2022年医学专题—广州血液中心输血探究所(1).ppt

,广州血液(xuy)中心输血研究所 田兆嵩,输血(sh xu)前检验应重视的几个问题,1,第一页，共六十九页。,输血前要做三项检查：血型鉴定；抗体筛选；交叉(jioch)配血试验。目的有二：使输入的血液成分有效存活；不会引起受血者的红细胞发生破坏。,三者有互补作用(zuyng)，缺一不可。,2,第二页，共六十九页。,在检验医学中，没有几项检验像输血前检验一样，临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。输血前检验的每一个环节均可能发生差错，标本搞错最为常见。给患者输入不相容的血液成分导致严重不良后果：急性溶血反应：多由ABO血型不相容输血引起，人为差错是其主要原因；迟发性溶血反应：多由ABO以外(ywi)血型不相容输血所致，输血前检验不规范是其主要原因。,3,第三页，共六十九页。,安全输血从源头上抓起就应重视如何获取正确的血液标本；一旦受血者的血标本张冠李戴，安全输血的所有(suyu)防范措施都将化为泡影。减少这种错误的有效方法是给每一位住院患者手腕上系上一个腕带（腕环）；各种各样的塑料腕带在国外已广泛使用，国内已有不少医院开始使用。,一、重视(zhngsh)血液标本,4,第四页，共六十九页。,应制定严格的“血标本的采集与送检管理制度”，并做到医、护、技人人皆知：患者在采集血标本后又转科或转床，需要(xyo)输血时应重新采集血标本（有腕带可例外）；未配戴腕带而又不知血型的患者，应遵循两次采集血标本的规定；,一、重视(zhngsh)血液标本,5,第五页，共六十九页。,检验科做血常规时做正定型，输血(sh xu)时由血库复查正定型，加做反定型；或者备血时由血库做血型鉴定，输血时重新采集血标本做血型鉴定及交叉配血试验。如果两次血标本血型不一致，或血标本血型与申请单上的血型不一致，则应重新采集血标本。,一、重视(zhngsh)血液标本,6,第六页，共六十九页。,采集血标时必须认真核对受血者身份，只有申请单上的资料与患者腕带的资料完全一致才能采集血标本。使用条形码的医院，应在采血后将标有患者信息的条形码标签(bioqin)贴在试管上并与腕带资料核对。,一、重视(zhngsh)血液标本,7,第七页，共六十九页。,采集血标本时应要求患者回答自己的姓名，意识不清应通过亲属确认患者身份。不得使用来源不明或无人对其来源负责的血标本。血标本采集后必须在离开床边之前在标本上标明患者姓名、住院号及标本采集日期（国外要求标明出生日期）。专用试管上有两个相同的号码条，在采集标本后立即(lj)将另一个号码条贴在输血申请单上。,一、重视(zhngsh)血液标本,8,第八页，共六十九页。,一位医护人员不得同时采集两位或两位以上患者的血标本，以避免(bmin)将血样注入到错误的试管中。最好由采血者和患者在申请单上签名，共同确认血标本的正确性。,一、重视血液(xuy)标本,9,第九页，共六十九页。,贴有标签的血标本连同输血申请单经核对后由医护人员送输血科（血库），双方核对后签名确认。不得由非医护人员送标本（护工送标本必须经过培训、考核并授权）。输血科（血库）工作人员在检验前必须确认试管上的标签与申请单上的资料(zlio)一致，如有疑问，应重新采集血标本。不得电话询问后就擅自修改错误的标签及申请单。,一、重视(zhngsh)血液标本,10,第十页，共六十九页。,血标本要做到八不收：血标本无标签或填写不清不收；血标本与申请单所填项目不符不收；血标本量少于3ml不收；血标本被稀释不收（如从输液管获取血标本，应以生理盐水(shnglynshu)冲注，并将首先抽取的5ml血液弃去）；,一、重视(zhngsh)血液标本,11,第十一页，共六十九页。,血标本溶血不收（溶血性疾病例外，为防止对溶血结果误判为阴性，建议反定型及交叉配血的细胞中加入EDTA，以阻断补体激活途径）；用肝素(n s)治疗者的血标本未用鱼精蛋白对抗使之凝结不收；,一、重视(zhngsh)血液标本,12,第十二页，共六十九页。,非医护人员送标本不收；用右旋糖酐等大分子物质治疗(zhlio)后采集的血标本未作标记说明不收（如已标记说明应将红细胞洗涤）。,一、重视(zhngsh)血液标本,13,第十三页，共六十九页。,献血者的血标本必须从与血袋相连的塑料管中获得(hud)。血清和血浆原则上均可用于输血前检验，但血清更好。原因是血浆中有时可出现细小纤维蛋白包裹红细胞的凝块，与凝集反应不易区分。,一、重视血液(xuy)标本,14,第十四页，共六十九页。,国外认为必须使用不抗凝或者(huzh)EDTA抗凝的血标本。如果用血浆标本，必须通过检测弱抗体来评估其有效性，确保临床有意义的抗体不被漏检。配血用的血标本必须是输血前3天之内的（我国规定），或血标本能代表患者当前免疫学状态的。,一、重视血液(xuy)标本,15,第十五页，共六十九页。,国外对有输血(sh xu)史患者的标本采集要求（见表1）表1 标本采集要求,一、重视血液(xuy)标本,16,第十六页，共六十九页。,当患者反复(fnf)输血，不需要每天采集血标本，但要每隔3天进行一次抗体筛选试验，随时了解是否有新的不规则抗体产生。不用溶血的血标本，因为血清中的游离血红蛋白可蒙蔽抗体引发的溶血现象。,一、重视血液(xuy)标本,17,第十七页，共六十九页。,标本保存不当(b dn)会溶血、细菌污染、补体失活以及不规则抗体效价降低。保存要求见表2表2 标本保存要求,一、重视血液(xuy)标本,18,第十八页，共六十九页。,常规ABO血型鉴定应包括(boku)正反定型，二者起到互相验证和质控的作用。我国已规定常规血型鉴定还应包括(boku)Rh（D）定型。反定型要用试管法，不用玻片法。ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂，抗-B试剂不应该与获得性B抗原反应。,二、坚持(jinch)正反定型,19,第十九页，共六十九页。,采用A和B试剂细胞进行反定型检测。新生儿和以前做过反定型可省略。依据记录而省略反定型存在一定风险，因为第一次标本有可能采错。只有正反定型结果相符才能正确(zhngqu)判定ABO血型。单纯正定型O型不可靠，单纯反定型AB型也不可靠。,二、坚持(jinch)正反定型,20,第二十页，共六十九页。,正反定型不一致，需进一步鉴定：在正定型试剂中增加抗-A1、抗-AB及抗-H：抗-AB用来确认弱A和弱B抗原(kngyun)（这种抗-A和抗-B的混合物与弱A和弱B亲和力强，发生强烈反应）；,二、坚持(jinch)正反定型,21,第二十一页，共六十九页。,抗-A1用来(yn li)鉴定A亚型（A型中A1和A2这两种亚型占99.99%，A1约占80%，A2约占20%，抗-A1与A2不反应）；抗-H用于鉴定亚型及孟买型（亚型细胞上有较多的H抗原，与抗-H反应较强，而孟买型红细胞上无H抗原）。,二、坚持(jinch)正反定型,22,第二十二页，共六十九页。,在血型鉴定中有若干因素可导致错误结果：人为因素有：试剂不标准、失效或污染；操作中加错样本或试剂；离心速度不足或过度；细胞(xbo)与血清比例不当，结果判断错误等；人工判读结果有可能发生书写错误。,二、坚持(jinch)正反定型,23,第二十三页，共六十九页。,客观因素有：因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱；红细胞发生多凝集现象或产生类B物质（如细菌感染）；抗体(kngt)效价低（如婴幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症等）；血清中有意外抗体，某些药物干扰等。,二、坚持(jinch)正反定型,24,第二十四页，共六十九页。,反定型对ABO亚型的发现特别有帮助。原因是亚型患者红细胞上A或B抗原很弱，通过(tnggu)正反定型易于发现二者结果不一致，从而引起警惕。出现异常结果的处理办法：正反定型不一致应重新检测；重新检测时应使用洗涤红细胞。为预防差错事故发生，建议使用原始标本重新配制红细胞悬液而不用以前配好的红细胞，同时应做自身对照。,二、坚持(jinch)正反定型,25,第二十五页，共六十九页。,如果重新检测(jin c)结果仍然异常，请资深工作人员协助。当检测结果与以往记录不一致时，应重新采集血标本再一次检测。如果一时无法找到正反定型结果不一致的原因，患者又需紧急输血，此时可输注Rh（D）同型的O型红细胞（正反定型相符）。,二、坚持(jinch)正反定型,26,第二十六页，共六十九页。,Rh（D）血型鉴定原则：对受血者常规只测Rh（D）抗原；对献血者不仅要检测Rh（D）抗原，在初筛为阴性时必须进一步确定是否为弱D；弱D针对(zhndu)受血者而言为Rh（D）阴性，而对献血者而言则为Rh（D）阳性；,二、坚持(jinch)正反定型,27,第二十七页，共六十九页。,当Rh（D）定型结果有疑问时，在确认之前应当作阴性(ynxng)对待；目前各种单克隆抗-D检测部分D或弱D时差异较大，建议使用两种以上不同厂家的试剂有助于弱D的定型。,二、坚持(jinch)正反定型,28,第二十八页，共六十九页。,紧急情况下血型鉴定(jindng)时，必须做正定型及阴阳性对照（见表3），或者正反定型。表3 阴性/阳性对照表,二、坚持(jinch)正反定型,29,第二十九页，共六十九页。,当患者体内含有高效价的冷自身抗体或冷凝集素时。采用温的盐水洗涤细胞有助于血型鉴定。日常工作中需要定期做阳性/阴性对照，使用自动化检测设备时，应在常规检测中加入(jir)对照标本；采用手工操作时应每一批次做阳性/阴性对照。,二、坚持(jinch)正反定型,30,第三十页，共六十九页。,在可能的情况下，最好每天在使用定型试剂前作阳性/阴性对照，以检测其活性。在观察(gunch)定型结果时，既要观察(gunch)有无凝集，也要观察(gunch)凝集强度，这有助于A、B亚型、类B等的发现。,二、坚持(jinch)正反定型,31,第三十一页，共六十九页。,对受血者作抗体筛选的目的是检出有临床意义的抗体，并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免盲目配血。方法是用受检者血清与试剂(shj)红细胞起反应，以发现在37有临床意义的抗体。,三、做好抗体(kngt)筛选,32,第三十二页，共六十九页。,抗体筛选试验用的筛选细胞(xbo)通常以23个单人份的O型红细胞(xbo)组成一套筛选细胞(xbo)试剂。抗体筛选用试剂红细胞必须含有18种抗原，所表达的抗原以纯合子基因所表达的抗原为佳，随机获得的O型红细胞易造成抗体漏检。,三、做好抗体(kngt)筛选,33,第三十三页，共六十九页。,抗体筛选试验的方法很多，国外以间接抗球蛋白法为金标准，国内中小医院多采用凝聚胺法，大医院多采用微柱凝胶技术。微柱凝胶法是简单、有效检测不规则抗体的方法，但无法排除无临床意义抗体的干扰。抗体筛选用的红细胞一定要保存在4环境(hunjng)中，以防红细胞上抗原丢失。,三、做好抗体(kngt)筛选,34,第三十四页，共六十九页。,抗体筛选(shixun)试验并非能检出所有有临床意义的抗体。原因有二：一是低频抗原的抗体可能被忽略；二是以往所产生的抗体已降至难以检出的水平。以往的抗体鉴定记录有重要参考价值。,三、做好抗体(kngt)筛选,35,第三十五页，共六十九页。,国外对所有受血者常规(chnggu)作抗体筛选试验，并认为抗体筛选是检测不规则抗体最可靠、最敏感的方法。我国规定凡遇下列情况之一必须做抗体筛选试验：交叉配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者。,三、做好抗体(kngt)筛选,36,第三十六页，共六十九页。,如抗体筛选试验阳性，缺乏谱细胞鉴定其特异性时，可送有条件的单位鉴定。抗体鉴定试验包括：自身细胞检查(jinch)：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同种抗体并存；,三、做好抗体(kngt)筛选,37,第三十七页，共六十九页。,使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由816单人份的已知血型表型的O型红细胞配套组成，具有(jyu)各种不同的抗原成分；根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体。国外认为采用一组谱细胞进行抗体鉴定有一定的局限性，有可能漏检常见的组合