饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学检验 Baird-Parker琼脂培养基计数法 GBT 23743-2009.pdf

GB/T23743-2009度的水。5.2稀释液生理盐水：氯化鈉8.5g水1000mL溶解后，分装到加有玻璃珠的锥形瓶内，每瓶225mL,121C灭菌15mi。5.3 Baird-Parker琼脂培养基注：可以使用商品培养基。使用时，严格按照使用说明操作5.3.1基础培养基5.3.1.1成分胰蛋白胨10.0g酵母膏1.0g肉膏5.0g丙酮酸钠10.0gL-甘氨酸12.0g氯化锂5.0g琼脂12g22g水终体积为1000m5.3.1.2制备将上述成分煮沸溶解，商品基础培养基则按使用说明配制。必要时校正H,使培养基灭菌后在25C下pH为7.2土0.2。然后分装100mL到三角瓶或其他合适的容器中。121C灭菌15mi。5.3.2溶液5.3.2.1亚碲酸钾溶液5.3.2.1.1成分亚碲酸钾2(K:TcO)1.0g水100mL5.3.2.1.2制备稍微加热，使亚碲酸钾在水中完全溶解。亚碲酸钾应当是易溶的，如果在水中有白色不溶物，此试剂不可再用。用0.22m的滤膜过滤除菌。此溶液在3士2最多可保存一个月。溶液中形成白色沉淀时，应弃之不用。5.3.2.2卵黄乳液浓度约为20%或遵照厂家规定。注：可使用商品培养基。取外壳完好的新鲜鸡蛋，用刷子燕液体清洁剂制洗蛋壳，再在流水中冲洗。然后将它们浸入70%酒精30s消毒后风干或用酒精喷洒之上，采用火焰灭菌。在无菌条件下，打破鸡蛋，不断吸出卵黄，从而把蛋白和卵黄分开。将卵黄放入灭菌三角瓶中，加入四倍体积的水，充分搅匀，47水浴中加热2h,然后置于3C士2C下保持18h24h以形成沉淀。无菌操作，将上清液转人另一灭菌三角瓶中。1琼脂的添加量取决于凝胶的强度，2建议在使用之前，检查用于本试验的亚蹄酸钾的有效性（见5.3.2.1.2），