2022年医学专题—第三节-药品质量标准分析方法验证.ppt

第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测(jin c)要求。,第一页，共五十二页。,二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物生产方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行(jnxng)修订时，分析方法需经验证。,第二页，共五十二页。,三、需验证的分析项目 1.鉴别(jinbi)试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。,第三页，共五十二页。,四、验证内容 验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现(zhn xin)性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性,第四页，共五十二页。,（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收(hushu)率R（recovery）的具体方法可采用“回收(hushu)试验法”和“加样回收(hushu)试验法”。,第五页，共五十二页。,回收试验(shyn)空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M,第六页，共五十二页。,加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照(duzho)品（或标准品）测定，测定值为M,第七页，共五十二页。,数据要求(yoqi)规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。,第八页，共五十二页。,1.含量测定方法的准确度 原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法(fngf)测定的结果进行比较。,第九页，共五十二页。,制剂可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，或与另一个已建立(jinl)准确度的方法比较结果。,第十页，共五十二页。,中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在95105%范围内，有些方法操作步骤繁多(fndu)时，可要求在90110%范围内。RSD一般在2%以内。,第十一页，共五十二页。,2杂质定量(dngling)测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。,第十二页，共五十二页。,（二）精密度（precision）精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果(ji gu)之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。,第十三页，共五十二页。,偏差(pinch)（d）：测量值与平均值之差,第十四页，共五十二页。,相对偏差允许差：容量(rngling)分析（中和法、非水滴定法、银量法、络合滴定法、重氮化法、氧化还原法）0.3%；重量法 0.5%；氧瓶燃烧法 0.5%；仪器分析 3%、凯氏定氮法 1%,第十五页，共五十二页。,标准(biozhn)（偏）差（SD或S）,第十六页，共五十二页。,相对(xingdu)标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）,第十七页，共五十二页。,1.重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价(pngji)，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价(pngji)。,第十八页，共五十二页。,2.中间精密度 同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。3.重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。数据(shj)要求：需报告RD，RSD和可信限。,第十九页，共五十二页。,（三）检测限（limit of detection，LOD）检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量(hnling)。是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。,第二十页，共五十二页。,1非仪器(yq)分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。,第二十一页，共五十二页。,2信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N）31或21时的相应(xingyng)浓度或注入仪器的量确定检测限。,第二十二页，共五十二页。,（1）空白值0时；测定背景10次以上，求出标准差b。将b乘以三倍；在工作(gngzu)曲线上求出3b相对应的浓度Xb；即为方法的检出值；（2）空白值不等于0；测定背景10次以上，求出标准差b；将b 乘以三倍；在工作曲线上求出3 b 相对应的浓度Xb；将求得的对应浓度值加上空白值即得该方法的检出限。,第二十三页，共五十二页。,（四）定量限（1imit of quantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果(ji gu)应具有一定准确度和精密度要求。,第二十四页，共五十二页。,常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可按1984年国际纯粹和应用化学联合会(IVPAC)规定：用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际(shj)测定下限。,第二十五页，共五十二页。,仪器分析：通过测定一组空的样品(yngpn)的背景信号后计算标准差S。以1OS来估算定量限度。（以定量限度制备的样品(yngpn)来验证）非仪器分析：通过分析己知被测物浓度的样品(yngpn)并确定一个样品(yngpn)中被测物可被准确和精密测定出的最低浓度（量）。,第二十六页，共五十二页。,（五）专属性（specificity）（选择性）：指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂(fz)样品分析时是否受到相互干扰程度的度量。,第二十七页，共五十二页。,通常通过分析含有加了杂质、降解(jin ji)产物、有关化学物质或安慰剂成分的样品，将所获分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果之差即专属性。,第二十八页，共五十二页。,1鉴别反应 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别(qbi)，不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应。2含量测定和杂质测定 色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份的位置，色谱法中的分离度应符合要求。,第二十九页，共五十二页。,（六）线性（Linearity）在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。线形通常用最小二乘法处理数据求得回归(hugu)曲线的斜率（Slope）来表示。数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系数、y截距（是检定的可能偏差）、回归(hugu)斜率及方差等参数，应列出回归(hugu)方程数和线性图。,第三十页，共五十二页。,（七）范围（Range）：指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间。范围的确定可因测定项目不同(b tn)而有不同(b tn)要求：含量测定范围为80%-120%；含量均匀度范围为70%-130%；杂质测定应为被测杂质限度的50%-120%；溶出度应为测定范围的20%。,第三十一页，共五十二页。,（八）耐用性 指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。分析方法重现性的测定是通过在不同(b tn)的实验室内不同(b tn)的实验者对同一样品的分别测试而获得的。（获得的这种再与正常检定下的精密度进行比较，从而确定该法的耐用性，或称粗放度）,第三十二页，共五十二页。,（九）应用(yngyng)1.鉴别试验除专属性、耐用性外，其它都不要求。2.杂质的限量检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求。杂质的含量测定除检测限外，其它都要求。3.含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求。,第三十三页，共五十二页。,（十）各种含量测定方法对效能指标的要求 1.容量分析法：用原料药精制品(含量99.5)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般(ybn)应不大于0.2；进行回收率试验。回收率一般在99.7100.3之间。,第三十四页，共五十二页。,2.UV法：用适当浓度的精制品进行(jnxng)测定，其RSD一般不大于1。制剂的测定，回收率一般应在98102之间。,第三十五页，共五十二页。,线性：吸光度A一般在0.20.7，浓度点n5。用浓度c对A作线性回归处理(chl)，得一直线方程，r应达到0.9999(n5)，方程的截距应近于零。,第三十六页，共五十二页。,3.HPLC法：要求RSD2，回收率98102之间。线性范围：用精制品配制(pizh)一系列标准溶液，浓度点n应为57，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零。,第三十七页，共五十二页。,99：73.精密度是指（B）A.测得的测量值与真值接近的程度 B.测得的一组测量值彼此符合的程度 C.表示该法测量的正确性 D.在各种正常(zhngchng)试验条件下，对同一样品分析所得结果的准确程度 E.对供试物准确而专属的测定能力,第三十八页，共五十二页。,99x：76精密度是指该法（D）A.测得的测量值与真值接近的程度 B.测得的测量值与回收率接近的程度 C.测量的正确性 D.测得的一组测量值彼此符合(fh)的程度 E.对供试物准确而专属的测定能力,第三十九页，共五十二页。,96：138在药物分析中，精密度是表示该法的（BD）A.测量值与真值接近程度(chngd)B.一组测量值彼此符合程度 C.正确性 D.重现性 E.专属性,第四十页，共五十二页。,95：106110应要求的效能指标：A.检测限 B.定量(dngling)限 C.两者均要求 D.两者均不要求95：106.含量测定方法评估（D）95：107.杂质限量检查（A）95：108.杂质定量测定（B）95：109.溶出度测定（D）95：110.中间体含量测定（D）,第四十一页，共五十二页。,97：126药物杂质(zzh)检查所要求的效能指标为（CDE）A.准确度 B.精密度 C选择性 D.检测限 E.耐用性,第四十二页，共五十二页。,98：138评价药物分析所用(su yn)的测定方法的效能指标有（BCD）A.含量均匀度 B.精密度 C.准确度 D.粗放度 E.溶出度,第四十三页，共五十二页。,例15A精密度 B定量限C两者皆是 D两者皆不是1.某法测得一组测量值间彼此符合程度（A）2.测量值和真值接近的程度（D）3.测定结果的重现(zhn xin)性（A）4.可定量测得被测药物的最低水平参数（B）5.药物分析方法的效能指标（C）,第四十四页，共五十二页。,例6.相对标准差表示(biosh)（C）A.准确度B.回收率C.精密度D.纯净度E.限度,第四十五页，共五十二页。,例7.精密度的一般表示(biosh)方法有(AE)A.相对标准差B.相对平均偏差C.相对误差D.绝对误差E.标准差,第四十六页，共五十二页。,例8.检测(jin c)限的表示方法有（ABC）A.百分数 B.ppm C.ppbD.g E.ng,第四十七页，共五十二页。,例9.用信噪比法表示(biosh)检测限时，信噪比一般应为（BC）A.11 B.21 C.31D.41 E.51,第四十八页，共五十二页。,例10.用碘量法测定维生素C原料药时，要求碘量法应具备(jbi)（ACD）A.选择性 B.定量限C.精密度 D.粗放度E.线性,第四十九页，共五十二页。,例11.测定药物