结直肠癌中DRP1、p53及Ki67的表达及临床意义_丁剑锋.pdf

论著临床研究 ：网络首发 ：（）结直肠癌中 、及 的表达及临床意义丁剑锋，刘颖，靳钦，王伟，周正友（南通大学附属医院创伤中心，江苏南通 ；南通大学附属医院病理科，江苏南通 ；南郑区人民医院病理科，陕西汉中 ）摘要目的观察结直肠癌动力相关蛋白（）、及 的表达情况，并探讨其临床意义。方法收集 年月至 年 月于南通大学附属医院行结直肠癌根治术并经病理诊断为结直肠腺癌的 例患者癌组织及对应癌旁组织，应用免疫组织化学法检测 、及 的表达情况，并分析其与临床病理特征的相关性。结果结直肠癌组织中 、阳性表达率均明显高于癌旁组织（）。不同肿瘤浸润深度（分期）、淋巴结转移（分期）、分期及肿瘤分化程度的患者结直肠癌组织 和 阳性表达率比较，差异均有统计学意义（）。更高的肿瘤 分期、分期、分期患者结直肠癌组织中 阳性表达率更高，差异均有统计学意义（）。结直肠癌组织中 与 、表达水平呈正相关（、，），与 表 达 水 平 也 呈 正 相 关（，）。结论 在结直肠癌组织中表达升高，且与结直肠癌恶性生物学行为相关，可能作为评估结直肠癌恶性程度和进展的有效指标。关键词结直肠癌；病理；动力相关蛋白；中图法分类号 文献标识码 文章编号 （），（.，；.，；.，）（），（）（），（），（），（），（）（，），（，），重庆医学 年月第 卷第期基金项目：年度江苏省南通市级基础科学研究项目（）。作者简介：丁剑锋（），主治医师，硕士，主要从事创伤的临床诊治研究。通信作者，：。；结直肠癌是一种发病率及病死率均较高的消化道恶性肿瘤。近年来，结直肠癌的发病率逐年上升，且患者年龄也呈现下降趋势。结直肠癌最常见的病理类型为腺癌，患者预后较差。目前，外科根治手术仍然是结直肠癌最主要的治疗方法。随着医疗技术的发展及靶向药物的应用，结直肠癌患者手术后年生存率有了一定的改善，尽管如此，还是有相当一部分患者因肿瘤复发或转移而死亡。因此，探索结直肠腺癌诊断的有效分子标志物，研究其治疗靶点，对延长患者存活时间，提升患者生存质量有重要的临床意义。动力 相 关 蛋 白（，）是线粒体分裂的调控蛋白，在较多恶性肿瘤细胞中表达上调，它参与了肿瘤的增殖和转移。是一种抑癌基因，其突变后失去抑癌功能，且促进肿瘤的发展和转移。细胞核相关抗原 是一种细胞核增殖抗原，其与肿瘤细胞的增殖密切相关，指数是评估肿瘤恶性程度的指标之一。本研究通过检测结直肠癌组织中 、及 的表达，分析它们之间的相关性及其与临床病理特征间的关系，探寻结直肠癌新的治疗靶点。资料与方法 一般资料收集 年月至 年 月于南通大学附属医院行结直肠癌根治术并经病理诊断为结直肠腺癌的 例患者癌组织标本和对应癌旁组织标本。患者临床信息来自病案资料。纳入标准：（）行手术治疗且术后病理诊断为结直肠腺癌；（）未接受过任何类型的术前治疗；（）临床病理资料完整，未合并其他严重疾病。例患者中男 例，女 例；年龄 岁，中位年龄 岁；其中 例出现淋巴结转移；肿瘤 分期：、期 例，、期 例。本研究通过南通大学附属医院伦理委员会审核批准，所有患者签署知情同意书。方法 试剂与免疫组织化学染色鼠抗人 、及 单克隆抗体，二氨基联苯胺（）显色试剂盒，免疫组织化学试剂盒及配套物品购自北京中杉金桥有限公司。阴性对照组用磷酸盐缓冲溶液（）替代一抗。试验标本经甲醛固定，常规脱水、包埋及切片，法行免疫组织化学染色，操作步骤如下：恒温烤片机烤片，脱蜡，乙醇梯度脱水，乙二胺四乙酸（）抗原修复，依次孵育一抗和二抗，显色，苏木素染色，封片。结果判读所有染色切片由两名病理医生单独阅片。阳性结果显示细胞质内出现棕褐色颗粒。染色强度：分，无着色；分，浅黄色；分，棕黄色；分，棕褐色。阳性细胞率 为 分，为 分，为分，为分。染色强度与阳性细胞率评分的乘积记为最后评分：分判为阴性，分判为阳性。和 阳性结果定义为细胞核呈棕黄色。阳性细胞率 为分，为分，为分，为分。染色强度：分，无着色；分，浅黄色；分，棕黄色；分，棕褐色。染色强度与阳性细胞率评分的乘积视为最后评分：分判为阴性，分判为阳性。统计学处理采用 软件进行数据统计分析，计数资料以例 数 或 百 分 比 表 示，比 较 采 用检 验；采 用 相关系数进行相关性分析；以 为差异有统计学意义。结果 、及 在肿瘤中的表达 阳性染色在细胞质，及 阳性染色在细胞核，见图。结直肠癌组织中 、及 的阳性表达率依次为 、，阳性表达率均高于癌旁组织，差异有统计学意义（），见表。、及 的表达与结直肠癌患者各临床病理特点的关系不同肿瘤浸润深度（分期）、淋巴结转移（分期）、分期及肿瘤分化程度的患者结直肠癌组织 和 表达比较，差异均有统计学意义（）；更高的肿瘤 分期、分期、分期患者结直肠癌组织 阳性表达率更高，差异有统计学意义（），见表。结直肠 癌 组织 、及 表达的相关性 相关性分析显示，结直肠癌组织 与 、表达水平均呈正相关（、，），与 表达水平也呈正相关（，）。重庆医学 年月第 卷第期：呈高表达；：呈高表达；：呈高表达。图结直肠癌组织 、及 的表达情况（法，）表结直肠癌与癌旁组织中 、阳性表达率比较 ，（）组别 结直肠癌组织组（）（）（）（）（）（）癌旁组织组（）（）（）（）（）（）表 、表达与结直肠癌患者临床病理特点之间的关系 ，（）项目 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）部位 横结肠升结肠盲肠 （）（）（）（）（）（）乙状结肠降结肠直肠 （）（）（）（）（）（）大小 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）分化 高中分化 （）（）（）（）（）（）低分化 （）（）（）（）（）（）重庆医学 年月第 卷第期续表 、表达与结直肠癌患者临床病理特点之间的关系 ，（）项目 性别 女 （）（）（）（）（）（）男 （）（）（）（）（）（）年龄 岁 （）（）（）（）（）（）岁 （）（）（）（）（）（）讨论结直肠癌的恶性程度较高。外科根治手术辅助化疗提高了结肠腺癌的总体生存率。此外，抗血管内皮生长因子（）、抗血管内皮生长因子受体（）、抗表皮生长因子受体（）及抗细胞程序性死亡配体（）治疗目前已应用于临床，但治疗效果各不相同。结直肠癌的其他基因靶向治疗仍需探索。因此，寻找可以预测结直肠癌患者预后并作为治疗靶点的生物标志物具有重要意义。线粒体是生物细胞中至关重要的细胞器，它能提供细胞代谢所需的能量，并参与细胞蛋白质的合成及遗传等。正常情况下，线粒体的分裂与融合形成动态平衡，以 维 持 线 粒 体 的 正 常 功 能。动 力 相 关 蛋 白 是一种鸟苷三磷酸（）酶，定位于细胞质；而人类 基因位于染色体 区，是调控线粒体分裂的重要因子，也是维持线粒体融合与分裂动态平衡的关键因子。研究发现，参与了较多肿瘤的发生和发展。目前，甲状腺癌、卵巢癌、胶质 细 胞 瘤、恶 性 黑 色 素 瘤 及 胃 癌 等 肿 瘤 中 发 现 表达上调；且有转移的乳腺癌中 表达水平高于无转移的乳腺癌。恶性肿瘤是由于肿瘤细胞的增殖与凋亡失衡而导致，线粒体融合分裂平衡又在调控细胞增殖周期中起到了重要作用。有研究提示，抑制细胞中 表达能使细胞周期停滞于 期。还有研究发现，敲低皮肤鳞状细胞癌细胞株 中 的 会 使 细 胞 分 裂 周 期 阻 滞。等 报道，敲除结肠癌细胞中的 能引起癌细胞凋亡增多。另外，胰腺癌和肝细胞癌中 表达增加可以促进肿瘤的增殖 。最近，在胃癌及肺癌组织中也发现 呈高表达，且 高表达与肿瘤的转移和高 分期相关，提示 高表达可能促进肿瘤的进展，。本研究发现，在结直肠癌组织中呈高表达。此外，本研究还发现结直肠癌组织 高表达与肿瘤的不良生物学行为（较低的分化程度、高 分期、高 分期及高 分期）相关，提示 可能在结直肠癌的侵袭和转移中发挥了促进作用。本研究结果与上述文献相符。目前，的促瘤机制尚未明确，它可能通过调控线粒体分裂，从而影响细胞凋亡和增殖的平衡，最终参与并促进肿瘤形成。为核增殖抗原，存在于细胞有丝分裂除期外的各个周期，可以评估细胞增殖活跃程度。刘睿等 研究提示，在大部分肿瘤包括结肠癌中高表达，而且与肿瘤进展及患者预后相关。分为野生型和突变型两种基因类型，野生型 起抑瘤作用，突变型 起促瘤作用。目前，突变型 蛋白可用免疫组织化学方法检测。研究证实，大部分人类肿瘤中可以检测到 突变 。进展期大肠癌的多种恶性生物学行为与 表达相关，检测 蛋白有助于评估大肠癌患者预后 。本研究联合检测结直肠癌组织中的 、和 ，并分析三者的相关性，结果显示，结直肠癌中 与 、表达水平均呈正相关，表明 可能促进了肿瘤的增殖，从而促进了肿瘤的形成。综上所述，结直肠癌中 高表达有着重要意义，今后也将通过更多的研究来探讨 在结直肠癌发展中的机制及其与患者预后的关系，为预测结直肠癌患者预后提供新的标志物，并为结直肠癌患者的治疗提供新的方向。参考文献 ，：，：，（）：吕佳乐，王雅，朱云娜，等动力相关蛋白、在胃腺癌组织中的表达及其临床意义 重庆医学 年月第 卷第期 消 化 肿 瘤 杂 志（电 子 版），（）：王玉 胃癌组织中 、阳性表达情况及其临床意义分析 临床医学工程，（）：，：，（）：，：，（）：刘宗志，霍承瑜，张超非小细胞肺癌患者癌组织乙酰化酶和动态相关蛋白表达及其与预后的关系中华实用诊断与治疗杂志，（）：，：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：刘睿，杨垒，颜浩 、与 蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义中国现代普通外科进展，（）：陈晓丽免疫组织化学法测定 、对结肠癌的诊断价值 中国社区医师，（）：张海洋，厉冰，杨玉兵，等 大肠癌中抑制基因 、与 的表达及其与肠癌生物学行为的关系 中国普通外科杂志，（）：（收稿日期：修回日期：）重庆医学 年月第 卷第期