血型鉴定(jiàndìng)和交叉配血实验第一页,共三十页。实验(shíyàn)目的•学习ABO血型(xuèxíng)鉴定方法,掌握血型(xuèxíng)鉴定原理。•观察红细胞凝集现象。第二页,共三十页。实验原理-血型(xuèxíng)鉴定•ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型,存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素(ImmunoglobuliM)。当A凝集原与抗A凝集素相遇(xiānɡyù)或B凝集原与抗B凝集素相遇时,会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素,B型标准血清中含有抗A凝集素,因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应,以确定其血型(表型)。第三页,共三十页。实验(shíyàn)原理-交叉配血•同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集,称为异族血细胞凝集作用。对于动物的天然血型抗体了解不多,而且免疫效价也很低,所以(suǒyǐ)同种动物第一次输血,一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验,才能决定是否能相互输血。•交叉配血既可检验血型测定是否有误,又能发现他们的红细胞或血清中,是否还存在一些其它的凝集原或凝集素,足以引起红细胞凝集反应。在进行并叉式配血试验时,应在37℃下进行,以保证可能有的凝集反应得以充分显示。第四页,共三十页。交叉(jiāochā)配血•交叉配血中红细胞悬液和血清的制备方法:•静脉采血3ml,取下针头,将其中的0.4ml注入已加入106mmol/L枸橼酸钠抗凝剂0.1ml的试管中(血液与抗凝剂的比例为4:1),混匀,待用。剩余血液加入另一支试管中,使其自然凝固。分离血清备用。洗涤红细胞:取抗凝血一份,加8-10倍量的生理盐水,颠倒混匀后,1000r/min离心5分钟,弃去上清液,再加入8-10倍量的生理盐水,颠倒混匀后,1000r/min离心5分钟,如此反复三次。最后弃去上清液后即得压积红细胞。配制5%红细胞悬液:取压积红细胞1滴,加2ml生理盐水,颠倒混匀即可。洗涤红细胞的目的:洗脱红细胞表面上残留的血浆蛋白,以免造成血型不符(bùfú)的假象第五页,共三十页。实验(shíyàn)对象、药品和仪器•人•双凹玻片,采血针,竹签,75%酒精棉球,干棉球,玻璃蜡笔(记号笔),尖头滴管,显微镜,消毒牙签,5ml注射器及针头(zhēntóu),生理盐水,碘酒棉球,滴管,小试管。•A、B型标准血清第六页,共三十页。实验方法(fāngfǎ)和步骤1.ABO血型的鉴定•取双凹玻片一块,在两端分别标上A...