4.消毒灭菌与噬菌体(人卫8版).pptx

内容,第五节 抑制或杀死微生物的理化因素,第一页，共六十五页。,利用理化因素对微生物的影响进行消毒灭菌，是防止其污染或传播的重要措施,第二页，共六十五页。,本节重点与难点,1.掌握消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作的概念2.掌握热力灭菌的种类、原理及应用范围;湿热与干热灭菌法的比较；巴氏消毒法3.掌握紫外线杀菌的原理及特点；滤过除菌的应用4.熟悉影响消毒剂作用的因素,第三页，共六十五页。,杀死物体上病原微生物,不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物,消毒,disinfection,灭菌,sterilization,无菌,asepsis,防腐,antisepsis,防止或抑制体外细菌生长繁殖,不含活菌,杀死物体上的所有微生物,无菌操作,一、消毒灭菌的常用术语,第四页，共六十五页。,二、物理消毒灭菌法,热力灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法 枯燥低温抑菌法,第五页，共六十五页。,一热力灭菌法,1.杀菌机制,有干热和湿热两大类灭菌法,损伤机制复杂菌体蛋白凝固变性,第六页，共六十五页。,同一温度下湿热比干热灭菌效果好,湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热,2.灭菌效果,第七页，共六十五页。,3.干热灭菌法,燃烧：直接点燃物品或将其置于燃烧炉内，最彻 底的灭菌法，适用于废弃物品或动物尸体灭菌,烧灼：直接用火焰灭菌，适用于接种环或试管口灭菌,第八页，共六十五页。,干烤：利用干烤箱，加热160-180 2小时，适用 于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,第九页，共六十五页。,红外线：利用电磁波的热效应灭菌，其热效应只 在照射外表产生。多用于医疗器械灭菌,微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应 有一定穿透性。用于食品、药品、非金属 器械及其他物品灭菌,第十页，共六十五页。,巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的特定微生 物,用于牛奶、啤酒等消毒,4.湿热灭菌法,煮沸消毒法：100水煮5min-2hr,用于餐具和小手 术刀剪的消毒,第十一页，共六十五页。,高压蒸汽灭菌法,医学上最常用、最有效的灭菌方法，灭菌温度取决于蒸汽压力。利用高压蒸锅，在103.4kPa蒸汽下，温度达121.3维持15-20min，杀死包括芽胞在内的所有微生物。用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌,第十二页，共六十五页。,流通蒸汽消毒法：利用100 水蒸汽，经15-30min 杀死繁殖体，不能将芽胞全杀死,间歇蒸汽灭菌法：反复屡次流通蒸汽间歇加热以达 到灭菌目的。适用于不耐高温的 含糖、牛奶等培养基的灭菌,第十三页，共六十五页。,波长200-300nm的紫外线能干扰细菌DNA的复制与转录而杀菌,二辐射杀菌法,1.紫外线,穿透力较弱，常用于空气及物品外表消毒 损伤人体皮肤黏膜，注意自我防护 DNA损伤的修复,第十四页，共六十五页。,2.电离辐射,包括高速电子、X射线和 射线,有较高的能量和穿透力 干扰DNA合成，破坏细胞膜,大量一次性医用塑料制品 食品、药品、生物制品,第十五页，共六十五页。,利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或空气中的细菌 主要用于血清、毒素、抗生素、酶制剂等不耐热的液体及空气等的灭菌,三滤过除菌法,第十六页，共六十五页。,1.滤菌器,硝基纤维素膜制成，孔径0.1-0.45m,滤膜滤器 玻璃滤器 Seitz滤器,玻璃细砂压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中,金属制成，中间嵌石棉滤板,第十七页，共六十五页。,2.影响过滤的因素,介质类型 细菌种类 细菌数量 使用压力、过滤时间、室温等,第十八页，共六十五页。,3.生物洁净技术HEPA,初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去0.5-5m的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气 生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无菌护理室，无菌手术间等,第十九页，共六十五页。,低温状态下真空抽去水分 主要用于菌种保藏 可存数年到数十年,四枯燥与低温抑菌法,冷冻真空枯燥法,第二十页，共六十五页。,一杀菌机制,使菌体蛋白凝固变性 改变细胞膜通透性，使胞内含物逸出 干扰细菌的酶系统及代谢,如酚类、醇类、酸碱类等,如外表活性剂、脂溶剂等,如重金属类、某些氧化剂等,三、化学消毒灭菌法,第二十一页，共六十五页。,二常用消毒剂种类,1.醇类,除去细胞膜中脂质，使菌体蛋白变性 乙醇、异丙醇,2.酚类,低浓度破坏细胞膜，高浓度凝固菌体蛋白 石碳酸、来苏、氯已定等,第二十二页，共六十五页。,3.重金属类,使菌体蛋白变性或沉淀；灭活细菌酶蛋白 红汞、硫柳汞、硝酸银等,4.氧化剂,依靠氧化作用灭活细菌酶蛋白 过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾、卤素等,第二十三页，共六十五页。,5.外表活性剂,降低液体外表张力，乳化油脂，发挥清洁作用 改变胞壁通透性，使胞内容物溢出，呈现灭菌作用 苯扎溴安、度米芬等,6.烷化剂,灭活细菌酶蛋白 甲烷、戊二醛、环氧乙烷等,第二十四页，共六十五页。,三按杀菌能力分类,高效消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂,用于进体内的物品，包括氧化剂、醛类、环氧乙烷等,用于进入腔道的器材，包括含碘消毒剂、醇类等,用于体表及外环境，包括外表活性剂、高锰酸钾等,第二十五页，共六十五页。,四消毒剂的应用,第二十六页，共六十五页。,1.医疗器械物品的消毒灭菌,第二十七页，共六十五页。,2.室内空气消毒灭菌,紫外线照射，滤过除菌 过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯喷雾或熏蒸 中草药艾叶烟熏,3.手和皮肤消毒,肥皂和流动水正确洗手 75%乙醇，0.05%氯已定、过氧乙酸水溶液等,第二十八页，共六十五页。,4.粘膜消毒,口腔黏膜可用3%过氧化氢 尿道、阴道冲洗可用0.05%氯已定，1g/L高锰酸钾,5.排泄物及分泌物消毒,50g/L有效氯的次氯酸钠、漂白粉等作用1h 等量200g/L漂白粉搅拌混匀作用2h,第二十九页，共六十五页。,五影响消毒剂作用的因素,消毒剂,细菌,环境,种类,浓度,作用时间,数量,种类,有机物,温度,酸硷度,第三十页，共六十五页。,第三章 噬菌体（Bacteriophage）,第三十一页，共六十五页。,感染细菌等微生物的病毒，具有严格的宿主特异性，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。,据其感染微生物的后果分为：毒性噬菌体和温和噬菌体,第三十二页，共六十五页。,本章重点与难点,1.掌握噬菌体、毒性/温和噬菌体的概念2.掌握温和噬菌体与宿主菌的关系及其在细菌遗传物质转移中的意义 3.掌握毒性噬菌体的生活周期4.熟悉噬菌体的生物学特性及噬菌体的应用,第三十三页，共六十五页。,第一节 噬菌体的生物学性状,形态结构 化学组成 抗原性 抵抗力,第三十四页，共六十五页。,1、形态与结构,个体微小，nm为测量单位，EM下可见有蝌蚪形、微球形和细杆形,第三十五页，共六十五页。,头部六棱柱体,尾部管状器官,第三十六页，共六十五页。,2、化学组成,位于头部中央DNA或RNA噬菌体的遗传物质,核酸,蛋白质,构成头部外壳及尾部保护核酸决定噬菌体的表型特征,第三十七页，共六十五页。,3、抗原性,具有抗原性，能刺激机体产生抗体 抗体能阻止相应噬菌体侵袭敏感菌 主要表现在阻断吸附,4、抵抗力,比一般细菌繁殖体强,第三十八页，共六十五页。,第二节 毒性噬菌体,一、毒性噬菌体Virulent phage,能在敏感宿主菌内大量增殖并使之裂解的噬菌体,二、溶菌周期,吸附 穿入生物合成成熟与释放,基因的复制 蛋白质的合成,第三十九页，共六十五页。,Adsorption吸附,第四十页，共六十五页。,Penetration穿入,第四十一页，共六十五页。,Biological Synthesis 生物合成,第四十二页，共六十五页。,Maturation and Release 成熟和释放,第四十三页，共六十五页。,Lytic cycle,第四十四页，共六十五页。,三、噬菌现象,液体培养基浑浊变澄清,固 体 培养基噬 菌 斑,第四十五页，共六十五页。,噬菌体基因整合于宿主菌基因组中，并随其染色体复制而复制，随菌分裂而分裂。具有溶原周期及溶菌周期。,一、溶原性噬菌体Lysogenic phage,第三节 温和噬菌体,第四十六页，共六十五页。,Adsorption吸附,第四十七页，共六十五页。,Penetration穿入,第四十八页，共六十五页。,Integration整合,第四十九页，共六十五页。,Lysogenic cycle,第五十页，共六十五页。,二、前噬菌体prophage,整和在细菌基因组中的噬菌体基因组,三、溶原性细菌lysogenic bacterium,带有前噬菌体基因组的细菌,第五十一页，共六十五页。,溶原性转换示意图,-棒状杆菌噬菌体,无毒白喉棒状杆菌,有毒白喉棒状杆菌,第五十二页，共六十五页。,Induction,第五十三页，共六十五页。,Replication,第五十四页，共六十五页。,Maturation and Release,第五十五页，共六十五页。,具有感染性的噬菌体颗粒 宿主细胞内类似质粒形式的噬菌体核酸 前噬菌体,四、溶原性噬菌体的存在状态,第五十六页，共六十五页。,第五十七页，共六十五页。,细菌的鉴定与分型 检测标本中的未知菌 基因工程的工具 用于细菌性感染的治疗,第四节 噬菌体的应用,第五十八页，共六十五页。,小 结,消毒灭菌的常用术语；常用物理消毒灭菌法的作用机制及适用范围；化学消毒灭菌法；影响化学消毒剂作用效果的因素；消毒灭菌的运用；噬菌体的生物学性状；毒性噬菌体与温和噬菌体；噬菌体的应用,第五十九页，共六十五页。,思考题,1、试述常用物理灭菌法的作用机制及适用范围2、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素3、什么是噬菌体？简述噬菌体的生物学特性4、试述噬菌体与宿主菌的关系5、思考噬菌体在细菌遗传变异中的意义,第六十页，共六十五页。,中英文关键词,灭菌 sterilization 消毒 disinfection防腐 antisepsis 无菌 asepsis消毒剂 disinfectant高压蒸汽灭菌器 autoclave高压蒸汽灭菌法 sterilization by pressured steam 噬菌体 Bacteriophage毒性噬菌体 virulent phage 溶原性噬菌体 lysogenic phage前噬菌体 prophage 溶原性转换 lysogenic conversion 溶原性细菌 lysogenic bacterium 噬 斑 plaque,第六十一页，共六十五页。,参 考 文 献,1 Brooks GF，Brutel JS，Morse SA.Jawetz，Melnick 9(4):737-65.,第六十二页，共六十五页。,预 习,细菌的遗传与变异,第六十三页，共六十五页。,Thanks,第六十四页，共六十五页。,内容总结,内容。杀死物体上病原微生物,不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应。杀死繁殖体，不能将芽胞全杀死。间歇蒸汽灭菌法：反复屡次流通蒸汽间歇加热以达。玻璃细砂压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中。的宿主特异性，也是赋予宿主菌生物学性。尾部管状器官。吸附 穿入生物合成成熟与释放。液体培养基浑浊变澄清。具有溶原周期及溶菌周期。整和在细菌基因组中的噬菌体基因组。Thanks,第六十五页，共六十五页。,