其中,动物细胞培养技术(jìshù)是其他动物细胞工程技术(jìshù)的基础。动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合生产单克隆抗体第一页,共二十四页。烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学(tóngxué)们想一想如何来治疗该病人?思考(sīkǎo)?第二页,共二十四页。取该患者的皮肤进行细胞培养,获得(huòdé)人造皮肤后再移植。第三页,共二十四页。是指从动物机体(jītǐ)内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。(二)、原理(yuánlǐ)细胞分裂增殖一、动物细胞培养第四页,共二十四页。取动物(dòngwù)组织块剪碎组织(zǔzhī)胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础剪碎组织及胰蛋白酶处理的目的?剪碎组织及胰蛋白酶处理的目的:将组织分散成单个细胞,有利于细胞与培养液充分接触,便于培养。制成细胞悬液动物胚胎或幼龄动物器官因为这些组织或器官,分裂能力旺盛,易于培养。第五页,共二十四页。1.细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑(guānghuá)无毒、易于贴附。2.接触抑制第六页,共二十四页。接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞(xìbāo)就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。50代以后失去接触抑制接触抑制(细胞(xìbāo)为单层)50代以后(yǐhòu)细胞失去接触抑制第七页,共二十四页。•原代培养:人们通常(tōngcháng)将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。•传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。第八页,共二十四页。培养培养(péiyǎng)(péiyǎng)过程:过程:动物胚胎或幼龄动物的细胞(xìbāo)、组织或器官细胞(xìbāo)悬浮液→原代培养传代培养10代细胞50代细胞无限传代单个细胞胰蛋白酶加培养液剪碎细胞贴壁剥离分瓶部分细胞的细胞核型发生变化动物细胞培养最终不能培养成动物体接触抑制第九页,共二十四页。第十页,共二十四页。超净工作台实验(shíyàn)设备细胞(xìbāo)培养箱倒置(dàozhì)显微镜第十一页,共二十四页。1、无菌、无毒的环境(①添加(tiānjiā)一定量的抗生素;②定期更换培养液)2、营养(葡萄糖、氨基酸、促生长因子...