3、1960年发现多发性骨髓瘤细胞有多种免疫球蛋白。由于病原微生物是含有多种抗原决定族的抗原物质，因此制的这些抗体制剂也是多种抗体的混合物，故称为多克隆抗体。易出现非特异性交叉反应。4、1975年KöhlerandMilstein等首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出McAb.在临床上主要用于诊断(zhěnduàn)和治疗。McAb由一个B细胞克隆产生的，只能识别某一个抗原表位的高度特异性抗体。第一页，共七十三页。McAb在免疫导向疗法中存在的困难（障碍）：A、McAb均是鼠源性抗体，应用于人体内可产生人抗鼠抗体（HAMA），加速了排斥反应，在人体内的半衰期只有5~6h，难以维持有效药物作用靶组织时间；B、完整(wánzhěng)的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透实体肿瘤组织，达不到有效的治疗浓度。解决问题的方法或途径—基因工程技术A、降低McAb的免疫源性；B、降低McAb的相对分子质量。第二页，共七十三页。5、1984年报道了人—鼠嵌合抗体，之后制备出了改型抗体、单链抗体、单域抗体、最小识别单位等多种类型，基本上消除了抗体的鼠源性（免疫源性），相对分子质量只有完整抗体分子的1/80~1/3。6、1994年Winter创建了噬菌体抗体库技术,以基因工程方法制备抗体并发展(fāzhǎn)成抗体工程。它是抗体研究领域的一次技术革命，它不用人工免疫动物和细胞融合技术，完全用基因工程技术制备人源性抗体。第三页，共七十三页。第二节单克隆抗体(kàngtǐ)及其改造（MonoclonalAntibody）一、制备单克隆抗体的一般流程McAb是将抗体产生细胞(xìbāo)与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体，又是单一的B淋巴细胞克隆产生的，故称为单克隆抗体。第四页，共七十三页。第五页，共七十三页。第六页，共七十三页。1、抗原与动物免疫免疫方法：体内免疫和体外免疫抗原：颗粒性抗原和可溶性抗原免疫动物：BALB/c小鼠和Lou大鼠2、细胞融合与杂交瘤细胞的选择培养基本(jīběn)方法：取适量脾细胞（1×108）与骨髓瘤细胞（2×107~3×107）进行混合，在PEG作用下诱导它们融合，时间控制在2min以内，然后用培养液将PEG融合液缓慢稀释。第七页，共七十三页。第八页，共七十三页。用于细胞融合的骨髓瘤细胞的条件：1、融和(rónɡhé)率高2、自身不分泌抗体3、所产生的杂交瘤细胞分泌抗体的能力强且长期稳定。第九页，共七十三页。PEG的相对分子质量和浓度越大，其促...
