LOGO万丽花2011.11.4——木瓜(mùɡuā)蛋白酶的固定第一页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件固定化酶的介绍1固定化酶的特点2酶固定化的方法3举例:木瓜蛋白酶的固定及性质研究4主要(zhǔyào)内容第二页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件原因(yuányīn)2固定化酶原因1酶一般以溶于水的状态作用于底物,因此,当反应结束时,一般难以回收,也难以从产物中除尽,又由于酶仅能使用一次,因此,使得(shǐde)产物纯度不够,且造成很大的浪费。•固定化酶的介绍酶对热、酸、碱等有机溶剂均不稳定,即使在酶反应的最适环境中,也易失活。通过物理或化学法将酶束缚在一定的空间,使酶只能在此区间进行催化反应,反应结束后,能迅速与底物和产物分开,实现重复使用。第三页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件优点(yōudiǎn)•固定化酶的特点(tèdiǎn)易与反应液分开可反复使用,降低成本酶的稳定性提高较易控制终止酶反应的进程产物纯化简便第四页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件缺点(quēdiǎn)•固定化酶的特点(tèdiǎn)酶活力有损失胞内酶必须经过酶的分离手续增加了生产的成本,工厂初始投资大与完整菌体相比不适于多酶反应只能用于可溶性底物第五页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件•酶固定化的方法(fāngfǎ)格子型•包埋法微胶囊型•交联法共价结合法•载体(zàitǐ)结合法离子结合法物理吸附法分离的酶载体一定方式固定第六页,共二十四页。食品(shípǐn)酶学研究生课件•包埋法---格子(gézi)型原理(yuánlǐ):将酶包埋在聚合物的凝胶格子中常用凝胶为:聚丙烯酰胺凝胶、明胶、角叉菜胶EEEE第七页,共二十四页。•包埋法---微胶囊型原理(yuánlǐ):以半透性的有机高聚物薄膜包围含有酶分子的液滴,在有机溶剂中,含酶水溶液的液滴界面处,发生界面凝集作用,形成半透性膜,使酶被包裹于其中,阻止了酶的漏失。微囊直径一般为m-几百m的小珠特点:小分子底物能通过膜与酶接触,产物也可释放出来。第八页,共二十四页。•载体(zàitǐ)吸附---共价结合法原理:酶蛋白(dànbái)上非活性必需基团(氨基酸残基)与载体通过共价键形成不可逆的联结。载体:纤维素、葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺衍生物优点:结合牢固,酶不易脱落,稳定性好。缺点:载体需活化,操作复杂,反应条件剧烈载体EEEEEE第九页,共二十四页。•载体吸附(xīfù)---离子结合法原理:酶蛋白的带电基团和含有离子交换基...