诱变育种诱变剂诱变育种步骤物理诱变剂化学诱变剂出发菌株的选择单孢子悬液的制备菌丝尖端法处理菌落周围的尖端菌丝混合培养法原生质体是异质的不具有细胞壁不产孢子的菌株诱变时会有遗传分离或遗传不稳现象诱变处理诱变剂种类选择最适诱变剂剂量的选择诱变剂的处理方式影响突变率的因素1、菌种的遗传特性不同2、菌体的细胞壁结构不同3、环境条件的影响①诱变前预培养和诱变后培养②温度、pH、氧气等外界条件对诱变效应的影响③平皿密度效应第一页,共十五页。第三节营养缺陷(quēxiàn)型菌株的筛选(quēxiàn)营养(yíngyng)ǎ缺陷型的用途第二页,共十五页。一、基本概念二、筛选(shāixun)ǎ营养缺陷型的步骤(一)诱变(yòubiàn)(二)淘汰野生型(三)检出缺陷型(四)确定生长谱第三页,共十五页。1、野生型菌株(wildtypestrain)一、基本概念:第四页,共十五页。1、基本培养基(MM):minimalmedium第五页,共十五页。二、筛选营养(yíngyǎng)缺陷型的步骤(yòubiàn)第六页,共十五页。(一)诱变(yòubiàn)方法(yíngyǎng)第七页,共十五页。1、抗生素法:(二)淘汰(táotài)野生型MMCMCMMMMMCM加青霉素第八页,共十五页。(三)缺陷(quēxiàn)型的捡出(yǐngyìn)无营养(yíngyǎng)缺陷MMMM+FCM其他营养缺陷F营养缺陷第九页,共十五页。(1)将一较平皿直径小1cm的金属圆筒蒙上一层灭菌(mièjūn)的丝绒,用金属夹夹住,灭菌(mièjūn)。1、影印(yǐngyìn)法第十页,共十五页。(4)将CM和MM在恒温箱中培养。MMCM第十一页,共十五页。2、点种(diǎnzhǒng)法CMCMMM第十二页,共十五页。3、夹层(jiācéng)法先在培养皿上倒一层基本琼脂培养基,凝固后涂上一层含菌的MM,凝固后再倒一薄层MM琼脂培养基,培养24h,将出现的菌落标记,然后倒上一层CM琼脂培养基,再培养。这时第二批长出的菌落就可能是缺陷型。基本琼脂培养基含菌的MMCM第十三页,共十五页。(shēngzhǎng)4、限量(xiànliàng)补充法第十四页,共十五页。内容(nèiróng)总结诱变育种。②温度、pH、氧气等外界条件。目前生产氨基酸、核苷酸的菌种都是各种类型的缺陷型。1、野生型菌株(wildtypestrain)。指通过诱变而产生的缺乏合成某些(mǒuxiē)营养物质如氨基酸、维生素和碱基等的能力,必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变异株。营养缺陷型菌株经回复突变或重组变异后产生的菌株,其营养要求在表型上相同。[A][B]。具体方法:影印法、点种法。夹层法、限量补充法第十五页,共十五页。