2022年医学专题—细菌感染的检查方法与法治原则.ppt

支 原 体、衣 原 体、立 克 次 体,主讲(zhjing)老师：江振友,第一页，共六十五页。,支原体属和脲原体属,第二页，共六十五页。,支原体（Mycoplasma）,1.能在人工培养基中生长 2.能独立生活(shnghu)3.最小原核细胞型微生物 4.无细胞壁 5.二分裂繁殖 6.多形态性,“油煎蛋样”菌落,第三页，共六十五页。,分 类,柔膜体纲(Mollicutes)支原体目(MycoPlasmatales)下分3个科：支原体科（MycoPlasmataceae）；2个属:支原体（Mycoplasma）脲原体（Ureaplasma）无胆甾原体科（Acholeplasma-taceae），生长时不需要(xyo)外源性胆固醇；螺原体科（Spiroplasmataceae），生长至一定阶段呈螺形。,第四页，共六十五页。,人体分离:20种，其中8种是致病或条件致病菌:肺炎(fiyn)支原体(M.pneumoniae,Mpn)生殖支原体(M.geuitalium,Mg)人型支原体(M.hominis,Mh)发酵支原体(M.fermentants,Mf)穿透支原体(M.penetrans,Mpe)梨支原体(M.pirum,Mpi)关节炎支原体(M.arthritidis,Mart)解脲脲原体(U.urealyticum,Uu),第五页，共六十五页。,支原体与细菌(xjn)L型比较,第六页，共六十五页。,肺炎支原体,形态与结构(jigu)大 小:可通过滤器,光镜下可观察细胞壁:无形 态:球形、球杆形、分枝丝状或念珠状等细胞膜:三层:1.蛋白质 2.脂质(胆固醇较多)3.蛋白质染 色:姬姆萨染色法:淡紫色或蓝色核 酸:二种(DNA和 RNA),第七页，共六十五页。,第八页，共六十五页。,第九页，共六十五页。,生长(shngzhng)繁殖,繁殖方式:二分裂方式 球体延伸、分节断裂(dun li)、出芽、分枝繁殖周期:3小时营养要求:较高,含动物血清、酵母浸液酸 碱 度:pH7.880气体环境:5CO2或5CO2与95N2温度与时间:37,3d10d菌落特征:“油煎蛋”状菌落,第十页，共六十五页。,第十一页，共六十五页。,表252支原体与脲原体的某些(mu xi)生物学特性,第十二页，共六十五页。,抗原(kngyun)构造,主要抗原(kngyun)成分:1.蛋白质 P1蛋白抗原:表面抗原 致病:粘附 2.脂质中的糖脂 抗体:产生补体结合抗体 生长抑制抗体 代谢抑制抗体,第十三页，共六十五页。,抵抗力,理化因素:比细菌敏感(mngn)(因无细胞壁)热:弱,50经30min死亡 20可长期保存耐碱酸和有机溶剂:较敏感(消毒剂、清洁剂)四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素:敏感 青霉素:不敏感,第十四页，共六十五页。,致病性,外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎(yn yn)、气管炎支原体性肺炎（Mycoplasmal pneumonia）(原发性非典型肺炎)（primary atypical pneumonia）临床表现和胸部X线:肺炎链球菌引起的典型肺炎不同 类似病毒性肺炎,第十五页，共六十五页。,世界各地,密集人群,儿童及青少年多见秋冬季发病率高,每隔35年出现一次流行飞沫传播潜伏期2W3W,感染起病缓慢临床主要症状:发热（约39）、头痛、持续性顽固咳嗽、胸痛等。病人(bngrn)带菌、排菌状态可持续6W8W肺外合并症（神经系统、消化系统及心脏等）发病率高，严重者可致死致病性:粘附是先决条件 也和超敏反应有关(共同抗原),第十六页，共六十五页。,免疫性,抗体：多种(CF抗体、生长抑制抗体、杀支原体抗体等)呼吸道sIgA:有一定作用非特异冷凝集素:1.和自身(zshn)免疫有关 2.患者阳性率为50，常用于辅助诊断。,第十七页，共六十五页。,微生物学(wi shn w xu)检查法,病原分离特异核酸的检测血清学诊断抗原(kngyun)检测冷凝集试验,第十八页，共六十五页。,病原(bngyun)分离,标 本：咽拭子或痰液培养基：双相培养基（含马血清、酵母浸液）SP-4培养基（提高分离率3040）气体环境：510CO2温度与时间：37，l2W可疑菌落：1.糖发酵 2.溶血性 3.血细胞吸附(xf)4.特异抗血清生长抑制试验等,第十九页，共六十五页。,特异(ty)核酸的检测,（1）聚合酶链反应(PCR)：优点：特异性好 敏感性高 快速、简便 靶基因：16S RNA基因 P1蛋白基因 方法：套式PCR(nPCR)复合PCR 限制性片段长度多态性分析(RFLP)随机引物PCR(RAPD)（2）基因探针 根据碱基严格互补配对的特性 特异性强，敏感性不如(br)PCR技术,第二十页，共六十五页。,血清学诊断(zhndun),（1）补体结合试验（CFT）：双份抗体效价升高4倍以上诊断（2）间接血凝试验（IHA）：测抗体,23周高峰(gofng)（3）酶联免疫吸附试验(ELISA)：测IgM、IgG和IgA 敏感性高（4）间接免疫荧光试验：检测IgM、IgG 特异性较强,第二十一页，共六十五页。,抗原(kngyun)检测,方法1:间接法或直接法 抗体:荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体 检测标本:呼吸道分泌物中抗原 86%可阳性 方法2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验 检测标本:呼吸道分泌物中抗原 可检出105 CFU/ml 方法3:酶联免疫吸附试验捕获(bhu)法 抗体:抗P1单克隆抗体 检测标本:P1蛋白 可检出104CFU/ml 特异性强,3小时即可,第二十二页，共六十五页。,冷凝(lngnng)集试验,辅助诊断(zhndun)非典型肺炎针对红细胞膜抗原冷凝集素属IgM 5d10d出现，2W3W高峰辅助诊断效价:64128倍以上 双份效价升高4倍以上特异性和敏感性较低,第二十三页，共六十五页。,防 冶,药物:四环素类(近年来耐药性增加)大环内酯类:首选(shu xun)(红霉素、克拉霉素、阿奇霉素)喹诺酮类疫苗:减毒活疫苗 基因工程疫苗,第二十四页，共六十五页。,其它(qt)支原体,寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜属于正常菌群,引起条件性感染口腔支原体:慢性(mn xng)呼吸道感染唾液支原体:齿槽溢脓生殖支原体:生殖道、呼吸道和关节腔的炎症,流产、早产和新生儿肺炎发酵支原体:类风湿性关节炎 AIDS相关(分离率明显升高)人型支原体:渗出性咽炎、非淋菌性尿道炎(nongonococcal urithritis,NGU),卵巢脓肿、产褥败血症,第二十五页，共六十五页。,脲原体属(Ureaplasma),从支原体分出的独立的新属 正常(zhngchng)菌群:绝大多数 有致病性:解脲脲原体（U.urealyticum,Uu)1954年从NGU患者的病灶处分离 类似肺炎支原体 能水解尿素,第二十六页，共六十五页。,生物学性状(xngzhung),形态:圆形或球杆状染色:革兰染色阴性温度和酸碱度:37,pH 6.0菌落:很小(15m60m,放大200倍),称T株（Tiny colony strain）敏感性:敏感:四环素、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、0.05%醋酸铊、125g/ml 5-碘-2脱氧尿苷 不敏感:青霉素生化(shn hu)特性:水解尿素产氨,第二十七页，共六十五页。,第二十八页，共六十五页。,致病性,存 在:人和动物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原体(Uu)有14个血清型传播途径:性接触传播、母婴传播所致疾病(jbng)(STD)泌尿生殖道感染:NGU、盆腔感染、宫颈 炎、阴道炎、输卵管炎、慢性前列腺 炎、附睾炎、男女不孕症、反复流产、早产、死胎 新生儿疾病:呼吸道病变、肺炎、脑膜炎,第二十九页，共六十五页。,引起男性不孕的原因：Uu吸附于精子表面，使其运动受阻，并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 Uu产生神经氨酸样物质，干扰(gnro)精子与卵细胞结合。Uu与精子膜有共同抗原，从而产生抗精子抗体,第三十页，共六十五页。,立克次体(l k c t)属和巴尔通体属,第三十一页，共六十五页。,立克次体(l k c t)属,立克次体特征：比细菌小,能通过滤器,光镜可见 以节肢动物为传播媒介,有储存宿主 专性细胞内寄生(胞浆内),原核细胞微生物 二分裂繁殖 有两种核酸(h sun)(DNA和RNA)，酶系统不完整 多数人畜共患 对抗生素敏感所致疾病:发热出疹性疾病对人致病的:立克次体属 东方次体属 埃立克体属 柯克斯体属,第三十二页，共六十五页。,立克次体(l k c t)分类及其致病情况见表26-1,第三十三页，共六十五页。,生物学性状(xngzhung),大小:(0.3m-0.6m)(0.8m-2.0m)形态:类似球杆菌,多形性(球形、哑铃形、长杆状或丝状等)染色:Giemsa染色法:紫色或蓝色 马氏染色法(Macchiavello stain):红色排列:散在于细胞浆中、核旁成堆(斑点热立克次体在胞浆或核内)培养:专性细胞内(活细胞内)寄生培养方法:鸡胚卵黄囊内接种 组织(zzh)细胞培养 动物接种,第三十四页，共六十五页。,抵抗力:热、消毒剂:较弱(56,数分钟,0.5%石碳酸、0.5%来苏,75%酒精中数分钟)抗生素:敏 感:氯霉素和四环素 不敏感:磺胺类 低温、干燥:较强(-20或冷冻干燥半年以上)抗原构造：群特异性抗原,种特异性外膜抗原外斐反应(Weil-Felix reaction):斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X菌株有共同的耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量非特异凝集反应（交叉凝集反应），以检测人或动物血清中的相应抗体。协助诊断(zhndun)斑疹伤寒,恙虫病,滴度超过1:160有意义.,第三十五页，共六十五页。,致病性,传播方式：普氏立克次体：头虱(tu sh)和体虱（肠上皮细胞）人是唯一宿主 斑点热立克次体：第一宿主是蜱（唾液腺）第二宿主是啮齿类动物,第三十六页，共六十五页。,致病机理 过程:侵入-小血管内皮细胞中繁殖-破坏细胞-细胞肿胀、浸润、堵塞血管腔形成血栓-皮肤:斑疹-实质器官:相应(xingyng)临床表现 毒性物质:内毒素 磷脂酶A,第三十七页，共六十五页。,所致疾病1.流行性斑疹伤寒(epidimic typhus)不属于人畜共患病 病原体:普氏立克次体(R.prowazekii)媒介:人虱 宿主:人 季节:冬春季 症状:521d潜伏期-高热、头痛、肌肉痛等-45d:皮疹-神经、心血管和其他器官 病后免疫(miny):持久,与地方性斑疹伤寒有 交叉免疫,第三十八页，共六十五页。,2.地方性斑疹伤寒(bn zhn shn hn)(endemic typhus)(鼠型斑疹伤寒),属于人畜共患病病原体:斑疹伤寒立克次体(R.typhus)宿主:鼠为天然贮存(zhcn)宿主传播方式:鼠蚤或虱-鼠间-人-人虱-人疾病:较轻，缓慢，持续时间短，很少 侵害中枢神经系统病后免疫:持久，并与流行性斑疹伤寒 有交叉免疫,第三十九页，共六十五页。,3.恙虫(yn chn)病(scrub typhus),病原体:恙虫病东方次体(O.tsutsuganushi)传播:寄生于恙螨体内，可经卵传代。人若进入恙螨的孳生地，可能受感染(亦称“丛林热”)症状:1014d潜伏期-突然高热，被叮咬处:发红,丘疹,水疱,溃疡，周围红晕，上有黑色痂皮，称为焦痂(特征)。附近的淋巴结肿大，皮疹。治疗(zhlio)拖延肺炎、脑炎、DIC。,第四十页，共六十五页。,微生物学(wi shn w xu)检查法,(一)血清学诊断 1.外斐反应(非特异性)诊断:立克次体和东方次体 效价在1：160以上，或病程(bngchng)中效价增长 2.补体结合(CF)反应(特异性)所用抗原:可溶性抗原(群特异抗原)洗涤过的颗粒抗原(种特异抗原)诊断:斑疹伤寒群、斑点热群、恙虫病、Q热(二)立克次体分离鉴定 动物:小鼠(恙虫病)雄性豚鼠(斑疹伤寒),第四十一页，共六十五页。,防治(fngzh)原则,1.灭虱、灭蚤、灭鼠(mi sh)2.改进环境、个