实验动物 多瘤病毒检测方法 GBT 14926.29-2001.pdf

中华人民共和国国家标准实验动物GB/T14926.29-2001多瘤病毒检测方法代替GB/T14926.29一1994Laboratory animal-Method for examination ofpolyoma virus(POLY)1范围本标准规定了小鼠多瘤病毒(POIY)的检测方法和试剂等。本标准适用于小鼠POLY的检测。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51一2001实验动物免疫酶试验GB/T14926.52一2001实验动物免疫荧光试验3原理根据免疫学原理，采用POLY抗原检测小鼠血清中POLY抗体。4主要试剂和器材4.1试剂：4.1.1 ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原POLY接种小鼠胚(ME)或3T3细胞，加维持液培养1014d,当细胞病变达十十十十十十十时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原ME或3T3细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞醉片而获得的上清液。4.1.2抗原片：POLY接种ME细胞，培养1012d,病变达+十+十时用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片。室温干燥后，冷丙酮固定10min,一20保存。4.1.3阳性血清POIY抗原免疫SPF小鼠所获得的抗血清。4.1.4阴性血清SP小鼠血清。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准2002-05-01实悼35