辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法 GBT 36780-2018.pdf

GB/T36780-2018前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口，本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检脸检疫局、中华人民共和国甘肃出人境检脸检疫局。本标准主要起草人：魏梅生、郭京泽、朱水芳、孔君、李桂芬、赵文军、王军平、文朝慧、尤佳。IGB/T36780-2018辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法1范围本标准规定了辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus)的检疫鉴定方法。本标准适用于寄主植株和未处理种子上辣椒轻斑驳病毒的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实险室用水规格和试验方法3病毒基本信息学名：Pepper mild mottle virus缩写：PMMoV中文名：辣椒轻斑驳病毒异名：烟草花叶病毒潜隐株系；烟草花叶病毒Samsun潜隐株系分类地位：植物杆状病毒科(Virgaviridae),烟草花叶病毒属(Tobamovirus)PMMoV的其他信息参见附录A。4原理PMMoV的蛋白和基因组特征是该病毒检测鉴定的依据。采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA)、斑点酶联免疫吸附测定(Do-ELISA)、胶体金免疫层析测定、RT-PCR、实时荧光RT-PCR等方法来特异性检测该病毒，并判断样品是否带有PMMoV。PMMoV的侵染性是该病毒生物学活性的重要指标。采用生物学接种的方法来判断病毒的活性。5仪器、用具及试剂5.1仪器电子天平（感量0.001g)。高速冷冻离心机（最大转速15000r/min)。小型猴时离心机（最大转速7000r/min).普通冰箱(4)。超低温冰箱（一80）。制冰机（每日制冰能力为110kg)。旋涡振荡器（最大转速2800r/min)。磁力搅拌器（搅拌容量50mL一2000mL)。1