菌群移植对三穗鸭生长性能、屠宰性能和肠道菌群的影响_岳雍.pdf

禽营养NO.06 202324饲料研究 FEED RESEARCH菌群移植对三穗鸭生长性能、屠宰性能和肠道菌群的影响岳雍1，2，3 杨胜林1，2，3*祝永才1，2，3 罗林丽1，2，3（1.贵州大学 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，贵州 贵阳 550025；2.贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室，贵州 贵阳 550025；3.贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025）摘要：试验旨在探究菌群移植早期干预对三穗鸭的生长性能、屠宰性能和肠道菌群的影响。选择120只1日龄的健康三穗鸭，随机分为2组，每组6个重复，每个重复10只鸭，菌群供体选择42日龄的三穗鸭。试验前3 d，对照组鸭饲喂基础日粮，移植组鸭饲喂基础日粮，灌喂0.5 mL菌群液，试验期42 d。结果显示，1542 d时，移植组鸭的成活率显著高于对照组（P0.05）；料重比显著低于对照组（P0.05）。在盲肠菌群门水平丰度方面，移植组鸭的拟杆菌门、变形菌门丰度较对照组分别降低了8.7%（P0.05）、24.4%（P0.05），厚壁菌门、梭杆菌门、放线菌门较对照组提高了11.2%（P0.05）、26.1%（P0.05）、55.5%（P0.05）。研究表明，菌群移植能够提高三穗鸭的生长性能及改变盲肠菌群的丰度水平。关键词：菌群移植；三穗鸭；生长性能；屠宰性能；肠道菌群中图分类号：S 834 文献标识码：A 文章编号：1002-2813（2023）06-0024-04 Doi：10.13557/ki.issn1002-2813.2023.06.006Effect of microbiota transplantation on growth performance，slaughter performance and intestinal flora of Sansui ducksYUE Yong YANG Sheng-lin ZHU Yong-cai LUO Lin-liAbstract:The experiment was to explore the effect of early intervention on growth performance,slaughter performance and intestinal microflora of Sansui ducks.A total of 120 one-day-old healthy Sansui ducks were selected and randomly divided into two groups,with six replicates in each group,10 ducks in each replicate,and 42-day-old Sansui ducks were selected as the bacterial colony donor.Three days before the experiment,the control group ducks were fed with basic diet,ducks in transplantation group were fed with a basal diet and gavage 0.5 mL bacterial community solution.The experiment lasted for 42 d.The results showed that the survival rate of the transplantation group was significantly higher than that of control group at 1542 d(P0.05).The feed to gain ratio was significantly lower than that of control group(P0.05).In the aspect of horizontal abundance of cecal microflora,compared with control group,the abundance of Bacteroides and Proteus in transplantation group decreased by 8.7%(P0.05)and 24.4%(P0.05),respectively,and the abundance of Firmicutes,Fusobacteria and Actinomycetes increased by 11.2%(P0.05),26.1%(P0.05)and 55.5%(P0.05).The study indicates that the transplantation of bacterial flora can improve growth performance and change the abundance level of cecum bacrerial flora of Sansui duck.Key words:microbiota transplantation;Sansui ducks;growth performance;slaughter performance;intestinal flora三穗鸭是贵州省的特色鸭品种，具有抗病力、抗逆性强及耐粗饲等特点，肉质极为细嫩，是我国肉蛋兼用的地方优良麻鸭品种，与北京鸭、绍兴鸭和高邮麻鸭同被誉为“中国地方四大名鸭”。菌群移植是一种直接改变受体肠道菌群的方法。禽肠道内的微生物群落结构十分复杂且数量庞大，肠道微生物作为共生菌群直接影响宿主健康，在促进宿主消化吸收、增强免疫和抵抗病原微生物入侵方面发挥着重要作用，与宿主的机体免疫力和营养代谢水平有直接关第一作者：岳雍，硕士，畜牧师，研究方向为特种经济动物饲养。通信作者：杨胜林，博士，教授，博士生导师。基金项目：国家自然科学基金（项目编号：31960682）收稿日期：2022-05-25禽营养NO.06 202325饲料研究 FEED RESEARCH系1。有研究表明，猪的粪便菌群移植能够促进仔猪的生长发育2；将野兔的盲肠菌液移植至家兔中，能够提高家兔对纤维的消化，改变盲肠微生态环境3；SPF鸡粪便菌群液移植可有效地降低雏鸡肠道菌群的抗药性4。菌群移植对动物肠道微生物群落结构具有一定的调控作用，能够治愈一系列肠道疾病，在畜牧业健康生产中有着重要的作用。因此，本试验将三穗鸭供体粪便制作成菌群液移植到受体鸭，通过16S rRNA第三代测序技术测定三穗鸭盲肠的菌群结构5，探究菌群移植对三穗鸭生长性能、屠宰性能和盲肠菌群的影响，以期为菌群移植调控鸭肠道微生物与宿主的关联性提供参考。1材料与方法1.1试验材料菌群供体取自42 日龄的三穗鸭粪便（不含大肠杆菌、沙门氏菌），将处理后的粪便称取15 g，转移至无菌烧 杯 中 并 添 加 PBS（Na2HPO4/KH2PO4）缓 冲 液 至150 mL，搅拌均匀，2 000 r/min离心5 min，使用纱布过滤3次，得到棕色的菌群接种液。1.2试验设计选择120只1日龄健康、平均体重为58.1 g的三穗鸭（来自贵州三穗县）随机分为2组，每组6个重复，每重复10只鸭。试验前3 d，对照组鸭饲喂基础日粮，移植组鸭饲喂基础日粮，灌胃0.5 mL菌群液，试验期42 d。基础日粮及营养水平参照贵州大学杨胜林教授等制定的三穗鸭饲养日粮标准。基础日粮组成及营养水平见表1。试验阶段采取2层笼养，三穗鸭自由饮水，人工控制光照。鸭进舍第 1 d，保持舍内 37，此后每周降23，直至与室温一致，每日饲喂3次（8：00、12：00、18：00）。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验第42 d（8：00），鸭空腹称重，计算平均日增重、平均日采食量、料重比，并统计试验阶段的成活率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总干物质采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)成活率=成活数量/总数量(4)1.3.2屠宰性能试验结束后，每组选择 45 只鸭通过颈静脉放血致死，根据 NY/T 8232004 测定鸭的活重、屠体重、全净膛重、半净膛重、胸肌重、腿肌重、腹脂重、腿重。1.3.3样本DNA提取分别从移植组和对照组选取8只三穗鸭进行屠宰，收集盲肠中段内容物置于5 mL离心管中，将离心管中的内容物保存于液氮中，转移-80 超低温冰箱保存，盲肠总基因组 DNA 提取采用 QIAamp DNA Stool Mini Kit（IAamp 德国）分离试剂盒，称取200 mg内容物样品置于2 mL离心管中，按照试剂盒提取步骤进行操作。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel软件整理，SPSS 19.0软件进行统计分析，Duncans 法进行多重比较。结果以“平均值标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1菌群移植对三穗鸭生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，移植组鸭成活率、平均日增重显著提高（P0.05），料重比显著降低（P0.05）。表1基础日粮组成及营养水平 原料组成玉米豆粕麦麸菜籽饼磷酸氢钙石粉食盐预混料合计含量/%63.8527.831.504.001.500.850.250.22100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)粗蛋白质/%钙/%有效磷/%赖氨酸/%蛋氨酸/%11.7818.920.810.420.950.29注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 4 000 IU、维生素 E 20 mg、VK3 2 mg、VB1 3.5 mg、VB12 0.01 mg、叶酸1.0 mg、铜10 mg、铁80 mg、锰 60 mg、锌 60 mg、碘 0.4 mg、硒 0.2 mg、烟酸 50 mg、生物素0.1 mg、泛酸钙10 mg、吡哆醇2.5 mg。2.营养水平中粗蛋白、代谢能为实测值，其他均为计算值。表2菌群移植对三穗鸭的生长性能的影响 组别对照组移植组成活率/%91.672.14b96.661.09a平均日均采食量/(g/(头d)38.051.3036.091.13平均日增重/(g/(头d)24.890.17b28.320.14a料重比1.530.12a1.270.17b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05）；表3、表5与此同。表3菌群移植对三穗鸭屠宰性能的影响 单位：%组别对照组移植组屠宰率89.590.07792.320.062全净膛率73.850.04875.320.016半净膛率79.090.03882.020.021胸肌率10.480.02912.320.012腿肌率9.670.03110.600.023腹脂率2.100.0272.610.016禽营养NO.06 202326饲料研究 FEED RESEARCH2.3菌群移植对三穗鸭盲肠菌群门水平丰度的影响（见图1）由图1可知，移植组和对照组鸭盲肠主要的优势菌门为厚壁菌门和拟杆菌门，相对丰度均高于其他菌门。2.4菌群移植对三穗鸭盲肠菌群丰度的影响（见表4）由表4可知，移植组较对照组的拟杆菌门、变形菌门分别降低了8.7%（P0.05）和24.4%（P0.05）；厚壁菌门、梭杆菌门分别提高了 11.2%（P0.05）和 26.1%（P0.05）；放 线 菌 门、蓝 藻 的 丰 度 水 平 显 著 提 高（P0.05）；脱 铁 杆 菌 门、螺 旋 体 的 丰 度 显 著 降 低（P0.05）。2.5 菌 群 移 植 对 三 穗 鸭 盲 肠 菌 群 主 成 分 的 影 响（见图2）由图2可知，第一成分和第二成分的贡献率分别是46.9%和27.65%，移植组的盲肠菌群分布较为集中，对照组盲肠菌群分布相对分散，表明菌群移植对鸭的盲肠微生物群落结构影响较小，能够调节盲肠的菌群稳态。2.6菌群移植对三穗鸭盲肠菌群OTU的影响（见图3）由图3可知，移植组与对照组2个