细胞培养常用(chánɡyònɡ)技术细胞培养常用(chánɡyònɡ)技术Cell第一类研究方法形态观察形态观察(guānchá)(guānchá)技术技术第二类研究方法生物化学分析生物化学分析(huàxuéfēnxī)(huàxuéfēnxī)技术技术第三类研究(yánjiū)方法V细胞生理学技术细胞生理学技术第四类研究方法其它实验技术其它实验技术(jiégòu)目镜物镜集光器载物台光源1.普通(pǔtōng)光镜的结构:（一）普通（一）普通(pǔtōng)(pǔtōng)光学显光学显微镜微镜一、光学显微镜一、光学显微镜一、光学显微镜一、光学显微镜2.普通(pǔtōng)光镜的成像原理22图像样品光线聚光器物镜光学显微镜的光路图分辨率分辨率指显微镜能将近邻的两个质点分辨清楚的能力，通常是用相邻两点间的距离来表示.与数值孔径的关系：D=0.61λ/NA=0.61λ/N·sin(α/2)D为分辨率;λ为光波波长;要提高分辨率，可采取使用短波长光源、采用介质(jièzhì)折射率高的袖浸系、增大孔径角以提高NA值等措施。倒置显微镜倒置显微镜倒置显微镜倒置显微镜生长良好的细胞，在显微镜下可观察到细胞透明度大，折光性强，轮廓不清。若细胞生长状态不良，可见细胞轮廓增强，细胞折光性变弱，细胞胞质中出现空泡、脂滴和其他颗粒状物质，细胞之间空隙增大，细胞形态不规则，甚至失去原有细胞的特点，产生(chǎnshēng)圆缩脱落，有时细胞表面及周围出现丝絮状物。培养细胞的生长(shēngzhǎng)过程Anip973在普通光学显微镜下，细胞结构呈半透明状半透明状，不易(bùyì)看清。往往将标本切片进行(jìnxíng)染色——提高可辨程度。移动臂移动臂蜡或树脂包埋的样品蜡或树脂包埋的样品切片用钢刀切片用钢刀样品切片蜡带样品切片蜡带伸展在盖玻片和伸展在盖玻片和载玻片之间的切片载玻片之间的切片切片机染染色色的的原原理理未染色未染色(rǎnsè)(rǎnsè)已染色已染色(rǎnsè)(rǎnsè)((二二))暗视野显微镜暗视野显微镜((二二))暗视野显微镜暗视野显微镜这种显微镜使照明光线不能直接(zhíjiē)进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜。中央(zhōngyāng)遮光板暗视野聚光器的设计原理视野的背景(bèijǐng)黑物体的边缘亮利用这种显微镜能见到小至5nm的质点，分辨率比普通(pǔtōng)显微镜高了40倍，有一些细胞器，如核、线粒体，均清晰可见。((三三))相差相差(xiānɡchà)(xiānɡchà)显微镜显微镜((三三))相差相差(xiānɡchà)(xiānɡchà)显微镜显微镜由荷兰物理学家F....
