2022年医学专题—病原性球菌及杆菌.ppt

病原(bngyun)性球菌与肠道杆菌,一、实验目的1.掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。2.熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。3.了解三种葡萄球菌产生的色素。4.了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性。5.了解大肠(dchng)埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SS平板上菌落特点。,第一页，共二十一页。,二、实验内容1.示教观察葡萄球菌、链球菌的形态2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵3.化脓性球菌的鉴定 三种葡萄球菌的色素观察 甲、乙型链球菌的溶血现象观察4.甘露醇发酵实验5.血浆(xujing)凝固酶实验,第二页，共二十一页。,1.葡萄球菌(p to qi jn)、链球菌的培养物,普通琼脂平板 血平板 菌落形状 色素 溶血性 金葡 圆形凸起光滑中等大小(dxio)金黄色+柠葡 同上 柠檬色-白葡 同上 白色-,表1,第三页，共二十一页。,第四页，共二十一页。,葡萄球菌(p to qi jn)分类,按照(nzho)色素不同,金黄色葡萄球菌(p to qi jn)（金黄色）,表皮葡萄球菌（白色）,腐生葡萄球菌（柠檬色）,第五页，共二十一页。,三种葡萄球菌的主要(zhyo)性状,第六页，共二十一页。,第七页，共二十一页。,血平板甲型链球菌 针尖小菌落(jnlu)、草绿色狭窄溶血环(溶血即不完全溶血）乙型链球菌 针尖小菌落、透明宽大溶血环（溶血即完全溶血）,巧克力血平板(pngbn)脑膜炎双球菌 菌落透明似露滴状,表2,表3,第八页，共二十一页。,草绿色链球菌,不溶血(rn xu)链球菌,溶血性链球菌,多为条件(tiojin)致病菌,致病力强,无致病性,溶血(rn xu)(狭窄草绿色溶血环),溶血（宽大透明溶血环）,第九页，共二十一页。,乙型溶血性链球菌,溶血(rn xu)环,第十页，共二十一页。,大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成(xngchng)相对较大，不透明，红色的菌落。,伤寒杆菌在SS培养基上形成相对较小，半透明，无色或淡黄色的菌落，产生硫化氢的细菌菌落中心(zhngxn)呈黑色。痢疾杆菌在SS培养基上形成的菌落与伤寒杆菌菌落相似。,SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生(chnshng)碱性物质，故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。,第十一页，共二十一页。,大肠杆菌(d chn n jn),痢疾杆菌,第十二页，共二十一页。,第十三页，共二十一页。,双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。指示剂为酚红。葡萄糖与乳糖的比例为1:10。若细菌分葡萄糖、乳糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色(hungs)，且有气泡。（大肠杆菌)若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。（伤寒杆菌、痢疾杆菌）若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。（伤寒杆菌）配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。,第十四页，共二十一页。,Salmonella-Shigella Mediun,主要成分(chng fn)基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂,分解(fnji)乳糖,不分解(fnji)乳糖,产酸,PH,指示剂变红色,红色大菌落,大肠杆菌等,无明显变化,无色半透明小菌落,志贺菌等,第十五页，共二十一页。,第十六页，共二十一页。,甘露醇发酵(f jio)试验（示教）,分别取金葡、白葡菌落接种(jizhng)到甘露醇发酵培养基中，置 37培养箱，培养24h。金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。,第十七页，共二十一页。,血浆凝固(nngg)酶试验-玻片法,（操作(cozu)，1人/组）,原理(yunl)：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）,方法：,兔血浆 兔血浆,1,2,金葡 白葡,+,凝集颗粒（+）,不凝集（-）,第十八页，共二十一页。,4、血浆(xujing)凝固酶试验（试管法）,金葡菌 白葡菌+兔血浆 兔血浆 3730水浴(shu y)观察,凝集为阳性(yngxng)（胶冻样凝 固状态）,不凝集为阴性,第十九页，共二十一页。,凝固(nngg)酶实验（试管法）,第二十页，共二十一页。,内容(nirng)总结,病原性球菌与肠道杆菌。5.了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SS平板上菌落特点。2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵(f jio)。大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。痢疾杆菌在SS培养基上形成的菌落与伤寒杆菌菌落相似。SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长。双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁,第二十一页，共二十一页。,