一般血液学检验.pptx

第二章一般血液学检验The General Examination Of Hematology,1,第一页，共九十八页。,1.The method of determination and clinical significance of red blood cell,white blood cell and hemoglobin.2.Red blood cell and white blood cell morphology evaluation and clinical significance.3.Diagnosis and classification of anemia.4.Blood cell differential count and its clinical significance.5.Quality control and estimate of red blood cell examination and white blood cell examination.,KEY POINTS,2,第二页，共九十八页。,主要内容,第一节外周血液血细胞形态学检验第二节红细胞检验第三节 白细胞检验,3,第三页，共九十八页。,第一节 外周血液血细胞形态学检验,一、血细胞涂片的制作和染色,1、血涂片的制作,手工涂片法,自动涂片法,4,第四页，共九十八页。,2、血涂片的染色,主要成分：碱性美兰与酸性伊红血细胞是由蛋白质组成的，带有氨基端和羧基端。各种血细胞的化学性质不同，对染料的亲和力也不同。物理吸附、化学亲和与电荷作用的共同结果。如血红蛋白是碱性蛋白，就和酸性伊红结合；细胞核蛋白是酸性蛋白，就和碱性美兰结合；还有一种颗粒两种染料都结合，为中性颗粒。,瑞氏染色,5,第五页，共九十八页。,显微镜检查法,计算机图象分析,二、红细胞形态检查,方法,6,第六页，共九十八页。,形态:外表积/体积比值大；增加气体透过面积；作为呼吸载体,结合、运输氧和CO2。,1、正常红细胞形态,7,第七页，共九十八页。,大小异常 染色异常 形态异常 结构异常,2、异常红细胞形态,8,第八页，共九十八页。,大小异常,小红细胞,大红细胞,还包括巨红细胞和红细胞大小不等。,9,第九页，共九十八页。,10,第十页，共九十八页。,染色异常,低色素性：中央淡染区扩大，甚至中间不着色。,高色素性：红细胞内生理性中央浅染区缩小甚至消失，整个红细胞均染成红色，系红细胞内血红蛋白含量增高所致。嗜多色性：红细胞呈灰蓝色或灰红色，胞体较大，属于尚未完全成熟的红细胞，提示骨髓造红细胞能力活泼。,11,第十一页，共九十八页。,形态异常,水滴型红细胞,刺毛红细胞,椭圆型红细胞,类型很多，原因复杂常见有：,12,第十二页，共九十八页。,口形红细胞,球型红细胞,靶形红细胞,还包括新月形、缗钱状、裂片形等。,13,第十三页，共九十八页。,结构异常 嗜碱性点彩红细胞 染色质小体 卡-波环 有核红细胞,14,第十四页，共九十八页。,15,第十五页，共九十八页。,16,第十六页，共九十八页。,17,第十七页，共九十八页。,卡-波环,胞质中出现的紫红色细线圈状结构，环行或8字形，常与染色质小体同时存在，可见于白血病、增生性贫血等。,18,第十八页，共九十八页。,三、白细胞形态检查,19,第十九页，共九十八页。,1、中性粒细胞核象变化,成熟,幼稚,20,第二十页，共九十八页。,1核象左移外周血中杆状核超过5%和/或出现杆状核以前的细胞，为核左移。见于急性感染、急性中毒、急性溶血。,21,第二十一页，共九十八页。,2核象右移,一般外周血中的中性粒细胞以3叶为主，如果5叶以上超过3%，为核右移。大多数由于缺乏造血物质，如恶性贫血、巨幼细胞性贫血。,22,第二十二页，共九十八页。,空泡变性 棒状小体 中毒颗粒 杜勒小体,2、中性粒细胞其它异常,23,第二十三页，共九十八页。,24,第二十四页，共九十八页。,25,第二十五页，共九十八页。,26,第二十六页，共九十八页。,在传染性单核细胞增多征、病毒性肺炎、病毒性肝炎等病毒感染时或过敏原的刺激下，可使得淋巴细胞增生，并出现形态学的变化。分为空泡型、不规那么型和幼稚型,3、异常淋巴细胞,27,第二十七页，共九十八页。,28,第二十八页，共九十八页。,1、方法显微镜计数法血细胞分析仪法,一、红细胞计数,第二节 红细胞检验,29,第二十九页，共九十八页。,成年男性：(4.05.5)1012/L成年女性：(3.55.0)1012/L新生儿：(6.07.0)1012/L,2、参考值,30,第三十页，共九十八页。,3、临床意义,A、生理性增多新生儿、高原生活、剧烈运动、精神因素等,1增 多,31,第三十一页，共九十八页。,B 绝对性增多：,继发性 心、肺疾病 异常血红蛋白病 某些肿瘤等原发性 真性红细胞增多症,病理性增多,A 相对性增多：血浆水分丧失，有形成分相对增 加，绝对值没有发生变化,32,第三十二页，共九十八页。,生理性减少 儿童、孕妇、老年人病理性减少A、骨髓造血功能低下 如再障B、造血原料缺乏 如缺铁贫、巨幼贫C、红细胞破坏增加 如溶贫D、红细胞丧失过多,2减 少,33,第三十三页，共九十八页。,二、血红蛋白测定hemoglobin Hb,34,第三十四页，共九十八页。,血红蛋白是由四条多肽链组成的,二条链(每条含141个氨基酸残基)和二条链(每条含146个氨基酸残基)。每条多肽链的螺旋结构形成一个疏水性的空间，可保护血红素分子不与水接触，Fe2+不被氧化。Fe2+位于血红素卟啉环的中央，与卟啉环的4个吡咯基以及多肽链上的组氨酸形成六配位体。每个血红蛋白分子可逆结合4个氧分子，每克血红蛋白可结合1.34 mL氧气。,35,第三十五页，共九十八页。,1、测定方法,氰化高铁血红蛋白法HiCN,十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法SDS-Hb,叠氮高铁血红蛋白法HiN3,36,第三十六页，共九十八页。,2、参考值,成年男性：120160g/L成年女性：110150g/L新生儿：170200g/L,37,第三十七页，共九十八页。,测定方法,手工温氏比积法,分析仪微量法,三、血细胞比容测定hematocrit，Hct,红细胞比积Hct、PCV：又叫红细胞体积分数。指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。,38,第三十八页，共九十八页。,【参考值】男性：0.40-0.50L/L40-50容积%。女性：0.37-0.48L/L37-48容积%。【临床意义】红细胞比积增高：相对性增多血液浓缩。绝对性增高真性红细胞增多症。红细胞比积减少：见于各种贫血。,39,第三十九页，共九十八页。,四、红细胞相关参数的计算,1、平均红细胞容积mean corpuscular volume,MCV。,MCV=,【参考范围】8095fl,40,第四十页，共九十八页。,四、红细胞相关参数的计算,、平均红细胞血红蛋白量mean corpuscular hemoglobin,MCH,MCH=,【参考范围】2731pg,41,第四十一页，共九十八页。,.平均红细胞血红蛋白浓度mean copuscular hemoglobin concentration，MCHC,四、红细胞相关参数的计算,MCHC=,【参考范围】320360g/L32%36%,42,第四十二页，共九十八页。,四、红细胞相关参数的计算,、红细胞体积分布宽度RDW定义：是反映周围血红细胞间体积差异的参数通过变异系数定量的表示红细胞体积分布的离散程度。原理：血细胞自动分析仪通过电阻的改变，产生脉冲信号的强弱。【参考范围】成人：15.0%新生儿：男15.9%女16.2%,43,第四十三页，共九十八页。,【临床意义】根据上述指标可进行贫血的形态学分类。,四、红细胞相关参数的计算,44,第四十四页，共九十八页。,45,第四十五页，共九十八页。,46,第四十六页，共九十八页。,五、网织红细胞reticulocyte计数,界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核酸经碱性染料活体染色后，呈现点状或线网状结构，故名网织红细胞。,47,第四十七页，共九十八页。,、计数方法,1手工方法：米勒Miller窥盘法该方法可明显提高计数的准确性和准确性.,A,3,1,B,将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和网织RBC。,48,第四十八页，共九十八页。,抗凝全血噻唑橙染色，用流式细胞仪分析样本中10000个细胞，报告网织红细胞%和平均荧光强度。荧光强度越强，细胞越幼稚。流式细胞仪分析简便，结果精确、灵敏，消除了取样带来的误差。,流式细胞仪法：,49,第四十九页，共九十八页。,成人：0.0050.0150.5%1.5%)新生儿：0.020.06绝对值：(2484)109/L,、参考值,50,第五十页，共九十八页。,1评价骨髓增生能力，判断贫血类型 再障时，明显降低。绝对值低于5109/L可做为急性再障的辅助诊断指标。失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明显高于正常。营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持正常、轻度升高或降低。,、临床意义,51,第五十一页，共九十八页。,2评价疗效网织红细胞反响：IDA或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维生素B12或叶酸治疗2-3d后，网织红细胞计数值开始上升，7-10d到达最高(10%左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白开始升高。骨髓移植、EPO治疗后：假设骨髓开始恢复造血功能，网织红细胞计数值上升。,、临床意义,52,第五十二页，共九十八页。,3放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治疗方案，防止造成严重的骨髓抑制。,、临床意义,53,第五十三页，共九十八页。,Reticulocyte production index,RPI病人网织红细胞/2*病人PCV/正常人PCV男0.45，女0.40意义：3提示溶血性贫血或急性失血性贫血；2提示为骨髓增生低下或红细胞系成熟障碍性贫血。,网织红生成指数,54,第五十四页，共九十八页。,概念,红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。在许多病理情况下血沉可明显加快。,六、血细胞沉降率erythrocyte sedimentation rate,ESR,55,第五十五页，共九十八页。,魏氏法：取静脉血1.6ml，按4:1比例与柠檬酸钠溶液0.4ml混匀，然后吸入清洁、枯燥的标准魏氏血沉管，并调至“0刻度处。血沉管在室温下1825严格垂直放置。防止阳光直照、振动和血液外溢。1h后，读出血浆凹液面底部至沉降红细胞柱顶部之间距离，即为血沉结果。,、测定方法,56,第五十六页，共九十八页。,动态监测法：根据血沉在中间40min中线性下降的原理，采用红外线技术每隔45s动态监测线性下降过程中红细胞沉降的位置，根据线性方程换算成魏氏法1h或2h的结果。,、测定方法,57,第五十七页，共九十八页。,光密度法：意大利UDINE公司专利技术。红细胞缗钱状结构的形成对红细胞沉降的整个过程发挥关键作用，因此，全血的透光性将随着时间的变化而增加。该方法利用激光为光源，对毛细管中的微量全血进行照射，动态检测红细胞聚集和沉降的变化过程，而后通过光密度的变化换算成魏氏法的相关结果。,、测定方法,58,第五十八页，共九十八页。,、影响血沉的因素,血浆因素正电荷的大分子蛋白质：血沉加快;负电荷的蛋白质：血沉减慢;脂类：胆固醇，甘油三脂，利于红细胞聚集，血沉加快;卵磷脂使血沉减慢;分子多聚体药物：使红细胞聚集，如葡萄糖，白明胶等。,59,第五十九页，共九十八页。,、影响血沉的因素,红细胞因素红细胞数量：数量越少，阻力越小，血沉 加快;红细胞形态：直径大，厚度薄，红细胞易 形成缗钱状，血沉加快。,60,第六十页，共九十八页。,、影