乙肝两对半测定(cèdìng)－酶联免疫法实习生：廖於波指导老师：李海龙(hǎilónɡ)第一页，共三十二页。HBV是乙型病毒性肝炎的病原体。HBV感染呈世界性流行，但不同地区感染的流行程度差异很大。据WHO报道，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致(suǒzhì)的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。我国属高流行地区一般地区HBsAg阳性率为7.18%。第二页，共三十二页。乙肝病毒血清(xuèqīng)标志物HBsAg第一个出现，感染后第一个出现，感染后1-21-2周即可阳性周即可阳性第三页，共三十二页。乙肝病毒血清(xuèqīng)标志物HBeAg第四页，共三十二页。乙肝病毒血清(xuèqīng)标志物HBcAgHBVHBV复制的标志复制的标志第五页，共三十二页。检测HBV病毒血清标志物是临床最常用的病原学诊断方法。HBV具有三个抗原抗体系统，即乙肝表面抗原（HBSAg）和乙肝表面抗体（HBsAb）、e抗原（HBeAg）和e抗体（HBeAb）、核心抗原（HBcAg）核心抗体（HBcAb），由于HBcAg在血液中难于检出，故临床免疫学检测不包括HBcAg，目前常采用酶联免疫法和化学发光法检测。第六页，共三十二页。酶联免疫吸附实验(shíyàn)原理用于检测包被(bāobèi)于固相板孔中的待测抗原（或抗体）。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。第七页，共三十二页。乙肝病毒血清(xuèqīng)标志物检测原理血清学标志原理包被试剂标记或结合物结果判断HBsAg夹心法HBsAbHBsAb显色(+)HBsAb夹心法HBsAgHBsAg显色(+)HBeAg夹心法HBeAbHBeAb显色(+)HBeAb竞争法HBeAbHBeAb及中和抗原不显色(+)HBcAb竞争法HBcAgHBcAb不显色(+)第八页，共三十二页。标本(biāoběn)本要求采集：第九页，共三十二页。标本(biāoběn)要求储存：样品可存放于2~8℃冰箱，24小时内测定。若需长时间保存，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。上述样品使用前应恢复(huīfù)到室温，轻轻摇动混匀。若标本有沉淀物形成，应离心除去，并确定未变质方可使用。严重融血或脂血标本不可使用。第十页，共三十二页。试剂(shìjì)（安图生物）编号组分名称96人份1包被板69孔X1块2样品稀释液2.3mlX1瓶3酶结合物5.5mlX1瓶4底物液6.2mlX1瓶5显色剂6.2mlX1瓶6洗涤液30mlX1瓶7终止液5.5mlX1瓶8阴性...
