毛细管电泳激光诱导毛细管电泳激光诱导(yòudǎo)(yòudǎo)荧光分荧光分离检测脑肠肽离检测脑肠肽第一页，共二十一页。•生物活性肽是一类具有重要生物学功能的多肽，生物活性肽的研究是生命科学，神经生理学、药理学和临床医学领域的前沿课题，开展生物活性肽的分离分析研究，寻求灵敏，高效(ɡāoxiào)，快速和简便的分析方法具有重要意义。第二页，共二十一页。•生物活性多肽在内源性物质中占有非常(fēicháng)重要的地位。作为激素、神经递质、免疫调节器、辅酶或酶阻剂、药物、毒素和生物抗体，它们参与控制和调节生物体中的许多重要的生理过程。当它们在体内分泌失常或代谢失调，就导致严重的病变。第三页，共二十一页。•脑肠肽主要分布在中枢神经系统例如下丘脑及肠消化道内。•脑肠肽能调节胃肠的蠕动，调节胃肠的分泌作用和吸收作用，在调节胃肠道系统的生理活性过程中起重要作用。•神经紧张肽等具有降低(jiàngdī)血压，止痛，能控制肠道收缩，增加血管的通透性等重要生理作用。第四页，共二十一页。RIACCK-4GelChromatography-RIACE-MS第五页，共二十一页。NTorNT8-13CZE-UVTLCHPLC-UVELISACE-MS第六页，共二十一页。•CE由于具有高的分离效率,样品用量少,快速,简便,环保(huánbǎo)等特点,因而是分离生物活性物质如蛋白质,多肽和核酸的强有力的工具.•由于紫外检测受毛细管短光程的限制,CE-UV的检测灵敏度为10-5~10-6mol/L,CE-LIF检测是CE最灵敏的检测方法之一.Ar+激光器(激发波长488nm,发射波长520nm)是最常用的一种商品化的VIS区的激光源.第七页，共二十一页。•利用自身的荧光进行检测,仅局限与那些具有芳香环氨基酸残基(色氨酸和酪氨酸)的多肽分子.对于大部分的肽来说,事先要经过衍生(yǎnshēnɡ)化处理使其转化为具有荧光基团的化合物.第八页，共二十一页。第九页，共二十一页。1,NT8-13:5.0x10-9M;2,NT:1.0x10-8M,NKB:5.0x10-9M,CCK:5.0x10-9MPH9.5110mMborate,20%methanol0.5psi-10s第十页，共二十一页。PeptideLinearRegressionequationCorrelationcoefficientLinearRangeDetectionlimitNT8-13Y=1160.1Χ+2662.50.99531~20nM0.5nMNTY=688.24Χ+375.810.99632~40nM1.0nMNKBY=455.6Χ+464.140.99832~20nM1.0nMCCKY=754.87Χ+1645.80.99701~20nM0.8nM第十一页，共二十一页。•1.通过设计特殊类型的检测池,扩展在毛细管内的检测光程.•2.发展高灵敏度的检测器,如激光(jīguāng)诱导荧光检测,化学发光检测,电化学检测等等...
