3、细菌药敏试验方法及进展-徐岷.pptx

细菌药物的敏感试验方法及进展,郑州大学一附院徐 岷,第一页，共一百三十五页。,概念：细菌对抗菌药物的敏感试验简称药敏试验是测定某一菌株对某种抗菌药物是敏感还是耐药的一种体外监测试验。而细菌对抗菌药物的敏感试验，就是对抗菌药物进行实验室监测的主要手段之一。,第二页，共一百三十五页。,目的：1、为临床上治疗感染病人选择最佳答案答案抗菌药物，帮助临床用药，防止由于用药不当，导致耐药菌株产生或造成人体伤害.2、进行流行病学调查，了解致病菌的耐药变迁情况，为医疗行政主管部门的决策提供依据.,第三页，共一百三十五页。,3、用于某些细菌的鉴别和鉴定4、评价新抗菌药物的抗菌谱及抗菌活性等药效学特性。,第四页，共一百三十五页。,临床实验室做药敏试验时应注意,1，仅仅检测有可能导致感染的细菌2，用一个标准化的检验方法3，报告对生物体和感染部位适宜的抗生素4，为保证药敏实验的正常的运行，执行常规质量控制5，及时将重要的检测发现如多重耐药菌株与相关部门沟通。,第五页，共一百三十五页。,什么是CLSI,临床和实验室标准化研究所国际的，多学科的，非盈利性标准开展和教育机构为许多实验室操作提供标准和指南,第六页，共一百三十五页。,药敏试验的CLSI标准,全球广泛使用每年更新有临床医师，微生物学专家，药学家和企业通过一致同意的程序来更新标准,第七页，共一百三十五页。,第八页，共一百三十五页。,M02-A10阐述如何进行纸片扩散法药敏试验M07-A8阐述如何进行MIC法药敏试验参考肉汤稀释法和琼脂稀释法M100-S19 Tables表格M02，M07 每三年更新M100 每年更新,第九页，共一百三十五页。,CLSI药敏表格列表,用于检测/报告的药敏解释标准“折点质控范围,第十页，共一百三十五页。,第十一页，共一百三十五页。,第十二页，共一百三十五页。,第十三页，共一百三十五页。,第十四页，共一百三十五页。,做药敏试验时,检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？,第十五页，共一百三十五页。,常规情况下我们需要检测哪些菌株药敏试验？,一个培养中可疑病原菌不会多于2种菌株的药敏谱不可预知.药敏试验时应考虑特殊菌株/感染部位,第十六页，共一百三十五页。,第十七页，共一百三十五页。,第十八页，共一百三十五页。,第十九页，共一百三十五页。,第二十页，共一百三十五页。,为什么我们不对每一个别离的潜在病原菌做药敏试验?,报告单上药敏试验结果表示该细菌是导致病人感染的原因当不需要是报告药敏结果可能导致:-不必要或不适当的治疗-耐药菌株的选择-增加病人二重感染的概率-阻碍进一步查找导致病人疾病的真正原因,第二十一页，共一百三十五页。,做药敏试验时,检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？,第二十二页，共一百三十五页。,不同的实验室可以参考,CLSI纸片扩散法MIC肉汤稀释或琼脂稀释法或商业化药敏系统E-test试验,第二十三页，共一百三十五页。,第二十四页，共一百三十五页。,第二十五页，共一百三十五页。,第二十六页，共一百三十五页。,第二十七页，共一百三十五页。,第二十八页，共一百三十五页。,第二十九页，共一百三十五页。,第三十页，共一百三十五页。,第三十一页，共一百三十五页。,第三十二页，共一百三十五页。,第三十三页，共一百三十五页。,第三十四页，共一百三十五页。,第三十五页，共一百三十五页。,第三十六页，共一百三十五页。,第三十七页，共一百三十五页。,第三十八页，共一百三十五页。,第三十九页，共一百三十五页。,第四十页，共一百三十五页。,第四十一页，共一百三十五页。,第四十二页，共一百三十五页。,第四十三页，共一百三十五页。,细菌药敏试验自动化,第四十四页，共一百三十五页。,自动化的优点,节省劳动力快速药敏结果药敏试验的结果解释实验室计算机系统界面软件保持当前的检测/报告规那么,第四十五页，共一百三十五页。,第四十六页，共一百三十五页。,第四十七页，共一百三十五页。,第四十八页，共一百三十五页。,第四十九页，共一百三十五页。,第五十页，共一百三十五页。,第五十一页，共一百三十五页。,自动化的缺点,实验室花费大药敏试验的灵活性相对纸片扩散法耐药性变迁的发现实验室的空间,第五十二页，共一百三十五页。,第五十三页，共一百三十五页。,第五十四页，共一百三十五页。,第五十五页，共一百三十五页。,第五十六页，共一百三十五页。,第五十七页，共一百三十五页。,何时使用E-test？,使用自动化仪器或CLSI推荐方法均不能生长的菌株菌株/药物的测试不能纸片扩散法进行葡萄球菌对万古霉素如果需要测试MIC和/或较宽的药物浓度范围苛氧菌，如肺炎链球菌，厌氧菌等,第五十八页，共一百三十五页。,第五十九页，共一百三十五页。,第六十页，共一百三十五页。,为什么分子试验方法在检测细菌对抗生素耐药上没有的倒很好开展？有很多基因介导抗生素耐药目前还难以确定一个耐药基因的检出是否与药物的体外或体内耐药相关,第六十一页，共一百三十五页。,做药敏试验时,检测什么菌？使用什么方法？检测哪些抗生素？如何报告结果？,第六十二页，共一百三十五页。,M100表1提示,选择测试/报告药物确定一种药物的结果可否用于预测另一种药物确认报告“危险药物报告中增加“注释,第六十三页，共一百三十五页。,第六十四页，共一百三十五页。,第六十五页，共一百三十五页。,“有选择性的报告意味着什么？,先报告窄抗菌谱，最低毒性，最小花费一线药物报告其他药物，如果一线耐药来自特定身体部位对药物耐受或不敏感的病人67976918多种微生物感染多个部位感染,第六十六页，共一百三十五页。,第六十七页，共一百三十五页。,第六十八页，共一百三十五页。,第六十九页，共一百三十五页。,第七十页，共一百三十五页。,CLSI的“警告注解,某些药物/菌株组合在体外显示有活性测试“敏感但是临床无效不要将其报告为“敏感,第七十一页，共一百三十五页。,第七十二页，共一百三十五页。,第七十三页，共一百三十五页。,第七十四页，共一百三十五页。,第七十五页，共一百三十五页。,第七十六页，共一百三十五页。,第七十七页，共一百三十五页。,CLSI中的“Rx注解,建议将CLSI的注解或CLSI注释的修改加到报告中，增加临床医生的理解如：在抗感染治疗中利福平不应该单独使用,第七十八页，共一百三十五页。,第七十九页，共一百三十五页。,什么是MIC？,最小抑菌浓度-在一定实验环境下，以ug/ml为单位报告的能抑制病原菌生长的最低抗菌药物浓度,第八十页，共一百三十五页。,第八十一页，共一百三十五页。,第八十二页，共一百三十五页。,第八十三页，共一百三十五页。,第八十四页，共一百三十五页。,第八十五页，共一百三十五页。,第八十六页，共一百三十五页。,第八十七页，共一百三十五页。,第八十八页，共一百三十五页。,总结1,CLSI为许多实验室程序，包括药敏试验，提供标准和指南CLSIM100药敏表格每年更新对一份标本常规不对两种以上病原菌进行药敏试验对不可能引起感染的病原菌不做药敏试验,第八十九页，共一百三十五页。,总结2,对于纸片扩散法药敏试验，在抑菌圈的菌落提示为污染或抗药物亚群；不应该无视在所有肉汤MIC试验接种后，要做纯度检测，以证实抗生素药敏试验的结果不是有污染菌所致。,第九十页，共一百三十五页。,总结3,自动化药敏系统和药敏快速报告相比手工药敏系统有更大优势纸片扩散法试验不适用于某些抗菌药物/菌株的组合；需要进行MIC测试抗菌药物的选择性报告可以帮助临床选择窄谱抗菌药物用一种药物的结果推测另一种药物的结果是“错误的，除非在CLSI表格中有“或连接,第九十一页，共一百三十五页。,总结4,一些“药物/菌株的联合对病人是无效的，即使体外实验是敏感一些抗菌药物对治疗特定部位感染是无效的一些抗菌药物只能用于测试尿路感染非“敏感的结果在报告前需确证,第九十二页，共一百三十五页。,第九十三页，共一百三十五页。,第九十四页，共一百三十五页。,药敏试验质量控制的职责,培养基/试剂的正确保存实验室人员的胜任药敏试验按照标准方法操作,第九十五页，共一百三十五页。,测试药敏“质控菌株,第九十六页，共一百三十五页。,第九十七页，共一百三十五页。,第九十八页，共一百三十五页。,第九十九页，共一百三十五页。,第一百页，共一百三十五页。,第一百零一页，共一百三十五页。,应该多长时间做一次常规药敏质控,每日或.在检测病人菌株的日子每周2030天的合格日质控后,第一百零二页，共一百三十五页。,如何确证周质控在实验室是否接受,进行20-30日的每日质控转入周质控假设不多于.-20次日质控中有1次或-30次日质控中有3次,第一百零三页，共一百三十五页。,第一百零四页，共一百三十五页。,第一百零五页，共一百三十五页。,总之.,当用新批号的材料时进行质量控制培养基，药敏纸片如新人员操作试验时进行质量控制,第一百零六页，共一百三十五页。,第一百零七页，共一百三十五页。,第一百零八页，共一百三十五页。,第一百零九页，共一百三十五页。,第一百一十页，共一百三十五页。,第一百一十一页，共一百三十五页。,第一百一十二页，共一百三十五页。,第一百一十三页，共一百三十五页。,第一百一十四页，共一百三十五页。,第一百一十五页，共一百三十五页。,第一百一十六页，共一百三十五页。,第一百一十七页，共一百三十五页。,第一百一十八页，共一百三十五页。,第一百一十九页，共一百三十五页。,第一百二十页，共一百三十五页。,第一百二十一页，共一百三十五页。,第一百二十二页，共一百三十五页。,第一百二十三页，共一百三十五页。,第一百二十四页，共一百三十五页。,第一百二十五页，共一百三十五页。,第一百二十六页，共一百三十五页。,第一百二十七页，共一百三十五页。,第一百二十八页，共一百三十五页。,第一百二十九页，共一百三十五页。,第一百三十页，共一百三十五页。,第一百三十一页，共一百三十五页。,第一百三十二页，共一百三十五页。,第一百三十三页，共一百三十五页。,第一百三十四页，共一百三十五页。,内容总结,细菌药物的敏感试验方法及进展。徐 岷。阐述如何进行MIC法药敏试验参考肉汤稀释法和琼脂稀释法。M100-S19 Tables表格。M02，M07 每三年更新。M100 每年更新。MIC肉汤稀释或琼脂稀释法。-在一定实验环境下，以ug/ml为单位报告的能抑制病原菌生长的最低抗菌药物浓度。对不可能引起感染的病原菌不做药敏试验。如新人员操作试验时进行质量控制,第一百三十五页，共一百三十五页。,