第三章蛋白质的通性、纯化(chúnhuà)与表征1、蛋白质的理化性质：酸碱性质、胶体性质与沉淀、变性、颜色反应2、分离纯化的方法：盐析、电泳、等电聚焦、层析等3、表征(biǎozhēn)ɡ：活力、比活力第一页，共三十一页。蛋白质与多肽一样，能够发生两性离解，也有等电点。在等电点时，蛋白质的溶解度最小，在电场中不移动。在不同的pH环境下，蛋白质的电学性质不同。在等电点偏酸性溶液中，蛋白质粒子带正电荷，在电场中向负极移动；在等电点偏碱性溶液中，蛋白质粒子带负电荷，在电场中向正极移动。这种现象称为(chēnwéi)ɡ蛋白质电泳1、酸碱性质(xìngzhì)第二页，共三十一页。阳离子PH
PI兼性离子PH=PI可解离(jiělí)基团有末端和侧链故pI与酸性、碱性氨基酸的数目有关如胃蛋白酶酸性氨基酸多，等电点偏酸性有些球蛋白的可解离基团只有变性后才能完全滴定没有(méiyǒu)盐类干扰时的等电点叫等离子点第三页，共三十一页。蛋白质分子的颗粒直径已达1-100nm，处于胶体(jiāotǐ)颗粒的范围。因此，蛋白质具有亲水溶胶的性质。由于胶体溶液中的蛋白质不能通过半透膜，因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去。22、蛋白质的胶体、蛋白质的胶体(jiāotǐ)(jiāotǐ)性质：性质：第四页，共三十一页。蛋白质的胶体(jiāotǐ)性质布郎运动、丁道尔现象、电泳现象，不能透过半透膜，具有(jùyǒu)吸附能力蛋白质溶液稳定的原因：1）表面形成水膜（水化层）；2）带相同电荷(diànhè)。3)大小为1-100nm的胶体颗粒++++++第五页，共三十一页。蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量大小、所带的电荷和水化作用有关。改变溶液的条件(tiáojiàn)，将影响蛋白质的溶解性质在适当的条件下，蛋白质能够从溶液中沉淀出来。蛋白质的沉淀蛋白质的沉淀(chéndiàn)(chéndiàn)作用作用第六页，共三十一页。1.加高浓度盐类（盐析）：加盐使蛋白质沉淀析出。2.分段(fēnduàn)盐析：调节盐浓度，可使混合蛋白质溶液中的几种蛋白质分段(fēnduàn)析出。血清球蛋白（50%(NH4)2SO4饱和度），清蛋白（饱和(NH4)2SO4)。2.加有机溶剂3.加重金属盐4.加生物碱试剂单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀生物碱，称生物碱试剂。第七页，共三十一页。在温和条件下，通过改变溶液的pH或电荷状况(zhuàngkuàng)，使蛋白质从胶体溶液中沉淀分离。在沉淀过程中，结构和性质都没有发生变化，在适当的条件下，可以重新溶解形成溶液，所以这种沉淀又称为非变...
