李竺婷等/具核梭杆菌CarRS双组分系统组氨酸激酶CarS的表达、纯化及生化活性测定ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnApr.25,2023,39(4):1596-1608DOI:10.13345/j.cjb.220779©2023ChinJBiotech,Allrightsreserved资助项目：辽宁省自然科学基金民族创新联合基金(2020-MZLH-07)ThisworkwassupportedbytheInnovationJointFundofNaturalScienceFoundationofLiaoningProvince(2020-MZLH-07).*Correspondingauthors.E-mail:QUANChunshan,mikyeken@dlnu.edu.cn;ZHENGWei,zhengwei@dlnu.edu.cnReceived:2022-09-28;Accepted:2023-01-071596生物工程学报具核梭杆菌CarRS双组分系统组氨酸激酶CarS的表达、纯化及生化活性测定李竺婷1,2，师舷1,2，范若辰3，王路路3，卜婷婷1,2，郑维1,2*，张旭强1,2，权春善1,2*1大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室，辽宁大连1166002大连民族大学生命科学学院，辽宁大连1166003大连理工大学生物工程学院，辽宁大连116081李竺婷,师舷,范若辰,王路路,卜婷婷,郑维,张旭强,权春善.具核梭杆菌CarRS双组分系统组氨酸激酶CarS的表达、纯化及生化活性测定[J].生物工程学报,2023,39(4):1596-1608.LIZhuting,SHIXian,FANRuochen,WANGLulu,BUTingting,ZHENGWei,ZHANGXuqiang,QUANChunshan.Expression,purification,andcharacterizationofthehistidinekinaseCarSfromFusobacteriumnucleatum[J].ChineseJournalofBiotechnology,2023,39(4):1596-1608.摘要：具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)是一种条件致病菌，能够在结直肠癌组织中富集，影响结直肠癌发生发展的多个阶段。双组分系统在病原菌耐药性、致病性相关基因的调控和表达中起重要作用。本文以具核梭杆菌CarRS双组分系统为研究对象，重点对其组氨酸激酶蛋白CarS进行重组表达和性质研究。利用在线软件SMART、CCTOP和AlphaFold2对CarS二级结构和三级结构进行预测，其结果表明CarS蛋白具有2个跨膜螺旋区，包含9个α螺旋和12个β折叠结构；由两个结构域构成，一是位于N末端的跨膜域(氨基酸1–170)，另一个是位于C末端的胞内域，胞内域由信号接收域(histidinekinases,adenylylcyclases,methyl-acceptingproteins,prokaryoticsignalingproteins,HAMP)、磷酸受体结构域(histidinekinasedomain,HisKA)和组氨酸激酶催化结构域(histidinekinase-likeATPasecatalyticdomain,HATPase_c)组成。由于全长的CarS蛋白未能在宿主细胞中表达，因此根据其二级、三...
