·基础研究·氟暴露下ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞ＥＲＫ５信号转导通路的改变∗∗邱志伟１，高峰１，２，陈从山１，２，张远洋１，赵乐１，刘艳洁２∗∗（１．十堰市太和医院康复中心，湖北十堰４４２０００；２．贵州医科大学临床医学院病理学教研室，贵州贵阳５５０００４）［摘要］目的检测ＥＲＫ５信号通路中磷酸化的细胞外信号调节激酶５（Ｐ⁃ＥＲＫ５）及Ｐ⁃ＥＲＫ５在氟暴露下ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞中的表达，探讨ＥＲＫ５信号通路与氟暴露下ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ神经损伤机制的关系。方法用不同剂量氟化钠（ＮａＦ，０.０００、０.１００、０.２００、０.３００、０.４００、０.５００、１.０００、２.０００、３.０００、４.０００及５.０００ｍｍｏｌ／Ｌ）处理ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞２４ｈ及４８ｈ，采用ＣＣＫ８实验筛选出低和高剂量氟中毒浓度；再以正常组ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞为参照，用低、高剂量氟化钠剂量分别处理ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞２４ｈ和４８ｈ，采用实时荧光定量ＰＣＲ检测处理４８ｈ时各组细胞的ＥＲＫ５ｍＲＮＡ水平，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测Ｐ⁃ＥＲＫ５、ＥＲＫ５蛋白表达水平。结果染氟处理后，０.５００、１.０００ｍｍｏｌ／ＬＮａＦ处理ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞２４ｈ及４８ｈ细胞的存活率均低于正常对照组（Ｐ＜０.０５），可作为低剂量组和高剂量组的染氟剂量；染氟４８ｈ时，对照组、低剂量组和高剂量组ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞中ＥＲＫ５的ｍＲＮＡ表达水平分别为１.００±０.００、０.８５±０.０８、０.９４±０.２１，组间比较均无统计学意义。染氟２４ｈ时，Ｐ⁃ＥＲＫ５蛋白高氟组较低氟组和正常组表达升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５），而染氟４８ｈ时，染氟组Ｐ⁃ＥＲＫ５蛋白表达升高，各组间比较均有统计学意义（Ｐ＜０.０５），染氟２４ｈ和４８ｈ正常组、低氟组、高氟组Ｐ⁃ＥＲＫ５蛋白表达水平分别为（０.２０±０.０５、０.２８±０.０４、０.５０±０.１８）、（０.２８±０.０１、０.４６±０.０２、０.６１±０.０８）；染氟２４ｈ后，总ＥＲＫ５蛋白升高，高氟组较低氟组、正常组有意义（Ｆ＝１４.７３１，Ｐ＜０.０５），而染氟４８ｈ后，染氟组较正常组升高有统计学意义（Ｆ＝１７.８７７，Ｐ＜０.０５），染氟２４ｈ和４８ｈ总ＥＲＫ蛋白表达水平分别为（０.３４±０.０４、０.３６±０.０５、０.６７±０.１２），（０.５５±０.０２、０.７２±０.０３、０.７８±０.０８）。结论ＥＲＫ５信号通路中Ｐ⁃Ｅ...
