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法庭科学
罂粟种属SSR标记检测
毛细管电泳荧光检测法
GAT
1963-2021
法庭
科学
罂粟
种属
SSR
标记
检测
毛细管
电泳
荧光
1963
2021
GA/T1963-2021表2反应体系中引物信息基因座反应体系中的浓度/(mol/L)引物参考序列扩增片段长度bpF-AGAAGGAGTGTGAGATGGATGAGGP1360.379R-TGACTTTCAACACCAATCTTCTCGF-TCAACAACGATCAGCAGGAGBP130.05159R-AATCTCAGCCGTCCATGAATF-TTTTGCAGGTTTGGTTTTCABP120.6198R-TATCAACCTTGGGCATTTCCF-GCATTTTCTTTTGTTGACGCTTCTP850.05106R-TCGAGAGAAGAAGCAGAGAGGAAGF-CGTGGAAATTAGGGTTTAATCGBP140.2185/197R-TTCCTGACATGCCAAGTTGA8.2.3选择适当的PC反应体系进行扩增,推荐10L反应体系。可参照表3计算反应用量,配置PCR反应体系。表3罂粟种属SSR标记反应体系试剂终浓度2X PCR Buffer一dNTPs0.2 mmol/LMgCl:1.6 mmol/LPCR引物0.05 umol/L0.6 gmol/L热启动Tag DNA聚合前0.3U/L纯水一模板DNA0.5ng1.0ng8.2.4按照计算结果混合各种成分,混匀、高心,分装到反应管内。8.2.5选择适当的扩增条件进行扩增。可参照表4设置循环参数。表4罂粟种属SSR标记扩增反应条件温度/时间循环数9511 min194305592 min28723086060 min10013