植物细胞(xìbāo)结构第一页,共二十五页。细胞种类植物细胞微生物细胞动物细胞细胞大小/um200~3001~1010~100倍增时间/h﹥120.3-6﹥15营养要求简单简单复杂光照要求大多数要求不要求不要求对剪切力敏感大多数不敏感非常敏感主要产物色素、药物、香精、酶等醇、有机酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等疫苗、激素、单克隆抗体、酶等第二页,共二十五页。三者之间的差异主要有:•植物细胞>动物细胞>微生物细胞。•动物细胞、植物细胞的生产周期比微生物长。•植物细胞和微生物细胞的营养要求较简单(jiǎndān)。•植物细胞的生长以及次级代谢物的生产要求一定的光照。•植物细胞和动物细胞对剪切力敏感。•植物、微生物和动物细胞的主要目的产物各不相同。第三页,共二十五页。一、植物细胞培养产酶从外植体中→选育植物细胞→高产稳定(wěndìng)细胞→培养→各种产物1.植物细胞培养的特点提高产率和产品质量缩短周期易于管理第四页,共二十五页。2.培养基特点①需要大量无机盐第五页,共二十五页。3.培养工艺:——悬浮细胞培养⑴工艺流程外植体→细胞的获取→细胞培养→分离→纯化产物①外植体选择和处理选取那些无病虫害、生长旺盛、生长规则植株,把茎、叶、根、芽,花、果实等切成小片段或小块。用70%-75%乙醇,0.1%升汞消毒(xiāodú),无菌水漂洗。第六页,共二十五页。外植体:从植株取出,经过预处理后,用于植物组织培养的植物组织(包括根、茎、叶、芽、花、果实、种子等)的片段或小块。愈伤组织:将上述外植体植入诱导培养基中,于25℃左右培养一段时间,从外植体的切口(qiēkǒu)部位长出小细胞团。第七页,共二十五页。水稻(shuǐdào)的外植体(幼胚)和愈伤组织外植体愈伤组织(zǔzhī)第八页,共二十五页。②植物细胞获取机械(jīxiè)法酶法第九页,共二十五页。⑵培养条件的影响与控制①温度:室温25℃②pH:微酸性范围(fànwéi)。即pH5.0-6.0③通气与搅拌④光照的控制:强度和时间有一定要求⑤前体的添加(饲喂)⑥刺激剂的应用第十页,共二十五页。4.植物细胞培养产酶实例以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶(SOD)为例(1)大蒜愈伤组织的诱导选取结实(jiēshi)、饱满、无病虫害的大蒜蒜瓣,去除外皮,先用70%乙醇消毒20s,再用0.1%升汞消毒10min,然后无菌水漂洗3次。在无菌条件下,切成0.5cm3的小块,植入含有3mg/L2,4-D和1.2mg/L6-BA的半固体MS培养基中,在25℃,600lux,12h/d光照条件下培养18d,诱导得到愈伤组织,每1...