方法与结果2 1不同黄芪和黄精用量的芪精颗粒样本的制备按照我院制剂室实际生产工艺优化后进行实验室研究，取黄芪和黄精等量(依次各取 1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15 g，黄芪和黄精不足15 g的用辅料补足)、太子参 10 g、仙鹤草 10 g、鸡血藤 10 g、墨旱莲