1第一章、植物病原真菌的别离、培养及纯化技术第一页，共六十五页。21〕材料：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml1、马铃薯葡萄糖琼脂〔PDA〕培养基马铃薯葡萄糖琼脂：potatodextroseagar,简称PDA；马铃薯蔗糖琼脂：potatosucroseagar,简称PSA。一、真菌学研究中常见的培养基的制作和灭菌第二页，共六十五页。3第三页，共六十五页。42〕制作步骤马铃薯洗净，去皮称200g切块/条，1000ml水煮沸30min，用双层纱布滤去薯块，参加15-20g琼脂，加热熔化，再加20g葡萄糖，待完全溶解后，趁热用双层纱布再过滤，补水并定容到1000ml,分装于三角瓶或试管中，塞好棉塞并包上牛皮纸，扎紧后高压灭菌。第四页，共六十五页。5自然pH；调pH值，也可用1mol/L的NaOH或HCl调至pH为5.5～6.5之间，最后加水补足至1000mL。Tips:实验中使用的水，一般情况下并不要求用蒸馏水，只要水比较洁净，没有有害物质就可以了，硬水〔井水〕含有较多的钙镁离子，配制的培养基沉淀较多，最好防止使用。第五页，共六十五页。62、植物组织和煎汁许多植物材料如豆荚、茎秆、种子等，可以放在试管中，加少量水份以保持湿润，灭菌后即能做培养基使用。植物煎汁是很好的培养基，可以满足普通微生物的营养需要，各种植物的煎汁都可用作培养液，如加琼脂即能制成固体培养基。当然，必须灭菌后才能使用。第六页，共六十五页。73、培养基的分装根据不同需要，可将制好的培养基分装入试管或三角瓶中。试管分装时，使用玻璃漏斗。装入量视试管大小及用途而定，固体培养基的分装量为管高的1/5左右，用三角瓶分装培养基时，容量不宜超过容积的1/3----1/2。注意：不要将培养基沾到管口或瓶口上，以免沾湿棉塞而引起污染。第七页，共六十五页。8制备好的培养基必须经过灭菌，方能使用。4、灭菌高压蒸汽灭菌：15磅/英寸或1kg/cm20.1Pa/cm2,持续15-30min，培养基及其它一些用品可用此法灭菌。别离培养时需要的培养皿等，要事先洗净、晾干/烘干、包装好，进行干热灭菌。灭菌方法：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、过滤灭菌化学灭菌、以及辐射灭菌等。第八页，共六十五页。9滤膜孔径主要有0.22µm和0.45µm两种。过滤太快，滤液中将混入细菌而使除菌不完全。第九页，共六十五页。10第十页，共六十五页。115、斜面、平板培养基的制作试管培养基灭菌后，要趁热斜放。先在桌上放一长木板条，然后逐个摆放，使培养基斜面长度为试管长度的2/5至3/5，冷凝后即成斜面培养基。三角瓶中的培养基可趁热倒入已...
