2022年医学专题—尿液分析检查标准化简介.ppt

尿液分析(fnx)检查标准化广州医学院 许建邦,第一页，共六十五页。,尿液分析（Urinalysis）是尿液（Urina）和分析（Analysis）二词组合，相当于我国沿用的尿常规（Urine Routine）检验。尿液分析对泌尿系、消化系、心血管、内分泌等多种疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察，预后估计；对人群健康保健均有重要价值。更因标本易得、检测简便，结果客观而成为临床使用最广泛(gungfn)的检验项目之一。,第二页，共六十五页。,由于尿液成份复杂，易受污染，放置时间过长后受理化因素影响而使检查结果发生改变，加上缺乏统一标准要求和检查方法不一致，导致同一份标本在不同实验室或同一实验室不同操作者检查得出截然不同的结果。因此，按照(nzho)标准化要求实施规范化操作是当前实验室首要解决的问题。,第三页，共六十五页。,1995年，NCCLS（美国临床检验标准委员会）颁布了尿液分析和尿液样本的收集，运输及储存；批准指南(zhnn)文件GP16-A，对尿液分析作出全面的指导。,第四页，共六十五页。,1999年，NCCLS和CCCLS（中国临床检验标准分委会）正式(zhngsh)同意在临床实验的标准化与一致性方面进行合作，标志着我国检验医学已与国际接轨，逐步走上规范化，法制化管理的轨道。,第五页，共六十五页。,2002年1月在广州召开中华医学检验分会“血液学和体液学专家委员会”全体委员会议上，经过认真讨论，一致通过由丛玉隆教授起草(q co)的尿沉渣检查标准化的建议文件。并建议全国检验界参考此文件规范实验室的操作。,第六页，共六十五页。,尿液分析(fnx)包括理学、化学、显微镜检查三个组成部份。下面，以NCCLS Literatrue GP16-A和尿沉渣检查标准化的建议为基础，参考JCCLS GP1P3文件、ECCLS提出尿沉渣检查的相关文件和国内、外有关文献，结合在实验室中按标准化的要求实施尿液分析规范化操作方面谈谈个人的意见，供同道们参考。,第七页，共六十五页。,一、标本收集(shuj)与运送,1、标本收集(shuj)1.1 实验室工作人员、医护人员必需要对病人留尿进行指导，务必使尿道口保持清洁。,第八页，共六十五页。,清晨天然中段尿 随机尿 时段尿（起点和终点，起始时 先排空(pi kn)膀胱的贮尿）双份尿 导管尿 穿刺尿,1.2 在不同时间和方式(fngsh)收集尿液：,第九页，共六十五页。,1.3 尿量3050ml。1.4 送检单上应注明(zh mn)留尿时间、送检时间。须说明近期是否给服用对尿液分析有影响的药物和其它物质。,第十页，共六十五页。,2、标本(biobn)运送,2.1 尿液留取后尽快送实验室、并应在2小时内完成检验。2.2 如留尿后2小时内无法完成分析，可置2-8冰箱冷藏，6小时内完成检验。2.3 如仅作尿沉渣检查(jinch)，需加40%甲醛0.5%1.0%防腐（应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物，干扰显微镜检查(jinch)）。,第十一页，共六十五页。,3、标本(biobn)标记,病人姓名 特定编码（住院病人的病区、床号）采集(cij)时间。,标本必须有标记，并贴于容器(rngq)上，不可贴在盖上。,第十二页，共六十五页。,4、标本(biobn)接收,标本容器是否符合要求标记内容与医生所填写化验单是否一致留尿到接收标本时间是否过长标本是否被污染尿量不少于30ml特殊病例(bngl)不能达到此要求时（如小儿、烧伤，肾衰无尿期等）应在报告单上注明收到尿量及检查方法（离心/未离心）。,实验室应建立严格的标本接收(jishu)制度，工作人员在接收(jishu)标本时，必须检查：,第十三页，共六十五页。,二、材料(cilio)及设备,洁净、防漏、防渗，一次性使用 容积应50ml 园形开口的直径4cm 具有较宽的底部 尽可能使用具有安全、易于开启的 密封(mfng)装置。,1、收集标本(biobn)的容器 2.1 收集和运送尿液的容器应由不与尿液成份发生反应的惰性材料制成，应具备以下条件：,第十四页，共六十五页。,2.2 离心管,洁净，透明有足够硬度的塑料管/玻璃 管（最好是不易破碎的一次性管）有体积刻度（刻度应至少标明10ml、5ml、1ml、0.2ml）确保容积标准化 试管(shgun)底部呈锥形/缩窄形，以浓集沉淀 物 有盖，以减少因尿液溅出/离心形成气 雾的危险 无化学干扰物。注：不推荐重复使用离心管。,适用于尿离心的试管(shgun)应具备下列特点：,第十五页，共六十五页。,2.3 离心机,水平式离心机 有盖，当转子旋转时具备锁 盖子的功能 离心(lxn)时，机内温度1525 离心机相对离心力（RCF）约400G左右,作尿沉渣时，应使用(shyng)具下列特征的离心机：,第十六页，共六十五页。,公式：RCF=1.11810-5RN2RCF：相对(xingdu)离心力（用G表示）R：半径，单位：cm（从离心机轴中央到试管底部的距离）N：每分钟转数,第十七页，共六十五页。,2.4 尿沉渣计数(j sh)板,尿沉渣的量和压（涂）片厚度是标准化重要环节，在普通玻片上随意滴加沉渣液加盖玻片，或不加(b ji)盖玻片，都不能提供标准化的结果。建议使用标准化的沉渣计数板。,第十八页，共六十五页。,2.5 显微镜,双目镜筒 内置光源(gungyun)机械载物台，使玻片易于平稳移动 基本的物镜组（10X和40X）及目 镜组（10X/12.5X）如使用多台显微镜时，应用相同的 物镜或目镜。,在尿分析实验室，应使用(shyng)具有下列特点的高质量显微镜：,第十九页，共六十五页。,2.6 有条件(tiojin)的实验室，可配置多种类型显微镜（如：位相差显微镜、偏振光显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜等）。,第二十页，共六十五页。,2.7 自动化设备(shbi),有条件的实验室可使用各类自动(zdng)，半自动(zdng)的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析，或用作过筛，但此类仪器必须经权威机构认可。,第二十一页，共六十五页。,2.8 计算机处理(chl)系统,有条件的单位，可用带计算机成像系统的显微镜、标准化的沉渣检测系统和相关辅助软件来自动(zdng)处理结果。但检查方法和尿沉渣结果报告方法必须标准化。,第二十二页，共六十五页。,2.9 试纸条(zh tio)判读器,干化学试剂带结果，可用两种方法判读：2.9.1 目测法 将反应的试剂带与不同颜色强度的模块标准图比较而确定。2.9.2 仪器判读法 用反射(fnsh)光度计检测试条块表面反射(fnsh)的光量。仪器可检测试条块反应的强度，并消除由反应时间和颜色判读所引起的差异,第二十三页，共六十五页。,阅读并按照操作手册的要求进行操作建立并遵守(znshu)执行保养计划保持仪器清洁需按仪器厂商的手册中推荐方案进行校准。,使用这些仪器必须(bx)按下列要求进行：,第二十四页，共六十五页。,三、检查(jinch)方法,1、外观/物理学分析 1.1 颜色 正常尿液应为黄色和琥珀色。病理尿色应围绕红色、黄色、绿色、棕色、乳白色报告1.2 浊度(zhu d)（透明度）正常混匀尿应透明。其浊度可用透明、雾状、云雾状、浑浊报告。1.3 气味 必要时应报告。,第二十五页，共六十五页。,1.4 比重(bzhng)（SG）,建议用折射仪法作为参考方法。（当尿液含X光线反差介质、葡萄糖、蛋白时可使结果增高(znggo)，应予校正。pro 1G/dl时SG增高0.003,Glu 1G/dl SG增高0.004）。,第二十六页，共六十五页。,干化学试剂带法是利用SG与离子浓度呈正比原理作SG的估计，尿碱性标本会影响指示剂系统，中量蛋白100750mg/dl也会增加(zngji)SG，因此，不能作为检测和诊断肾功能的指标，更不宜用于新生儿SG测定。非离子性物质不影响检查结果。,第二十七页，共六十五页。,尿比重计法用置换(zhhun)法测定SG，装置，操作、标准化方面存在不少问题，不是尿比重测定方法。（也有用渗透压计和谐波振荡进行SG测定）。,第二十八页，共六十五页。,2、化学分析(huxu fnx),湿化学分析至少应包括糖和蛋白两项。尿糖可用葡萄糖氧化酶法，条件较差者也可用班氏法：尿蛋白可用磺基水杨酸法或加热加酸法。干化学分析是用尿“浸渍条”进行，是一种简单快速(kui s)，对尿半定量的检测方法。由于生产尿分析仪和使用的试剂带厂商繁多，各厂对量级标准不一致，造成医院间、医院内测定结果差异很大。,第二十九页，共六十五页。,在使用干化学法分析时应注意下列问题：2.1 标本必须新鲜，要求在采样(ci yn)后2小时内完成。2.2 使用仪器与试剂带应配套，若使用不同厂商生产的试剂带，必须经严格对照，确定无显著 性差异时方可代用。,第三十页，共六十五页。,试剂条贮放于原装容器内，短暂暴露于直射光和室内温度都会使试剂条产生错误的结果。参照厂商规定，要避光、防潮、干燥，并在一定温度条件下妥善(tushn)保存。使用时一次只取出所需要的试剂带，并立即盖紧，多余的试剂带不可再放回容器中。不要合并各容器内的试剂带。不可触摸试剂带上的化学检测块。,2.3 所用试剂带必须优质稳定，要具备(jbi)“三证”，要求：,第三十一页，共六十五页。,2.4 干化学法与湿化学法对尿液化学成份检测原理(yunl)、灵敏度不同，两者存在一定差异。如：葡萄糖膜块用酶法仅能检测葡萄糖，对乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖均不起反应，而班氏法用还原法原理(yunl)能检测所有的还原糖；。,第三十二页，共六十五页。,蛋白质膜块用指示剂蛋白误差(wch)法原理仅对白蛋白敏感，灵敏度100300mg/L，磺基水杨酸法用生物碱的阴离子与蛋白质的阳离子结合成不溶性蛋白盐沉淀的原理检测白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白等，灵敏度50100mg/L，加热加酸法是通过加热使蛋白质变性凝固，再加酸使蛋白质凝固的原理检测各种蛋白质，灵敏度150mg/L；胆红素膜块检测胆红素的灵敏度为20mg40mg/L，而湿化学法灵敏度为5mg10mg/L。,第三十三页，共六十五页。,2.5 干扰(gnro)干化学法的理化，药物因素很多，常导致假阳性，假阴性结果出现，造成误诊及漏诊，因此，对干化学结果，要结合临床资料进行分析。,第三十四页，共六十五页。,第三十五页，共六十五页。,2.6 关于干化学法检测红细胞、白细胞出现假阳性(yngxng)、假阴性问题。在临床上经常遇到尿干化学法检出BLO、LEU阳性而在显微镜下看不到RBC和WBC（假阳性）或尿干化学法阴性而在显微镜下看到RBC、WBC（假阴性）。统计国内4898例资料，BLO假阳性率为24.2%，假阴性率为30.6%；Leu假阳性率为19.4%，假阴性率为31.2%。,第三十六页，共六十五页。,另外，伊藤机一博士报告3936例尿定性检查阴性而临床上有意义的尿沉渣的观察结果频度：门诊386/1935，频度19.95%；住院(zh yun)674/2001，频度33.68%；总计1060/3936频度为26.93%。其中RBC假阴性为21.1%，WBC假阳性为26.9%。（见下表）,第三十七页，共六十五页。,第三十八页，共六十五页。,究其原因是因为干化学法检测红、白细胞与显微镜检查红、白细胞是采用两种完全不同的原理(yunl)和方法，如BLO是根据尿中RBC、游离Hb含有的亚铁血红素具有过氧化物酶的作用，在供氢（电子）体的情况下能催化供氢体脱氢（氧化）同时使过氧化氢（H2O2）还原为（H2O）。试剂带的供氢体是联苯胺或（4-氯-1苯酚）的本身不含发色基因，故无色，当其脱氢后，分子结构发生改变，出现了发色基因（如：或 醌式结构）而显色的原理进行。,第三十九页，共六十五页。,因此，除了尿中有RBC和尿PH值偏高、低渗环境做成RBC破坏释出游离HB呈现真阳性外，尿中含肌红蛋白，细菌(xjn)过氧化酶污染，易热酶干扰，氧化型清洁剂，次氯酸盐的污染都可导致“假阳性”，当在高蛋白尿，高比重尿，高维生素C（100mg/l），PH5.0，卡普托利，福尔马林，样品