乙肝标志物检测.pptx

乙型肝炎病毒标志物检测,第一页，共二十一页。,概述,乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒,属于包膜病毒。在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%,第二页，共二十一页。,HBV形态与基因结构,嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)电镜：3种形态,乙型肝炎病毒,第三页，共二十一页。,小球形颗粒 空心包膜，不含核酸管形颗粒 两者均为过剩的病毒外壳，仅含HBsAg，无感染性,“空心汤团”,形态与基因结构,第四页，共二十一页。,Dane颗粒（完整的病毒）形态,HBsAg,HBcAg,HBV DNA,DNAP,（外膜蛋白）,（核衣壳蛋白）,HBeAg,第五页，共二十一页。,HBV Viral Genome Organization,HBsAg,HBcAg,HBeAg,3200 Base Pair Genome,Hepatocyte receptor bindng site,HBV DNA Polymerase,Protein that transactivates transcriptional promotors,第六页，共二十一页。,图4-2 血清中的Dane颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外 膜(),含核心（）,第七页，共二十一页。,乙型肝炎病毒（电镜）DANE氏颗粒直径42NM 核心直径27NM,第八页，共二十一页。,乙肝六项检测,参考值：ELISA法为阴性 放射免疫分析（RIA）法为阴性,第九页，共二十一页。,HBV抗原抗体系统,HBsAg：表面抗原，是HBV的外壳，不含DNA,其本身不具有传染性，但常与HBV同时存在，常被 作为传染性标志之一。是HBV感染的基本标志，也是最早出现的血清学标志之一。HBsAg阳性见于：乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌 注意 HBsAg阴性并不能完全排除HBV感染,第十页，共二十一页。,HBV抗原抗体系统,抗-HBs：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止 HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。抗-HBs阳性：可提示对乙肝病毒有一定程度的免疫力见于：注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)后，产生的主动或被动免疫。乙型肝炎恢复期，隐性感染的健康人，自身产生了免疫力,第十一页，共二十一页。,HBV抗原抗体系统,HBcAg（核心抗原）：一般情况不易从血清中检测到 游离的HBcAg。HBcAg阳性提示患者血清中有感 染的HBV存在，其含量较多表示复制活跃，传染 性强，预后较差。抗-HBc：非中和抗体，分IgM、IgG和IgA三型抗-HBc IgM：通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提示HBV 复制，是急性感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重要标志 抗-HBc IgG：在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生存在，是既往感染过HBV的指标。,第十二页，共二十一页。,HBV抗原抗体系统,HBeAg阳性：与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早 意义：表示乙肝处于活动期，并有较强的传染性。HBsAg持续阳性可转为慢性或肝硬化。孕妇阳 性可垂直传播。抗-HBe阳性率：慢性乙肝为48%，肝硬化为68.3%，肝 癌为80%在HBeAg消失后出现 表示HBV在体内复制减少或传染 性减弱或消失。乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。,第十三页，共二十一页。,血清学检测的临床意义,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义,急性或慢性感染(大三阳),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三阳),-,-,+,+,-,-,-,潜伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢复期,有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈,有免疫力,疫苗接种或曾经感染过,有免疫力,第十四页，共二十一页。,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1 抗体测定,概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S1位于HBV病毒颗粒的表面，是乙肝病毒识别肝细胞表面特异性受体的主要成分，是乙肝病毒复制和活动的标志物。参考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S1为阴性 抗Pre S1为阴性临床意义：1、非常重要的传染性指标，作为病毒复制的标志较 HBeAg敏感。2、前S1抗原阴转越早、抗Pre S1阳转越早，患者病程 越短、预后越好。,第十五页，共二十一页。,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2 抗体测定,概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S2（Pre S2）位于 HBV病毒颗粒的表面蛋白成分，是乙肝病毒侵入肝细 胞的主要结构成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2 抗体是乙肝病毒HBV的中和抗体。参考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法：Pre S2为阴性 抗Pre S2为阴性临床意义：1、Pre S2为阳性提示HBV复制异常活跃，有传染性。2、抗Pre S2为阳性，见于乙肝急性期及恢复早期，提示HBV已被清除，预后较好。,第十六页，共二十一页。,乙型肝炎病毒DNA测定,概念：乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈双股环形，是HBV的基因物质，也是乙型肝炎的直接诊断证据。参考值：实时荧光定量PCR法:阴性临床意义：1、HBV-DNA 阳性：是诊断乙肝的佐证，提示HBV复 制及有传染性。2、也用于监测应用HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效 果，若HBV-DNA阳性，表明疫苗阻断效果不佳。,第十七页，共二十一页。,乙型肝炎病毒YMDD变异测定,概念：YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸）位点是HBV反转录酶的活性部分，属高度保守序列。在HBV的反转录过程中，YMDD位点中的YM能与模板核苷末端糖基相作用，影响寡核苷酸与模板链的结合。参考值：实时荧光定量PCR法、基因芯片分析、焦磷酸测序法和基因克隆与测序法：该位点序列为酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸临床意义：,第十八页，共二十一页。,临床意义：YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗病毒药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或缬氨酸（V），就可能引起抗HBV类药物的药效丧失，从而产生耐药性。YMDD测定结果为临床抗HBV类治疗用药提供了实验室诊断依据。,第十九页，共二十一页。,结束,第二十页，共二十一页。,内容总结,乙型肝炎病毒标志物检测。抗-HBs：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止。抗-HBc：非中和抗体，分IgM、IgG和IgA三型。HBeAg阳性：与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早。在HBeAg消失后出现 表示HBV在体内复制减少或传染。乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1 抗体测定。2、前S1抗原阴转越早、抗Pre S1阳转越早，患者病程。结束,第二十一页，共二十一页。,