蜂胶中阿替匹林C的测定方法 高效液相色谱法 GHT 1114-2015.pdf

GH/T1114-20154原理试样经85%乙醇超声提取、离心、过滤、定容，用0,45m有机系滤膜过滤后得澄清液，用反相高效液相色谱仪经紫外检测器在310nm处检测阿潜匹林C,外标法定量，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。5试剂与材料除非另有规定，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级水的规定要求。5.1甲醇：色谱纯。5.2无水乙醇：分析纯。5.3乙酸：分析纯。5.41%乙酸溶液（体积分数）：量取10mL乙酸(5.3)倒入加有900mL水的容量瓶中，用水定容于1000mL,经0.45m滤膜过滤。5.5阿替匹林C标准品：纯度98%，CAS:72944-19-5。5.6阿替匹林C标准储备液(1.0mg/mL):准确称取阿替匹林C标准品(5.5)10.0mg于10mL棕色容量瓶中，加甲醇溶液(5.1)使其溶解并定容至刻度，混匀，于4冰箱保存，保存期不超过6个月。5.7阿替匹林C标准工作液：吸取适量1.0mg/mL的标准储备液(5.6)，用甲醇溶液(5.1)分别稀释成0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL六个浓度的标准工作液，现用现配。5.8滤膜：0.45m有机系滤膜。6仪器与设备6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。6.2粉碎机。6.3超声波清洗器。6.4高心机。6.5分析天平：精确至0.0001g。7试样制备与保存从待测蜂胶样品中取出约50g,密封，并做标记，于一18冷冻保存。取出冷冻贮存的试样20g30g,迅速用粉碎机粉碎，过40目筛。8操作步骤8.1试样溶液的制备准确称取0.25g蜂胶试样，精确到0.01g,用5mL85%乙醇超声提取15min(25kHz,功率为50W),然后在高心机上以4000r/min的转速离心15min,取上清液置于50mL容量瓶中，重复提取离心3次，合并上清液，用85%乙醇定容至50mL,经0.45m滤膜(5.8)过滤，滤液用于液相色普测定。2