阵发性睡眠性血红蛋白尿的流式细胞术检测李智伟第一页，共三十七页。PNH(paroxysmalnocturnalhemoglobinuria)是一种罕见的获得性克隆造血干细胞疾病。但近年来有增多趋势。我国北方多于南方。半数以上发生在20-40岁青壮年。男性多于女性，与遗传及种族无关。本病起病隐袭缓慢，呈慢性过程，以贫血、出血为首发病症者较多，以血红蛋白尿起病者较少。第二页，共三十七页。第三页，共三十七页。血红蛋白尿睡眠有关，早晨较重，下午较轻尿液外观为酱油或红葡萄酒样;伴乏力、胸骨后及腰腹疼痛、发热等第四页，共三十七页。原因因为补体作用最适宜的pH是6.8～7.O，而睡眠时呼吸中枢敏感性降低，酸性代谢产物积聚第五页，共三十七页。第六页，共三十七页。研究历史Strubing第一次报道PNHHam和Dingle证明了PNH患者的红细胞在血清酸化条件下，易发生溶血，这就是现在普遍使用的Ham实验1983年证实PNH患者GPI合成异常1993年pig-a基因突变第七页，共三十七页。流式细胞术原理：X染色体上PIG-A〔造血干细胞经获得性体细胞基因〕突变导致糖化肌醇磷脂(GPI)锚合成障碍导致由GPI锚接在细胞膜上的一组膜蛋白丧失，包括CD16、CD55、CD59等第八页，共三十七页。第九页，共三十七页。GPI锚连接蛋白补体调接蛋白衰变加速因子(DAF或CD55)、膜攻击复合物抑制因子(MACIF或MIRL或CD59)、补体C8结合蛋白(HRF或C8bp)、膜辅助蛋白(MCP)。粘附分子淋巴细胞功能相关抗原-3(LFA-3或CD58)、Blast-1/CD48、CD67、CD66。第十页，共三十七页。GPI锚连接蛋白酶类红细胞乙酰胆碱脂酶(AchE)、中性粒细胞碱性磷酶酸酶(NAP)、5’外核酸酶(CD73)。受体类中性粒细胞III型Fc受体(FcRIIIb或CD16)、单核细胞分化抗原(CD14)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)。血型抗原CD55携带的Comer抗原、AchE携带的Yt抗原。第十一页，共三十七页。1型细胞CD59完全阳性第十二页，共三十七页。补体激活途径C1C1C2,C4C4b2b(C3转化酶〕C3C3bP〔备解素〕PC3bBbC3bB(C5转化酶〕C4b2b3b或PC3bBbC8C9C6C7C5C5bC5b678C5b-9(MAC)CD59替代途径经典途径CD55Ag-Ab第十三页，共三十七页。分析1.红系及粒系FSC/SSC设门报告标本中CD55、CD59阴性比例第十四页，共三十七页。做20~30份正常人血样划定阳性区〔Ⅰ区〕范围同型阴性对照界定Ⅲ区范围，中间的区域即为Ⅱ区。第十五页，共三十七页。第十六页，共三十七页。根据CD59可以将PNH细胞分为3型1型细胞CD59完全阳性正常细胞2型细胞CD59局部阳...
