组织工程医疗产品 第13部分：细胞自动计数法 YYT 0606.13-2008.pdf

YY/T0606.13-2008小孔电流真空管水衢环一内部电极外部电极小孔一小孔内部详图样品杯一小孔管悬浮颗粒图1细胞自动计数法原理示意图4意义和用途4.1组织工程医疗产品的细胞应进行常规分析，包括细胞数量。传统的人工计数方法，如显微镜下用血细胞计数器计数，已报道会产生10%30%的误差，并且费时。基于电阻抗原理上的细胞自动计数具有更高的准确度、精确性，更加快速，不只限于分析人体细胞和血液细胞，儿乎可用于所用种类和类型的细胞。4.2电阻抗原理在20世纪50年代即被发现，目前许多公司都可以制造基于这一原理的细胞自动计数仪器。细胞自动计数仪器有助于消除人工计数时不同操作者带来的误差。5检测限的讨论5.1重合当一个以上的细胞同时穿过小孔时，不是产生两个独立的脉冲，而是产生一个更大的脉冲。结果会发生细胞计数结果偏少，测量的细胞体积增大。重合发生的频米可看作是细胞浓度在统计学上可预测的函数，因此可通过仪器校正，这称为重合校正。通过降低细胞悬液浓度，可最大程度的降低重合的发生，确保结果的准确（误差不超过5%）。5.2细胞的尺寸变化细胞直径变化可达30：1，体积变化可达27000：1，而这仅是反应了选择的小孔管的测量功能。应用这项技术，可以在大约0.6m1200m的范围内测量。低限以下会受到热和电噪声干扰。5.3小孔管的测量范围小孔管的测量范围与其直径成比例。在0.02倍直径到0.8倍直径的范围内，小孔管的测量范围与直径成线性相关。但在细胞尺寸大于0.6倍小孔管直径时，小孔管容易堵塞。因此，在实际操作中，小孔管的测量范围被规定为其直径的2%60%。2