蛋白质(protein)是生命的物质根底,是有机大分子,是构成细胞的根本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。机体中的每一个细胞和所有重要组成局部都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由20多种氨基酸(Aminoacid)按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。蛋白质的重要性第一页,共三十一页。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要成分,负责运输O2和CO2第二页,共三十一页。课题3血红蛋白的提取和别离第三页,共三十一页。一、根底知识〔一〕蛋白质提取和别离的原理〔二〕蛋白质提取和别离的方法第四页,共三十一页。根据蛋白质的物理化学性质差异:1.分子的形状、大小〔一〕思考:蛋白质的种类多种多样,进行蛋白质提取与别离的原理是什么?第五页,共三十一页。1、凝胶色谱法〔分配色谱法〕小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部,路程长,流动慢;大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快。凝胶是由多糖类化合物〔如葡聚糖或琼脂糖〕构成的多孔小球体,内部有许多贯穿的通道。根据别离蛋白质的方法。〔1〕概念:〔2〕材料:〔3〕原理:〔二〕蛋白质提取和别离的方法相对分子质量的大小第六页,共三十一页。第七页,共三十一页。洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。混合物上柱洗脱大分子流动快小分子流动慢收集大分子收集小分子第八页,共三十一页。2、电泳法〔2〕原理:带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。〔1〕电泳:①许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的PH下,这些基团会带上正电或负电。②在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③电泳利用了待别离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小,形状的不同使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的别离。〔二〕蛋白质提取和别离的方法第九页,共三十一页。电泳原理示意图第十页,共三十一页。思考:影响蛋白质分子运动速度的因素决定运动方向电场作用力形成阻力决定运动速率电荷性质电荷量分子形状分子大小√√√√√√√第十一页,共三十一页。〔〔33〕常见电泳方法有哪些?〕常见电泳方法有哪些?琼脂糖凝胶电泳和聚丙稀酰胺凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳和聚丙稀酰胺凝胶电泳〔〔44〕实例〕实例通常使用:十二烷基磺酸钠〔通常使用:十二烷基磺...