X8月季的花药培养讲解.pptx

专题三 植物的组织培养技术,课题2 月季的花药培养,第一页，共二十三页。,秋水仙素处理,花药离体培养,单倍体育种,AABBaabb,P,AAbb,ABAbaBab,单倍体植株,AABBAAbbaaBBaabb,原理：细胞的全能性,植株矮小，高度不育,第二页，共二十三页。,月季(Rosa chinensisJacq.),玫瑰(Rosa rugosaThunb.),一年多生，花朵较大，花茎光滑、茎上刺少而粗，香味寡淡，果实圆形。,一年一生，花朵较小，花茎有刚毛、茎上刺多而小，香味浓郁，果实扁圆形。,第三页，共二十三页。,被子植物：种子有果皮和种皮包被的植物。,被子植物和裸子植物,裸子植物：种子没有果皮，但有种皮包被的植物。,实例：向日葵、梨、月季等开花并结果的植物。,实例：松、杉、柏等。,第四页，共二十三页。,花的结构,第五页，共二十三页。,花丝：输送营养,花药：囊状结构，内有很多花粉(细胞,2、花粉母细胞(小孢子母细胞)花粉(未成熟)即：单倍体的生殖细胞3、发育阶段：四分体时期、单核期、双核期,一被子植物的花粉发育,1、雄蕊,根底知识,减数分裂,第六页，共二十三页。,花粉发育过程图,小孢子母细胞花粉母细胞,4个小孢子,减数分裂,小孢子四分体时期,单核居中期,单核靠边期,双核期,有丝分裂,2个精子,有丝分裂,营养细胞,单核期,生殖细胞,第七页，共二十三页。,1花粉母细胞2n,4个小孢子(小孢子四分体)n,减分,有分,1个花粉管细胞核n,1个生殖细胞核n,有分,2个精子,单核居中期n,单核靠边期n,即4个单倍体细胞,双核期,单核期,花粉发育过程,基因型相同,第八页，共二十三页。,雌蕊的结构,第九页，共二十三页。,二产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径,说明：两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。,根底知识,第十页，共二十三页。,根底知识,胚状体(体细胞胚或花粉胚组织培养过程中，某些离体的体细胞或花粉细胞转变成的与胚非常相似的结构。(也具有胚芽、胚根、胚轴等结构胚状体的发育过程和正常胚类似。,二产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径,第十一页，共二十三页。,三影响花药培养的因素 1、材料的选择 此外，亲本生长条件、材料低温预处理、接种密度等 2、培养基的组成,从花药所处时期看：从花粉发育时期看：从花蕾开放程度看：,初花期(花期早期)的花药,单核期(单核靠边期)的花粉,完全未开放的花蕾,第十二页，共二十三页。,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,想一想,为什么选择完全未开放的花蕾作花药离体培养的材料？,花瓣松动，微生物可能侵入到花药，给消毒带来困难。,2、含菌少、易消毒,1、可挑选到单核期的花药,第十三页，共二十三页。,实验操作,1、材料的选取,2、材料的消毒,3、接种和培养,4、鉴定和筛选,第十四页，共二十三页。,1、材料选取,通过镜检确定花粉是否处于适宜的发育期：最常用的方法：醋酸洋红法(将细胞核染成红色 某些植物的花粉细胞核不易着色：焙花青-铬矾法，将花粉细胞核染成蓝黑色。,从花药的时期看：从花粉发育期看：从花蕾开程度看：,选择适宜的月季花药,初花期的花药,单核期的花粉,完全未开放的花蕾,第十五页，共二十三页。,2、材料的消毒,花蕾,70酒精约30s,无菌水清洗,无菌吸水纸 吸干水分,0.1氯化汞溶液,无菌水冲洗,提示：用于培养花药的花蕾，外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态，所以只需将整个花蕾消毒即可。,思考：月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比，二者有何不同？,在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。,第十六页，共二十三页。,在无菌条件下除去花蕾的萼片和花瓣，取出花药,b、要彻底去除花丝,取出花药后立即接种于培养基上，每瓶接种花药7-10个。,剥取花药,a、尽量不损伤花药,接种,注意：,3、接种和培养,温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,培养,第十七页，共二十三页。,培养20-30天后，花药分裂形成愈伤组织或胚状体,假设形成胚状体：一个花药会产生大量幼小植株，必须尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上。,假设形成愈伤组织：应及时将愈伤组织转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株,第十八页，共二十三页。,在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，染色体组的数目常常会发生改变。主要原因是营养核和生殖核融合造成的,4、鉴定和筛选,第十九页，共二十三页。,菊花组织培养与月季花药离体培养的比较,细胞的全能性,体细胞,花药(花粉,正常植株,单倍体植株,不必添加,需要添加,不需要,需要,第二十页，共二十三页。,Thanks!,第二十一页，共二十三页。,提示：二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。精子在花粉管中形成三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞再进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。,第二十二页，共二十三页。,内容总结,专题三 植物的组织培养技术。实例：向日葵、梨、月季等开花并结果的植物。4个小孢子(小孢子四分体)n。二产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径。说明：两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。胚状体(体细胞胚或花粉胚。(也具有胚芽、胚根、胚轴等结构。此外，亲本生长条件、材料低温预处理、接种密度等。初花期(花期早期)的花药。单核期(单核靠边期)的花粉。精子在花粉管中形成,第二十三页，共二十三页。,