2022年医学专题—溶血性贫血(1).ppt

第四篇 第二章 第二节,溶血性贫血(pnxu)的实验室检测,第一页，共六十一页。,什么叫溶血性贫血？各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，骨髓(su)代偿造血功能缺乏时所发生的一类贫血叫溶血性贫血。什么叫溶血性疾病？指骨髓代偿能力尚足以补偿红细胞的损耗而不出现贫血。,第二页，共六十一页。,溶血性贫血(pnxu)的分类,按溶血发生部位分类RBC破坏场所(chn su)血管内溶血：RBC在血管内破坏DIC、机械性微血管病变、烧伤、输异型血、PNH血管外溶血：RBC在单核-吞噬细胞系统吞噬或破坏AIHA、遗传性球形细胞增多症,第三页，共六十一页。,溶血性贫血(pnxu)的分类,按病因及发病(f bng)机制分类 RBC内在因素遗传性/获得性 RBC膜缺陷、RBC酶缺陷、珠蛋白异常肽链不平衡 RBC外在因素获得性 免疫性溶贫、机械损伤性、感染、物理因素、毒素、脾亢,第四页，共六十一页。,溶血性贫血(pnxu)的诊断,确定是否有溶血(rn xu)筛查检测,红细胞破坏(phui)增加,红系代偿性增生,哪一类溶贫病因检测,第五页，共六十一页。,一、溶血性贫血(pnxu)的筛查检测,第六页，共六十一页。,珠蛋白 血红素 铁+卟啉,单核巨噬系统(xtng)脾脏,血管(xugun)外溶血,RBC,血管(xugun)内溶血,血浆游离Hb,肾脏,血红蛋白尿,游离胆红素,肝脏,结合珠蛋白,近曲小管上皮细胞,肾阈,结合胆红素,粪胆原的肠肝循环,含铁血黄素尿 Rous 实验,胆汁,粪胆原,肠道,血液,肾脏,尿胆原,高铁血红蛋白,血红素/清蛋白,血管内、外溶血示意图,1,2,3,4,5,6,7,第七页，共六十一页。,一红细胞破坏(phui)增加,RBC寿命测定(cdng)51Cr同位素标记参考值：2532天半衰期15天，说明有溶血存在,1,第八页，共六十一页。,参考值：50mg/L 意义：血管内溶血时明显增高 血管外溶血时正常或轻度(qn d)升高,血浆游离血红蛋白(xuhng dnbi)测定 plasma free hemoglobin,一红细胞破坏(phui)增加,2,第九页，共六十一页。,血红蛋白(xuhng dnbi)尿测定hemoglobinuria,血管内有大量红细胞破坏，血浆中的游离血红蛋白量超过1000mg/L时出现(chxin)酱油色尿 结果判定:阴性 临床意义:血管内溶血时阳性,3,一红细胞破坏(phui)增加,第十页，共六十一页。,参考值：0.71.5 g/L 临床意义：Hp减少，提示(tsh)溶血存在，血管内溶血时显著减低 Hp增加，提示急慢性感染、恶性肿瘤、创伤、风湿性关节炎、SLE等鉴别肝内外阻塞性黄疸肝内阻塞性黄疸显著减少或缺乏肝外阻塞性黄疸正常或增高,血清(xuqng)结合珠蛋白(haptoglobin，Hp,一红细胞破坏(phui)增加,4,第十一页，共六十一页。,原理：血浆中游离血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，接着分解为高铁血红素，后者与清蛋白结合形成高铁血红素清蛋白 结果(ji gu)判定:阴性 临床意义:见于各种原因所致的严重血管内溶血,血浆高铁血红素清蛋白(dnbi)测定methemalbumin test,一红细胞破坏(phui)增加,5,第十二页，共六十一页。,结果判定：阴性(ynxng)临床意义:见于慢性血管内溶血，如PNH,尿含铁血黄素(hun s)试验Rous test,一红细胞破坏(phui)增加,6,第十三页，共六十一页。,游离胆红素间接胆红素，IBIL增高(znggo)参考值：TBIL 01.2mg/dl(020.5 ummol/L)IBIL 00.8mg/dl(013.7 ummol/L)临床意义:提示溶血,一红细胞破坏(phui)增加,7,第十四页，共六十一页。,外周血红细胞形态(xngti)改变,一红细胞破坏(phui)增加,第十五页，共六十一页。,裂细胞schistocyte 红细胞异形症poikilocytosis 系指红细胞发生各种明显的形态学异常改变而言。红细胞可呈梨形、泪滴性、新月形、长圆形、哑铃型、逗点性、三角形、盔形，以及球形、靶形等。见于红细胞因机械或物理因素所致的破坏，如微血管病性溶血性贫血如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜、溶血尿毒症综合征等。也可见(kjin)于严重烧伤病人。,一红细胞破坏(phui)增加,第十六页，共六十一页。,二红系代偿(di chn)增生,红细胞大小不均网织红细胞增多外周血见有核RBC骨髓红细胞系统增生明显活泼，形态异常细胞(xbo)嗜多色性出现嗜碱点彩红细胞出现豪乔小体出现卡波环,第十七页，共六十一页。,红细胞大小不等,第十八页，共六十一页。,二、哪一类(y li)溶血性贫血？,第十九页，共六十一页。,细胞膜,酶缺陷(quxin),异常(ychng)血红蛋白,自免溶贫,第二十页，共六十一页。,一红细胞膜缺陷(quxin)的检测,红细胞渗透(shntu)脆性试验,红细胞孵育渗透脆性(cuxng)试验,酸溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒溶血试验,CD55,CD59检测,第二十一页，共六十一页。,红细胞皱缩(zhu su),红细胞膨胀甚至(shnzh)破裂,高渗溶液(rngy),等渗溶液,正常,1.红细胞渗透脆性试验,第二十二页，共六十一页。,【原理】测定红细胞对不同浓度低渗氯化钠溶液的抵抗能力。主要(zhyo)取决于红细胞外表积与体积之比。外表积大而体积小，对低渗盐水抵抗力较大即脆性较小；反之，抵抗力较小即脆性较大。,1.红细胞渗透脆性(cuxng)试验,第二十三页，共六十一页。,【参考值】0.6-0.8%NaCl溶液红细胞不破裂 0.42-0.46%NaCl溶液局部(b fen)红细胞破裂开始溶血 0.28-0.34%NaCl溶液红细胞完全破裂完全溶血,NaCl,0.6%,1.红细胞渗透脆性(cuxng)试验,第二十四页，共六十一页。,【临床意义】脆性增加：开始溶血0.5%，完全溶血0.38%；主要见于遗传性球形红细胞增多症，遗传性椭圆形细胞增多症、温抗体AIHA也可增高。脆性减低：主要见于海洋性贫血(pnxu)，也可见于缺铁性贫血、某些肝硬化等。,1.红细胞渗透脆性(cuxng)试验,第二十五页，共六十一页。,【原理】红细胞在孵育过程中，葡萄糖的消耗增加，而使贮备的ATP减少，导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻，造成钠离子在红细胞内积聚，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加。【参考值】未孵育 50%溶血4.04.45 g/L NaCl 37孵育24h 50%溶血4.655.9 g/L NaCl【意义】脆性增高 遗传性球形红细胞增多(zn du)症 脆性减低 珠蛋白生成障碍性贫血 缺铁性贫血 脾切除术后,2.红细胞孵育(f y)渗透脆性试验,第二十六页，共六十一页。,3.PNH相关(xinggun)检测,阵发性睡眠性血红蛋白尿症PNH：获得性红细胞膜缺陷的克隆性疾病，常在睡眠时加重，临床上可表现血管内溶血、栓塞、全血细胞减少等，有时可出现骨髓衰竭。PNH患者红细胞膜外表缺乏加速衰变因子DAF，CD55反响性溶血的膜抑制(yzh)物MIRL，CD59等，使红细胞对补体敏感而溶血。,第二十七页，共六十一页。,1蔗糖溶血(rn xu)试验,【原理】蔗糖离子浓度低，增强补体与红细胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进入红细胞而致溶血。【参考值】阴性【临床意义】PNH本试验常为阳性。可作为(zuwi)PNH筛选试验，阴性可排除，阳性应作Ham 试验。,3.PNH相关(xinggun)检测,第二十八页，共六十一页。,2蛇毒因子溶血(rn xu)试验,【原理】蛇毒(sh d)因子是种溶血因子，能直接激活补体C3，激活补体系统，造成溶血。【参考值】溶血度5%【临床意义】特异性PNH试验。,3.PNH相关(xinggun)检测,第二十九页，共六十一页。,3酸溶血(rn xu)试验 Ham试验,【原理】膜蛋白缺陷的红细胞对补体敏感增加，在弱酸血清pH6.66.8中，经37 孵育后红细胞发生溶血。【参考值】阴性(ynxng)。【临床意义】酸溶血试验是诊断PNH的主要确诊试验。,3.PNH相关(xinggun)检测,第三十页，共六十一页。,Ham试验(shyn),第三十一页，共六十一页。,PNH患者不同(b tn)时间尿样,第三十二页，共六十一页。,4CD55 CD59检测(jin c),【原理】CD55，CD59是补体调节蛋白，具有GPI锚定蛋白作用。PNH患者红细胞和粒细胞上GPI锚缺陷，无法结合在细胞膜上，导致对补体敏感，容易发生溶血。【参考范围(fnwi)】外周血中CD55，CD59阴性红细胞和中性粒细胞均10，主要确诊试验,3.PNH相关(xinggun)检测,第三十三页，共六十一页。,PNH诊断(zhndun),1.初筛试验血管内溶血的特点血浆游离血红蛋白增高，结合(jih)珠蛋白(Hp)降低，血红蛋白尿、尿中出现含铁血黄素、蔗糖溶血试验等。2.诊断试验 酸化血清溶血试验(Hams试验)、蛇毒因子溶血试验、CD55和CD59检测。,第三十四页，共六十一页。,二红细胞酶缺陷(quxin)的检测,自身溶血试验及纠正试验 高铁血红蛋白(xuhng dnbi)复原试验 氰化物-抗坏血酸试验 变性珠蛋白小体生成试验 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD活性检测 丙酮酸激酶荧光筛选试验和活性测定,第三十五页，共六十一页。,1.自身(zshn)溶血试验及纠正试验,【原理(yunl)】细胞内酶缺陷葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6-PD、丙酮酸激酶，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。在温育过程中分别参加葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。,第三十六页，共六十一页。,【参考值】正常人轻微溶血，溶血度 3.5%；加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，溶血度1%。【临床意义】遗传(ychun)球、遗传(ychun)性非球形细胞溶血的鉴别,1.自身溶血试验(shyn)及纠正试验(shyn),第三十七页，共六十一页。,2.高铁血红蛋白复原(hun yun)试验,【原理】在有足量的NADPH存在下，反响液中的高铁血红蛋白能被复原成亚铁血红蛋白。当G-6-PD含量正常时，由磷酸戊糖途径生成的NADPH的数量足以完成上述反响。反之，那么复原(hun yun)速度减慢，甚至不能复原(hun yun)。【参考值】复原率75%；高铁血红蛋白0.3-1.3g/L。【临床意义】G-6-PD缺陷，复原率显著降低。本试验是反映红细胞对高铁血红蛋白的复原能力，特异性较低，可用作G-6-PD缺乏的筛选试验。,第三十八页，共六十一页。,【原理】抗坏血酸钠与HbO2反响生成H2O2，氰化钠能抑制过氧化氢酶使H2O2不受影响，从而使H2O2与GSH发生反响，产生氧化型谷光氨肽，后者需要NADPH使其再复原为GSH。如红细胞内缺乏催化NAPDH形成的酶G-6-PD，GSH产生减少，H2O2蓄积(xj)，HbO2被氧化成为棕色的高铁血红蛋白。【临床意义】正常血液几小时后才变为暗色；G-6-PD缺乏症患者血液呈棕色阳性反响，纯合子2h，杂合子3-4h。可做为诊断G-6-PD缺乏症的一种过筛试验。,3.氰化物-抗坏血酸试验(shyn),第三十九页，共六十一页。,4.变性(binxng)珠蛋白小体生成试验,【原理】G-6-PD缺乏可致红细胞内的GSH含量减少，随之出现高铁血红蛋白增高，最后形成变性珠蛋白小体Heinz bodies。取G6PD缺陷患者血液，加乙酰苯肼，37温育2-4h，推薄血片，1%煌焦油蓝染色，计算含5个或更多珠蛋白小体(xio t)的红细胞百分率。【参考值】30%【临床意义】G6PD缺陷症，不稳定Hb、HbH病等常高于45%。,第四十页，共六十一页。,5.葡萄糖-6-磷酸(ln sun)脱氢酶G6PD活性检测,【原理】在G6PD和NADP存在下，G6PD能使NADP复原成NAD