课题课题22土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌(xìjūn)(xìjūn)的分离与计数的分离与计数第一页,共三十页。一、课题一、课题(kètí)(kètí)背景背景11、尿素、尿素(niàosù)(niàosù)的利的利用用尿素尿素是一种是一种(yīzhǒnɡ)(yīzhǒnɡ)重要的重要的农业氮肥。农业氮肥。尿素尿素不能直不能直接接被农作物被农作物吸收。吸收。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因CO(NHCO(NH22))脲酶脲酶+CO+CO22NHNH33+H+H22OO第二页,共三十页。课题课题(kètí)(kètí)目的目的①①从土壤中分离出能够从土壤中分离出能够分解分解(fēnjiě)(fēnjiě)尿素的细尿素的细菌菌②②统计每克土壤样品中究竟含有统计每克土壤样品中究竟含有(hányǒu)(hányǒu)多少这多少这样样的细菌的细菌第三页,共三十页。11、实例、实例(shílì)(shílì)::原因:因为热泉温度原因:因为热泉温度7070~~808000CC,淘汰了绝大多,淘汰了绝大多数微生物只有数微生物只有TaqTaq细菌细菌(xìjūn)(xìjūn)被筛选出来。被筛选出来。PCR,PCR,此项技术此项技术(jìshù)(jìshù)要求使要求使用用耐高温(耐高温(939300CC)的)的DNADNA聚合酶。聚合酶。㈠㈠..筛选菌株筛选菌株筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件,同筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长。时抑制或阻止其他微生物生长。第四页,共三十页。不加有机(yǒujī)碳源不加氮源2.选择(xuǎnzé)培养基的制作方法自养微生物酵母菌和霉菌(méjūn)固氮微生物加入青霉素加高浓度食盐金黄色葡萄球菌第五页,共三十页。15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433..土壤中分解土壤中分解(fēnjiě)(fēnjiě)尿素的细菌的分离与计数所需培尿素的细菌的分离与计数所需培养基:养基:①①从物理性质从物理性质(wùlǐxìngzhì)(wùlǐxìngzhì)看此培养基属于哪类?看此培养基属于哪类?固体固体(gùtǐ)(gùtǐ)培养培养基基第六页,共三十页。②②在此培养基中哪些在此培养基中哪些(nǎxiē)(nǎxiē)作为碳源、氮源?作为碳源、氮源?碳源:碳源:葡萄糖、尿素葡萄糖、尿素(niàosù)(niàosù)氮源:氮源:尿素尿素培养基的培养基的氮源为尿素氮源为尿素,只有能合成,只有能合成脲酶脲酶的微生物的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。才能分解...