饲料中硒的测定方法 23-二氨基萘荧光法 GBT 13883-1992.pdf

GB/T13883-924.10硒标准工作溶液吸取(4.9)溶液1.00mL、入50mL高型烧杯中按分析步骤消化至高氯酸冒烟5min,取下稍冷.加1mL水和1mL盐酸(4.4)摇匀，放置10min用盐酸(4.5)转移至250mL容量瓶中并稀至刻度摇匀，此液1.00mL含硒0.1g。4.11甲酚红0.4gL水溶液，称取0.1g甲酚红入400mL烧杯中，加少许水加氨水(4.6)使其溶解用水稀至250mL,摇匀.5仪器、设备5.1荧光光度计激发波长365385nm,荧光发射波长520525nm,1cm石英比色杯。5.2实验室用样品粉碎机标准分析筛孔径(0.42、0.25mm)。5.3分析天平分度值0.0001g。5.4可调温电炉(600W)或电热板(3000W)。5.5高型烧杯50mL和相应大小的表面皿。5.6具塞比色管50mL.5.7刻度吸量管2mL、10mL。6试样的制备取已粉碎至0.42mm的试样4050g入250mL烧杯中加水至能搅动的糊状，在搅拌器上搅1015min,倒在小塘瓷盘中铺平，放入烘箱70烘干，粉碎机上磨至0.25mm,混匀装入密封容器中备用，防止试样成分变化。7分析步骤7.1试样测定（配合饲料、浓缩料、单一饲料）称取已制备好的试样约1g,精确至0.0001g(0.4gS),放入50mL高型烧杯中，用少量水润湿试样加硝酸(4.2)10mL,轻摇烧杯使试样散开，加盖表面皿放到电热板(5.4)上低温加热见反应开始(泡沫开始上冒)，切断电源或取下待剧烈反应缓解（气泡不上涌）后再放到电热板上煮沸至硝酸体积减少到5mL左右，取下稍冷加入5mL高氯酸(4.1)继续加热至剧烈小气泡冒完，高氯酸冒烟：取下稍冷，用水吹洗表面皿和杯壁，去掉表面皿，将烧杯置电热板上先低温蒸发水分，再升温至高氯酸冒烟并保持510min,取下稍冷，加入1mL水和1mL盐酸(4.4)，摇匀，放置10min,水稀至30mL左右，加二滴甲酚红(4.11)，用氨水(4.6)中和至黄色，再用盐酸(4.4)中和至橙色(pH1.52),加入3mL盐酸羟胺溶液(4.7)摇匀，用盐酸(4.5)转移到50mL比色管中(5.6)，加2 mLDAN溶液(4.8)，盖好塞子，摇匀，松动塞子，置于100水中保持5min。取出放入冷水中迅速冷却至室温，用盐酸(4.5)稀至50mL,加5mL环己烷(4.3)振荡1min,静置分层后，用吸管小心吸取上部环己烷入1cm石英杯中，置入荧光光度计内于激发波长375380nm,发射波长520525nm测其荧光强度，在标准曲线上查得试料中硒的含量。同时做空白试验（消化时应藏防护眼镜）。7.2高含量硒样品（预混合料）的测定对于每千克含硒在1mg以上含有机物的样品，按(7.1)进行至加入1mL水和1mL盐酸(4.4)摇匀，放置10min后将消化液稀释至足够体积，然后取部分溶液(Se0.4g)进行测定。对于以石粉为载体的预混料，称取15g样品（精确到0.0001g),于250mL烧杯中，加入20mL水和25mL硝酸