第一页,共四十五页。动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的根底。提问:植物细胞工程常用的技术手段有哪些?植物组织培养,植物体细胞杂交第二页,共四十五页。动物细胞培养和核移植技术•动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。1、选材:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。第三页,共四十五页。在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶〔2.0〕没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。2.分散成单个细胞第四页,共四十五页。3.动物细胞生长特性:•细胞贴壁:•悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,•称为细胞贴壁。•要求:•培养瓶或培养皿的内外表光滑、无毒、易于贴附。•细胞的接触抑制:•当贴壁细胞分裂生长到外表相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。•第五页,共四十五页。4.过程:第六页,共四十五页。细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系5.如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系?多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变第七页,共四十五页。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液细胞株细胞系细胞增值无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体第八页,共四十五页。动物细胞培养条件:1、无菌、无毒的环境〔添加一定量的抗生素,定期更换培养液〕2、营养〔葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。〕3、温度和PH36.5+〔-〕0.5度,7.2-7.44、气体环境:O2和CO2〔95%空气和5%CO2〕保证细胞顺利的生长增殖第九页,共四十五页。动物细胞培养液的主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物培养基相比其特点是:〔1〕液体培养基〔2〕含有动物血清动物体细胞大都生活在液体的环境第十页,共四十五页。细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较工程植...