配合饲料中T-2毒素的测定 薄层色谱法 GBT 8381.4-2005.pdf

1CS65.120B46B中华人民共和国国家标准GB/T8381.4-2005配合饲料中T-2毒素的测定薄层色谱法Method for determination of T-2 toxin in formula feed-Thin layer chromatography2005-09-05发布2006-02-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T8381.4-2005子，在120烘干备用。4.16T-2毒素标准品溶液：称取T-2毒素标准品(4.1)25.0mg,精确到0.1mg,用无水乙醇(4.2)溶解，转入50mL量瓶中，再用无水乙醇稀释至刻度，此溶液含T-2毒素0.5mg/mL。吸取此标准溶液1.0mL,用无水乙醇稀释至10mL,此溶液含T-2毒素50g/mL。5仪器和设备5.1分析天平：感量0.0001g。5.2天平：感量0.01g,5.3小型粉碎机。5.4电动震荡器。5.5旋转蒸发器。5.6层析柱：内径2cm,长10cm,5.7具塞浓缩瓶：容量10mL,底部具0.2mL刻度尾管。5.8玻璃板：规格5cm20cm。5.9薄层涂布器：涂布厚度0.3mm。5.10展开槽：卧式，内长25cm,宽6cm,高4cm;立式，内长10cm,宽6cm,高25cm。5.11紫外光灯：波长365nm。5.12微量注射器：10L、25L。6试样的制备将按GB/T14699.1取得的样品，四分法缩分，取约200g,经粉碎，全部过1mm孔筛，混匀，装人磨口瓶中备用。7测定步骤7.1提取称取20g试样(6)，精确到0.01g,置200mL具塞锥形瓶中，加8mL水和100mL三氯甲烷-无水乙醇(4.7)，密塞，在瓶塞上涂层水，盖严防漏。振荡1h,通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于100mL蒸发瓶中，置旋转蒸发器(5.5)上45C诚压蒸发至干。7.2净化7.2.1液-液分配用100mL石油醚(4.3)分次溶解蒸发瓶中的残渣，洗入250mL分液漏斗中，再用30mL甲醇-水(4.8)分次洗涤蒸发瓶，转人同一分液漏斗。振摇分液漏斗1.5min,净置约15min,使分层后，将下层甲醇-水提取液过净化柱，不要将两交界处的白色絮物放入柱内。7.2.2柱净化在层析柱(5.6)下端塞约0.1g脱脂棉，尽量塞紧，先装入0.5g中性氧化铝(4.14)，敲平表面，再加入0.5g活性炭(4.15)，敞紧。将层析柱下端插入胶塞，塞在抽滤瓶上，抽滤瓶中放入一平底管接收流出液。打开真空泵，使活性炭压紧，将分液漏斗中的甲醇-水提取液小心地沿管壁加入柱内，控制流速不超过3mL/mi,提取液过柱快完毕时，加人10mL甲醇-水淋洗柱，继续抽滤，直至不再有液体流出。7.3试料溶液的制备过柱后的流出液(7.2.2)转人100mL蒸发瓶中，置旋转蒸发器上，45C减压蒸发至干。取下蒸发瓶置沸水浴上至完全干燥，趁热加人3L乙梭乙脂(4.4)，加热至沸腾，在水浴上轻轻地反复播动蒸发瓶，使残渣中的T-2毒素溶出，冷却至室温后转入浓缩瓶(5.7)中。加约0.5mL甲醇-丙酮(4.9)于蒸发瓶中，超声破碎残渣，将蒸发瓶置水浴上挥干溶剂后，加入3L乙酸乙脂，加热至沸，转动蒸发瓶，使充