2022年医学专题—医院感染学-标本采集和判断(1).ppt

医院感染标本的采集与结果(ji gu)判断,李芳芳讲师(jingsh),第一页，共三十九页。,病例：某院胸外科在一个星期内分别送来三份不同病人的标本(biobn)（痰标本(biobn)、切口分泌物标本(biobn)、血标本(biobn)），经检测均检出了金黄色葡萄球菌，PCR结果相同，耐药谱结果相同：耐药：头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、青霉素、氨苄青霉素、羧苄青霉素，敏感：万古霉素。,？What,？How,耐甲氧西林(x ln)金黄色葡萄球菌,爆发(bof),第二页，共三十九页。,临床标本检验对病人(bngrn)及带菌者进行监测配合医院感染爆发的调查配合抗生素合理使用的管理医院环境的细菌学监测研究与教育,临床(ln chun)微生物学实验室的任务,第三页，共三十九页。,医院感染(gnrn)标本采集及检验,标本采集(cij)、检验的一般程序医院感染标本采集的一般标准标本的运送与处理各类医院感染标本的采集和检验,第四页，共三十九页。,临床需要医生选择合适的方法(fngf)、开医嘱、填写申请单护士备物、采集标本（正确的用物、时间、方法(fngf)）卫勤中心运送标本微生物实验室检验出报告、指导临床用药,标本采集及检验(jinyn)一般程序,您认为在标本采集(cij)和检验时要注意什么？,第五页，共三十九页。,标本采集的一般(ybn)标准,标本容器(rngq)的要求：无菌干燥、宽口棉拭要求：不同部位的标本采集：眼、耳、鼻、喉、创面、脓肿、组织标本、痰、脑脊液,标本及化验单：病人姓名、采集时间及日期、病区、床号、标本名、采集部位(bwi)、临床诊断、检验项目与抗生素使用的时间关系存在正常菌群部位：消毒或绕道,第六页，共三十九页。,Lipsky和Plorde将标本按存在(cnzi)部位的深浅分为三层,深层标本：循环血液、胸液、腹腔(fqing)液、关节液深层标本但与外界相通：子宫内膜、膀胱、瘘管严重污染有正常菌群的标本：皮肤或粪便等,第七页，共三十九页。,标本(biobn)的运送与处理,标本采集(cij)后应尽快送检采集与培养有时间间隔收到标本后的处理：检查-肉眼观察-处理-涂片检查-电话通知 立即处理的标本：脑脊液、眼分泌物，洗胃液 肺组织(查结核分支杆菌)可暂缓处理的标本：创面拭子、痰、粪便（冷藏2-3小时）、尿（冷藏24小时）,第八页，共三十九页。,三、各类标本的采集(cij)和检验,血标本(biobn)尿标本呼吸道标本粪标本脑脊液标本脓及伤口标本,第九页，共三十九页。,（一）血标本(biobn),采样时机：菌血症出现于发热或寒战(hnzhn)前1h内细菌性心内膜炎 3次血培养（24h内3次,次间隔1h）间歇性菌血症 3次/24-48h内、不同部位已接受抗生素治疗的病人 4-6次，吸收或中和血中的抗生素,第十页，共三十九页。,血标本(biobn),采样方法消毒 抽取（干燥、灭菌的针筒）更换针头 注入(zh r)培养基 混合 周围血推片量：培养基的1/10 成人：5-10mL（SBE10-20ml）婴儿及儿童：1-2mL,第十一页，共三十九页。,血标本(biobn),检验(jinyn)方法,第十二页，共三十九页。,血标本(biobn),抽血至培养(piyng)瓶（需氧或厌氧）,35普通(ptng)孵育,置全自动血培养仪,每日观察,仪器阳性报警,无细菌生长,检验方法,第十三页，共三十九页。,血标本(biobn),检验(jinyn)方法,第十四页，共三十九页。,结果(ji gu)分析有意义菌：类杆菌、肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌无病原学意义菌：非溶血性链球菌（D族除外）、类白喉杆菌、芽胞杆菌,血标本(biobn),第十五页，共三十九页。,（二）尿标本(biobn),中段尿采样女性：清洁(qngji)-清洗-无菌纱布擦干-分开阴唇-置棉花于阴道口-留取中段尿10ml（灭菌容器）男性：清洗-冲洗-留取中段尿老年人和儿童：清洁外生殖器及肛门部位，用清洁的尿盆或烧瓶接取,第十六页，共三十九页。,其它(qt)采样方法耻骨上膀胱穿刺抽吸采样：膀胱充盈时，19号或20号针头及针筒，穿刺点-脐与耻骨联合中点连线的下1/3处长期导尿者：消毒尿管与引流管接头，无菌空针抽取膀胱镜检、导尿管导尿、逆行肾盂造影术：术中采取输尿管膀胱梗阻：分段采集数份，分别培养,尿标本(biobn),第十七页，共三十九页。,检查(jinch)方法,湿片镜检-指导培养离心-沉淀(chndin)-涂片-染色分离培养-菌落观察-涂片-镜检 纯培养 结核杆菌检查-抗酸染色 培养（罗氏培养基）,尿标本(biobn),第十八页，共三十九页。,1份标本(biobn)10个油镜视野，每个视野细菌数：1-10个-每1mL尿液有104-105个细菌 污染或特殊情况100-1000个-每1mL尿液有106-108个细菌 尿路感染 常见病原菌：大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌、伤寒沙门菌等,临床意义,尿标本(biobn),第十九页，共三十九页。,尿快速检验(jinyn)报告（24h报告）,无细菌生长或尿液含菌数103cfu/ml尿液含菌数105cfu/ml,确定为大肠杆菌或粪链球菌,直接药敏试验结果(ji gu)满意，作最后报告尿液含菌数105cfu/ml，但鉴定结果不典型，24小时预报，第二天作细菌鉴定和纯菌的药敏试验，争取48小时最后报告,尿标本(biobn),第二十页，共三十九页。,（三）呼吸道标本(biobn),标本采集(cij)采集时间-晨痰采集方法：咽拭子：灌注活性炭粉的棉拭、Stuart运输培养基痰标本：清晨咳痰法、小儿取痰法、导管取痰法、气管穿刺吸痰法、气管切开者深入透气孔中取痰、纤维支气管镜采取痰标本,第二十一页，共三十九页。,痰标本(biobn)的处理,取可疑部分（脓、血）接种及涂片涂片三张：1张革兰染色、1张抗酸染色、1张备用接种5%血平板(pngbn)1个：分离全部细菌中国兰平板1个：直接药敏试验,呼吸道标本(biobn),第二十二页，共三十九页。,痰标本(biobn)检查方法,直接镜检:标本是否(sh fu)合格、区分正常部分和病变部分结核菌检查：抗酸染色、罗氏培养基-鉴定-药敏试验分离培养（巧克力平板、血平板）：菌落观察-鉴定,呼吸道标本(biobn),第二十三页，共三十九页。,不合格标本：标本中平均(pngjn)每个视野内扁平上皮细胞多于25个，找不到病变部分。,合格标本：标本中可见白细胞（脓细胞）、柱状上皮细胞集中，有时还可见到不少(b sho)黏液丝（标本来自气管或支气管内分泌物）。,镜下观察(gunch),第二十四页，共三十九页。,检验(jinyn)报告,直接镜检报告（约2h）：标本是否合格(hg)、有无脓细胞、柱状上皮细胞、扁平上皮细胞的数量、阳性球菌？阴性球菌？培养检查结果报告：5%血平板、中国兰平板、药敏试验结果,呼吸道标本(biobn),第二十五页，共三十九页。,上呼吸道正常寄生菌：草绿色链球菌常见病原菌：肺炎链球菌、A族链球菌、金黄色葡萄球菌(p to qi jn)、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分支杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌等,临床意义,呼吸道标本(biobn),第二十六页，共三十九页。,（四）粪标本(biobn),采集：量-0.52g，保存液，4oC24h检验的方法：直接涂片镜检：只用于怀疑霍乱弧菌感染或伪膜性结肠炎、葡萄球菌小肠结肠炎、白色念珠菌病培养检查：与临床(ln chun)微生物实验室常规方法相同,第二十七页，共三十九页。,（五）脑脊液标本(biobn),采集时间：立即送检采集方法：备物 腰椎穿刺(chunc)分装处理：直接涂片分离培养（注意保温）抗生素敏感试验（立即报告）,第二十八页，共三十九页。,（六）脓及伤口(shngku)标本,采集：脓肿未破口、深部脓肿：局部消毒，以无菌法抽取，隔绝空气送检脓肿已破口：应用针头(zhntu)抽取深部脓液，放入Stuart运送培养基送检开放伤口、溃疡、瘘管：清洗、消毒，刮取或切取烧伤创面：痂下变黑或变形的不健康区边缘,第二十九页，共三十九页。,检验(jinyn)及报告,直接涂片：分离培养：厌氧培养、需氧培养抗生素药敏实验(shyn)：只有一种、足够数量-直接药敏试验多种细菌-分离出纯菌后-药敏试验报告：直接涂片2h内，分离培养顺利者24h,需补充试验者24h预告，48h出最后报告一般可在72h报告有无厌氧菌，争取4天出最后报告,脓及伤口(shngku)标本,第三十页，共三十九页。,四、检验结果(ji gu)分析,直接涂片染色及镜检结果(ji gu)分析镜检阴性 培养结果阳性镜检阳性 无临床表现 与培养结果相同 培养阴性,第三十一页，共三十九页。,尿培养报告单金黄色葡萄球菌敏感(mngn)：万古霉素中介：氧氟沙星（诺氟沙星）耐药：青霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、氨苄青霉素、羧苄青霉素,报告单结果(ji gu)分析,第三十二页，共三十九页。,最低抑菌浓度(nngd)（Minimal inhibitory concentration,MIC）最低杀菌浓度（Minimal bactericidal concentration,MBC）,药物(yow)敏感试验,第三十三页，共三十九页。,用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长的效能(xionng)。定性测试的扩散法（diffusion test）定量测定的稀释法（dilution test）临床常用由Bauer和Kirby建立的纸片琼脂扩散法，即KirbyBauer法。,抑菌试验(shyn)（bacteriostatic test）,第三十四页，共三十九页。,抑菌试验(shyn),第三十五页，共三十九页。,敏感（susceptible，S）：所测药物的常规给药剂量所达到的体内浓度能抑制或杀灭待测菌,即平均(pngjn)血药浓度 MIC的5倍中介（intermediate，I）：在药物浓集部位的体液中或大剂量给药后在体内的药物浓度能抑制待测菌，平均血药浓度 MIC；在“耐药”和“敏感”之间的缓冲带耐药（resistant，R）：待测菌不能被所测药物常规剂量的体内浓度所抑制。,抑菌试验结果(ji gu)判断,第三十六页，共三十九页。,尿培养报告单金黄色葡萄球菌(p to qi jn)敏感：万古霉素中介：氧氟沙星（诺氟沙星）耐药：青霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、氨苄青霉素、羧苄青霉素,报告单结果(ji gu)分析,第三十七页，共三十九页。,谢谢(xi xie),第三十八页，共三十九页。,内容(nirng)总结,医院感染标本。检查-肉眼观察-处理-涂片(t pin)检查-电话通知。成人：5-10mL（SBE10-20ml）。菌种鉴定（生化鉴定：传统或自动化）。老年人和儿童：清洁外生殖器及肛门部位，用清洁的尿盆或烧瓶接取。1份标本10个油镜视野，每个视野细菌数：。尿液含菌数105cfu/ml,确定为大肠杆菌或粪链球菌,直接药敏试验结果满意，作最后报告。直接镜检:标本是否合格、区分正常部分和病变部分。谢谢,第三十九页，共三十九页。,